猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

为建立一种快速、灵敏、简便的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）早期检测方法,本研究利用逆转录环介导恒温扩增技术（RT-LAMP）,针对PRRSV的ORF5基因片段设计了4条引物,利用Bst DNA聚合酶在65 ℃恒温条件下进行逆转录扩增,通过1.0%琼脂糖凝胶电泳和加入SYBR Green Ⅰ染料肉眼判断结果,建立了PRRSV RT-LAMP检测方法。结果表明,该检测方法具有良好的特异性,与其他常见病毒如猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒等无交叉反应,较普通RT-PCR灵敏性高100倍。采用RT-LAMP和RT-PCR分别对10份临床样本同时进行检测,符合率为100%。因此,本研究建立的RT-LAMP是一种可适用于临床PRRSV检测的快速、简单、灵敏、特异的检测方法。     

陕西绥德奶牛生殖系统疾病调查分析

本文对陕西省绥德县城区2004~2010年奶牛生殖系统疾病状况进行了调查,结果表明,患生殖系统疾病奶牛数量占能繁母牛数的11.6%。在各种生殖疾病中,以慢性子宫内膜炎、卵巢静止为主。本文还针对该县奶牛患生殖系统疾病具体情况提出了建议和改进措施。     

古典H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的建立

利用RT-PCR技术扩增古典H1N1亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/1/2011株的8个目的基因片段,分别克隆至双向转录表达载体p BD上。将8个重组质粒纯化后共转染293T细胞,48 h后收集上清,接种MDCK细胞。当细胞出现明显病变时,收集MDCK细胞上清,其血凝效价为1:64,与原始野生株血凝效价一致;提取拯救病毒的RNA并进行8个目的片段扩增及序列分析,测序结果显示与野生株病毒相同,表明病毒拯救成功。古典H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的成功建立,不仅为探索流感病毒致病机理、感染机制及功能研究奠定了基础,同时也为H1N1亚型猪流感病毒新型疫苗的研制开辟了新的途径。     

复州牛改良情况调查研究

本研究调查了大连安波、庄河和四平镇的复州牛改良情况,通过测量体尺、评价体况,并利用肉用指数(Beef Perfomance Index,BPI)研究了牛群的经济类型。结果显示,489头改良成年母牛平均BPI为3.40~3.61,主要经济类型为肉役兼用型;23头复州成年母牛平均BPI为3.28,属役用型。改良牛群在体重、体尺生产性能指标等方面都比复州牛有了明显改善和提高。     

维生素E的生物学功能和安全性评价研究进展

维生素E是机体重要的脂溶性维生素,具有抗氧化、维持生育和调节免疫系统等诸多生物学功能.多数研究表明维生素E毒性较低,但高剂量的维生素E可引起机体内其他脂溶性维生素的缺乏,同时对免疫效果产生不利影响.本文对维生素E的生物学功能、吸收代谢特点和安全性评价进行了综述,旨在为在动物上制订维生素E的安全限量提供理论参考.     

CpG ODN重组质粒对猪外周血淋巴细胞免疫刺激作用的研究

为获得对猪具有免疫刺激活性的含CpG序列的重组质粒,设计合成了11条CpG序列,应用MTS比色法测定合成CpG ODNs刺激猪PBMC增殖的能力,结果有10条CpG ODN对猪PBMC具有刺激活性(SI>2);以对猪PBMC具有较高刺激活性的CpG06和CpG08为核心,分别合成含6次重复序列的重组质粒pCpG06和pCpG08,并检测其对猪PBMC的刺激活性,结果重组质粒pCpG06和pCpG08对猪PBMC的刺激指数分别可达4.97和5.32,并可刺激猪PBMC产生较高水平的IL-4。研究获得的重组质粒pCpG06和pCpG08对猪PBMC具有较好的刺激活性,可为猪用CpG佐剂的研究提供参考。     

退化高寒草甸上高原鼠兔的扩散研究

在高寒草甸上高原鼠兔是必不可少的生态关键种,同时由于密度过高又加剧着高寒草甸的退化.应加强对高原鼠兔种群动态的管理,使其保持适当的密度和适当的时空分布,发挥其关键物种的作用,但不对高寒草甸造成破坏.为此有必要掌握高原鼠兔的扩散规律.通过高原鼠兔的扩散试验得到了以下结果:环境容纳量K和植被高度h有如下关系:K={6.2237h 17.2237(h＜4.8717) 47.5438(h=4.8717) -4.0654h 67.3494(h＞4.8717);高原鼠兔月扩散距离为32.16 m;高原鼠兔对原有栖息地留恋的量α为0.3371.     

