1株猪源肠道益生菌的分离鉴定及其生物学特性研究

从健康猪肠道中分离出1株对仔猪大肠杆菌病和副伤寒病病原有较强拮抗作用的菌株,命名为W-02,对其进行菌落形态、生理生化特性和16S rDNA系统发育分析,确定该菌株为凝结芽孢杆菌。对该菌株胃肠道耐受特性和安全性进行了研究,结果表明,W-02菌株在人工胃液、人工肠液、猪胆盐和80℃高温表现出很强的耐受能力,急性毒性试验结果表明该菌株为无毒菌株。     

Effects of panax notoginseng saponins on pneumocyte apoptosis and Fas/FasL expression in rabbits with lung ischemia/reperfusion injury

AIM: AIM: To explore the relationship between apoptosis in the lung tissues and lung ischemia/reperfusion injury, and observe effects of panax notoginseng saponins (PNS) on apoptosis in lung ischemia/reperfusion injury. METHODS: Single lung in situ ischemia/reperfusion animal model was used. Eighty four Japanese white rabbits were randomly divided into control group (control), ischemia/reperfusion 1 h group (IR1h), IR3h, IR5h, Panax Notoginseng Saponins 1 h group (PNS1h), PNS3h and PNS5h. TUNEL, immunocytochemistry and in situ hybridization techniques were used to observe apoptosis and Fas/FasL expression in various phases of lung ischemia/reperfusion. RESULTS: Cell apoptosis in lung tissues were significantly high, Fas/FasL mRNA and its protein were up-regulated in lung tissues of lung ischemia/reperfusion injury compared with control (all of P<0.01). The PNS suppressed apoptosis as well as expression of Fas/FasL mRNA and its protein (P<0.05 or P<0.01, respectively). There was a significant correlation between expression of Fas/FasL protein, Fas/FasL mRNA and cell apoptosis (r=0.540，0.658，0.668，0.686；all P<0.01). CONCLUSIONS: Activation of Fas/FasL system and its initiating cell apoptosis of lung tissues may contribute to the pathogenesis of lung ischemia/reperfusion injury. The protective effects of PNS include suppressing the activation of Fas/FasL system and blocking apoptosis in lung tissues in lung ischemia/reperfusion injury.     

黄瓜畸形果种类及其发生规律研究

为了明确黄瓜畸形果产生的原因和发生规律,以不同类型的8个黄瓜品种为试验材料,对田间黄瓜畸形果种类及其不同采收时期的发生率进行了详细调查,并分析了其产生的原因。结果表明:(1)黄瓜畸形果主要类型有曲形瓜、尖嘴瓜、大肚瓜、蜂腰瓜、瘦肩瓜和钩子瓜6种,其中除无籽黄瓜外,大肚瓜所占比例最高,其次是曲形瓜和尖嘴瓜,钩子瓜比例最低;(2)不同品种黄瓜畸形果发生率差异显著,其中超市2号品种畸形果发生率最低,其次是无籽黄瓜和南抗1号,美洲豹品种畸形果发生率最高;(3)不同采收时期黄瓜畸形果发生率不同,前期和中期黄瓜畸形果发生率低,后期发生率高。     

hrpE基因在水稻条斑病菌Hrp pilus形成和致病性中起重要作用

 水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xooc)的hrp(hypersensitive response and pathogenicity)基因簇编码形成Ⅲ型分泌系统(T3SS),将致病性的效应分子通过HrpF转位装置注入水稻细胞中,从而导致水稻产生抗(感)病性,但Xooc的HrpE是否形成Hrp pilus还不清楚。本研究对Xooc的hrpE基因进行突变,发现hrpE突变体在水稻上丧失致病性和在烟草上丧失激发HR的能力。与水稻互作结果显示,hrpE突变体不能够与水稻细胞互作,其在水稻组织中的生长能力显著下降。电镜结果显示,hrpE突变体不能够形成Hrp pilus,从而导致水稻条斑病菌丧失在水稻上的致病性。功能互补结果显示,完整的hrpE基因可以恢复hrpE突变体在烟草上激发HR反应的能力、在水稻上的致病性以及在水稻薄壁细胞间形成Hrp pilus的能力,表明hrpE基因形成Hrp pilus是水稻条斑病菌分泌致病性效应分子的重要条件。     

抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用

旨在考察鼠源抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用。采用兔血红细胞悬液的溶血性和小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性考察CRAMP的安全性;采用不同温度、蛋白酶、金属离子和酸碱梯度对CRAMP抗菌活性的影响,考察其稳定性;通过在6孔细胞培养板中构建铜绿假单胞菌(PAO1株)成熟生物被膜,以人源抗菌肽LL-37和3种抗菌药为对照,采用结晶紫染色法检测生物被膜量,平板菌落计数法对生物被膜活菌数进行计数,苯酚-硫酸法结合Folin-酚试剂法检测生物被膜胞外基质含量,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察CRAMP干预PAO1生物被膜形态学的变化。结果显示,CRAMP在所测试浓度下对兔血红细胞溶血率均<2%;在62.5~125 mg·L^-1时对 RAW264.7没有细胞毒性。温度(25~100 ℃)、两种盐离子(Na⁺、K⁺)以及pH为5~10时对CRAMP的抗菌活性没有影响;胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶均不同程度影响了CRAMP的抗菌活性。6孔细胞培养板中,4倍MIC 的CRAMP极显著降低了PAO1生物被膜量(减少率为76.74%,P<0.01),极显著减少了生物被膜中的活菌数量(减少了1.2个CFU·mL^-1,P<0.01),效果优于LL-37和3种抗菌药。CRAMP组的胞外基质显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05)。CLSM结果显示：与对照组相比较,4MIC浓度下,CRAMP组的细菌总荧光强度(PI+SYTO)显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05);与空白对照组相比,CRAMP组和LL-37组的死菌荧光强度/活菌荧光强度比值 (PI/SYTO)均极显著增大(P<0.01)。综上表明,CRAMP具有低溶血性、低细胞毒性,除蛋白酶作用不稳定外,具有较好的稳定性,对PAO1成熟生物被膜具有明显的清除作用,且效果优于LL-37,具有良好的药物开发前景。     

冷季型草坪草冬季复播的研究进展

综述了草坪冬季复播的研究,包括复播前草坪的准备、复播方法以及复播草坪建植后的管理措施等方面,并对今后的发展提出了一些建议.     

