转基因水稻外源基因的遗传和表达初步研究

将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻TN1发芽肿胚，获得转基因植株2株，转基因水稻T1－T5 5个世代不同株系，对bar基因、抗菌肽基因的遗传和表达进行初步研究。结果表明：转基因后代株系bar^R:bar^S在部分符合3：1分离比率。T1、T4转基因株系PCR、Southern印迹分析表明，T18株有抗菌肽B基因；T4仍有4个株系有抗菌肽基因，其他的株系基因丢失，T3 1个株系Northern印迹证明抗菌肽基因在RNA水平有表达；抗菌肽B转基因水委对白叶枯病的抗病性有提高，抗性能传递到高世代，在T3得到抗病性提高的株系。     

水稻原生质体愈伤组织再生植株培养程序的比较

在4种不同的培养程序中应用了几种处理方法, 并对其在诱导水稻原生质体起源的愈伤组织 再生植株中的效果进行了比较。 直接将愈伤组织从含有2,4-D的增殖培养基转移到含有BA 和NAA的植株再生培养基上培养, 只能得到少量的弱苗(第1种程序)。 在增殖培养基中添加 ABA诱导了结节状的愈伤组织形成, 使愈伤组织的植株再生能力明     

籼稻秋桂矮11叶原生质体的植株再生

以广东籼稻良种秋桂矮１１为材料,切取１１ｄ苗龄的叶基和叶鞘,游离原生质体,以台北３０９悬浮细胞为饲养层,放在饲养层顶部滤膜上培养。用Ｎ６＋２,４－１．５ｍｇ．Ｌ＾－１＋玉米素０．２ｍｇ．Ｌ＾－１＋水解蛋白５００ｍｇ．Ｌ＾－１＋葡萄糖０．５ｍｏｌ．Ｌ＊－１＋Ｃ０．１５％琼脂糖半凝固培养基。     

影响水稻愈伤组织再生植株数量和质量的因素

以籼稻栽培品种成熟种子形成的愈伤组织为材料，对影响植株再生的数量和质量的一些因素进行了研究。与Ｎ６相比较，ＭＳ培养基中的无机大量成分严重抑制再生植株根系生长，但ＭＳ的无机微量成分对诱导植株再生的效果则较明显。培养基中的ＢＡ水平对植株再生具有数量上和质量上的双重影响，较高浓度的ＢＡ能诱导更多的植株再生，而较低的ＢＡ浓度则有利于再生植株的生长和根系的形成。培养容器的通气状况是影响再生植株数量和质量的另     

铜在水稻愈伤组织培养再生植株中的促进作用

 在培养基中添加各常用微量元素的实验结果表明,只有铜元素具有明显的促进水稻愈伤组织植株再生的作用。铜元素不仅能提高再生植株频率和数量,还能提高再生植株的重量,其作用浓度的范围相当宽广。采用添加5 μmol/L铜元素的方法调查另外15个品种的培养效果,发现其中有8个对铜元素的正向反应达到了统计学上的显著水平。据此认为,提高培养基中铜元素浓度是一种增强水稻愈伤组织植株再生的简单和有效的方法。     

普通野生稻胚性细胞悬浮系的建立及原生质体再生植株

广西普通野生稻(Oryza rufipogon)2个品种的成熟种子经54±1℃温度处理5d打破休眠后,诱导产生出愈伤组织。挑选胚性愈伤组织置于液体培养基中振荡培养。经6个月继代培养,建立起胚性细胞悬浮系。其中1个品种(No.40)的悬浮细胞经酶解游离获得大量原生质体,用琼脂糖包埋培养,2周内分裂频率达21.4％。形成的小愈伤组织经增殖后在分化培养基上再生出绿色小植株。     

提高籼稻愈伤组织诱导率和增殖率的研究

以秋桂矮11、华籼占、万籼占45等3个籼稻品种的种子为外植体,消毒后接种在不同培养基上,(25±1)℃下暗培养20~30天后比较不同品种愈伤组织的诱导率,再将愈伤组织继代培养20天后调查其增殖率。结果表明,在NMB培养基中添加2.5~3.0 mg/L 2,4-D有利于提高籼稻愈伤组织诱导率,添加脯氨酸、水解酪蛋白等营养物有利于提高万籼占45的愈伤诱导率,但对提高秋桂矮11、华籼占的愈伤诱导率影响不大;在NPCS培养基(NMB 0.5g/L脯氨酸 0.3 g/L水解酪蛋白 3~5 g/L山梨醇)继代培养1~2次,以30 g/L麦芽糖为碳源、2,4-D浓度为2.5 mg/L时,籼稻愈伤组织活性明显提高,其胚性愈伤组织的增殖率最大。     

应用基因枪将蚕抗菌肽基因导入水稻获抗白叶枯病株系

将天蚕抗菌肽Ｂ基因应用基因枪法导入水稻发芽种胚，获得转基因植株。经Ｂａｓｔａ抗性鉴定，应用ＰＣＲ技术和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析表明，抗菌肽Ｂ基因已整合到水稻的基因组。Ｔ３抗白叶枯病朱系Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析证明抗菌肽Ｂ基因在ＲＮＡ水平有表达。     

作物原生质体培养研究的进展

作物原生质体培养技术是细胞融合、细胞器移植和基因转化的重要基础,在植物遗传工程研究中占有十分重要的地位。目前,由原生质体再生植株的植物种类已超过150种。过去成株的植物大部分属双子叶的茄科、伞形科、十字花科、芸香科;单子叶的禾本科以及双子叶重要农作物原生质体培养停滞不前。近十年国内外科学家努力下,先后解决了几乎全部重要粮食及棉油作物原生质体再生的难题。我国在农作物原生质体培养取得了重大的     

利用反义基因沉默策略构建水稻突变体库及突变体筛选

尝试利用鸟枪反义基因沉默策略构建水稻突变体库．利用水稻反义cDNA文库转化粳稻品种中花11,获得了来源于105块潮霉素(Hm)抗性愈伤组织的1486个转化植株．随机选择来源于11个独立转化系的335个T0植株进行Hm离体叶片筛选,结果表明所有植株均呈抗性,并且与PER检测结果相吻合,说明T0植株中不存在假转化体．Southern blot分析结果表明T0植株大部分为单位点整合．T0及T1代转化植株均呈现了一些形态变异,如矮化、无分蘖或多分蘖、结实率降低、粒型或穗型改变、小穗结构改变等．利用Hm离体叶片筛选法对部分T1群体进行筛选,得到了1个变异性状与Hm抗性共分离的突变体,该突变体的变异表型为结实率比非转化对照下降约50％,每穗颖花总数比对照减少约40％,二者的总效应导致突变体单穗产量比对照约下降70％．