乳酸锌对蛋鸡生产性能及蛋壳质量的影响

本试验旨在研究乳酸锌对蛋鸡生产性能及蛋壳质量的影响。试验采用单因子随机分组试验设计,选取1600只360日龄的罗曼粉壳蛋鸡,随机分到4个处理组,各处理组8个重复,每个重复50只鸡。基础饲粮采用为玉米－豆粕型粉状饲粮,处理1饲喂基础饲粮＋60mg／kg－水硫酸锌（以锌计）,处理2饲喂基础饲粮＋60mg／kg乳酸锌（以锌计）,处理3饲喂基础饲粮＋40mg／kg乳酸锌（以锌计）,处理4饲喂基础饲粮＋60mg／kg锌（－水硫酸锌和乳酸锌提供的锌各一半）。试验结果表明,在产蛋鸡饲粮中100％以乳酸锌替代硫酸锌（提供的锌含量为60mg／kg）,能显著降低平均破蛋率,提高平均蛋壳强度和平均蛋壳厚度（P〈0．05）,死亡率最低,对蛋鸡的平均产蛋率、平均蛋重、平均日采食量和平均料蛋比无显著影响（P〉0．05）。     

宁夏白芨滩国家级自然保护区苦豆子内生真菌多样性及生态分布

为探索宁夏干旱荒漠区苦豆子（Sophora alopecuroides L.）内生真菌的多样性及区系组成,为苦豆子内生真菌的合理开发和利用提供理论依据。从宁夏白芨滩国家级自然保护区不同植被和土壤类型的6个样区采集苦豆子样品30份,采用组织匀浆法从植株的根、茎、叶和种子中分离内生真菌,根据培养性状、菌落、孢子等形态特征,结合rDNA-ITS序列分析对菌株进行鉴定;根据内生真菌的相对频率、物种多样性指数、丰富度指数和相似性系数分析其区系组成特点。结果表明,从30份样品中共分离得到内生真菌213株,分别属于19个属,其中镰刀菌属（Fusarium）、链格孢属（Alternaria）和茎点霉属（Phoma）为优势属。苦豆子内生真菌的分布具有一定的组织特异性,根部的内生真菌数量高于其他部位,茎部内生真菌多样性指数最高。植被类型中,沙生植被草原（样区Ⅴ）分离的内生真菌物种多样性指数最高,而荒漠草原（样区Ⅲ）最低。荒漠草原（样区Ⅰ）和沙生植被草原（样区Ⅴ）内生真菌群落有密切的相似性。可见,苦豆子蕴含丰富的内生真菌资源,其内生真菌具有很高的宿主特异性,且分布受生境影响。     

急性感染猪瘟病毒猪体外排毒规律的观察

为研究CSFV感染后在体外的传播途径、排毒规律,针对CSFV基因组设计了一对引物和一条探针,建立了一套CSFV荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并以质粒为标准品得到扩增标准曲线.对18个CSFV阳性质控样本检测全阳性,6个CSFV阴性质控样本检测全阴性,显示良好敏感性和特异性.应用此方法对石门株感染的16头60日龄长白猪和1头阴性对照猪的粪便、尿液、眼分泌物和唾液中病毒含量进行了动态测定,结果表明从感染后第1天到频死前第8天,粪便中均能检测出病毒;尿液和眼分泌物至少能从第3天,唾液从第4天开始检测出病毒,且病毒含量呈增加趋势.本研究对急性感染猪瘟病毒猪体外排毒规律进行了系统研究,为弄清CSFV感染病程、致病机理及临床诊断奠定了重要理论基础.