东北白鹅和籽鹅血液生化指标

为建立东北白鹅和籽鹅血液生化指标的正常参考值及其正常参考范围,探讨东北白鹅和籽鹅的各项血液生化指标之间的差异显著性,随机抽取(12±0.5)月龄健康、体质量为(4.2±0.2)kg的东北白鹅母鹅和(3.5±0.2)kg的籽鹅母鹅各65只,空腹12h后翅下静脉采血,离心分离血清,应用半自动生化分析仪及试剂盒对血清22项生化指标进行检测分析。结果表明:东北白鹅和籽鹅丙氨酸氨基转移酶(ALT/GPT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST/GOT)、谷氨酸酰基转移酶(GT)、胆碱脂酶(CHE)、乳酸脱氢酶(LDH-L)、葡萄糖(Glu)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、钙(Ca)、肌酐(Cre)、镁(Mg)等血清生化指标之间差异达到极显著水平(P<0.01);碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(CHO)、无机磷(P)之间差异达到显著水平(P<0.05);a-羟丁酸脱氢酶(a-HBDH)、尿素氮(BuN)、甘油三脂(TG)、尿酸(UA)、总胆红素(T.Bili)、直接胆红素(D.Bili)、氯(Cl)之间无显著性差异(P>0.05)。本试验建立的东北白鹅和籽鹅血液生化指标的正常参考值及其正常参考范围,为今后鹅的相关研究提供了基础的科学数据和基本的理论依据。     

用RAPD标记研究7个猪种间的亲缘关系

试验利用随机扩增多态ＤＮＡ技术对互助猪、荣昌猪、甘肃白猪、长白猪、约克夏猪、杜洛克猪、汉普猪共７个品种的ＤＮＡ池进行了多态型研究,分析了各品种间的亲缘关系。结果显示：甘肃白猪虽然是由国外品种和地方品种培育而成,但其亲缘关系更接近于中国猪品种;约克夏猪与其它欧洲猪种亲缘关系较远,这可能与约克夏猪在培养过程中亲本遗传背景较为复杂有关。     

‘清水’苜蓿与‘WL168’杂交后代的表型特征及生理特性

本研究以‘清水’紫花苜蓿（Medicago sativa L.‘Qingshui’）与‘WL168’紫花苜蓿（Medicago sativa L.‘WL168’）的杂交后代选育系RSA-01,RSA-02和RSA-03为研究对象,于种植第5年对其表型特征及生理特性进行观测分析。结果表明：RSA-01,RSA-02地上生物量显著低于‘WL168’（P<0.05）,而RSA-03显著高于‘清水’;RSA-02,RSA-03茎粗显著高于‘清水’和‘WL168’,而茎叶比均低于‘清水’;各形态指标中,茎粗变异系数最小,且RSA-03值最小,为2.17%;通径分析表明,RSA-01,RSA-02和RSA-03的茎叶比、茎粗与其地上生物量的直接通径系数分别为-0.649和0.709,-0.700和0.422,-0.858和0.189,茎叶比、茎粗是影响地上生物量的关键因素;RSA-01,RSA-03的过氧化物酶活性显著低于‘清水’和‘WL168’。与亲本‘清水’相比,RSA-03的地上生物量和茎粗都具有显著的杂种优势,但其抗逆性减弱,该研究结果为后期产量改良及抗逆性研究提供理论依据。     

山羊痘病毒的分离鉴定及生物学特性的研究

本研究对2003年广西部分地区山羊群发生的疑似山羊痘进行了病毒分离鉴定及生物特性的研究。取疑似山羊痘病羊的皮肤丘疹、水泡或脓泡组织的病毒悬液，接种初生羔羊睾丸细胞观察到明显的细胞病变，免疫荧光试验结果显示，病毒能与山羊痘标准阳性血清反应，在感染的细胞浆内发出特异性的黄绿色荧光。病毒悬液接种乳鼠、小鼠、豚鼠、兔子都未发病，而接种3月龄山羊则出现典型的山羊痘症状和病理变化，接种9～10日龄鸡胚绒毛尿囊膜，未见出现痘斑，连传3代，均无异常变化。通过病理组织学观察可以看到在细胞浆内有大小不一圆形或椭圆形的包涵体，在电子显微镜下可以观察到150nm～300nm大小，卵圆形、砖形，有囊膜的病毒颗粒。利用一对山羊痘病毒P32基因引物进行了PCR扩增，将所得序列与GenBank收录的5株山羊痘病毒P32基因的核苷酸及氨基酸序列比较分析。结果与疫苗株的同源性分别为99．8％和99．4％。与国外其它毒株的同源性为99．6％和98、8％～99．4％。研究结果表明，所分离的病毒为山羊痘病毒，在生物学特性上与资料记载存在一定的差异，P32基因与疫苗毒和国外毒株之间同源性非常高。将该毒株命名为山羊痘病毒LiuJiang／2003株。