猪Ghrelin基因的克隆及原核表达

从猪下丘脑、胃等组织中提取总RNA，根据已发表的猪的Ghrelin mRNA序列设计合成引物，通过RT-PCR进行cDNA扩增，获得了282bp的片段。将该片段克隆于pMD-18T载体后进行序列分析，确认PCR产物为Ghrelin cDNA。从阳性克隆中提取质粒，经NheⅠ和XhoⅠ双酶切，回收282bp的目的片段，定向克隆到pET-28a表达载体中，提取质粒并再次转化到BL21（DE3）中，成功地筛选出阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌，通过SDS-PAGE检测出猪Ghrelin基因的表达．     

稳定转化家蚕BmN细胞表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

为了建立稳定转化家蚕细胞持续表达外源基因的技术体系,构建了基于piggyBac转座子的带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因(hGM-CSF)和新霉素抗性基因(neo)表达元件的转基因载体pigA3GFP-IE-neo-FH-hGM-CSF-polyA-fib-L-intron1,以及带有hGM-CSF和吉欧霉素(zeocin)抗性基因的昆虫细胞转化载体pIZT-IE-hGM-CSF,分别转染家蚕卵巢BmN细胞,并以含相应抗生素G418或zeocin的培养液筛选,得到稳定的转化细胞系FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF。ELISA检测结果显示,hGM-CSF在FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF转化细胞系的表达水平分别为1.534 55 fg/个细胞和2.227 38 fg/个细胞。     

塞北兔种质特性研究与利用现状

从外貌特征和生产性能两个方面对塞北兔的种质特性进行了详细描述,并从数量遗传学、生化遗传学、被毛颜色和耳型遗传规律、生理生化指标、营养需要特点等方面对塞北兔的研究情况进行了概括总结。同时针对目前塞北兔在研究利用方面存在的问题提出了合理建议。     

冷季型草坪草在环渤海旱碱区的适应性评价

针对环渤海低平原区较复杂的环境条件、恶劣的立地条件及目前草坪建植中存在的引种盲目、失败率高、寿命短等问题，通过对引进的4个草种37个品种的生育期、抗逆性、坪用价值等进行综合评价，结果表明：高羊茅为最适合的草种，草地早熟禾较适合，多年生黑麦草不适宜单播，可和高羊茅以适当的比例混播，紫羊茅不适宜在该区种植。筛选出最优良的高羊茅品种为皇后、贝克，草地早熟禾为亨特、普通、兰神、奖品。     

30味中药提取物与环丙沙星联用对猪源链球菌体外抑菌作用研究

为筛选与环丙沙星联用对猪源链球菌具有协同抑菌作用的中药提取物,采用试管二倍稀释法测定30味中药醇提物、水提物的最低抑菌浓度（MIC）,采用棋盘稀释法测定30味中药醇提物、水提物与环丙沙星联用对猪源链球菌的部分抑菌浓度（FIC）,采用有机溶剂萃取法初步追踪与环丙沙星联用具有协同抑菌作用的中药萃取物的体外抑菌效果。结果显示,所选30味中药的水提物、醇提物对猪源链球菌均具有一定的抑菌作用,佩兰、黄连、枳壳、郁金等中药醇提物、水提物对猪源链球菌（pf—ce）抑菌活性较强,苍术水提物等对猪源链球菌的抑菌作用较弱;佩兰醇提物与环丙沙星联用对猪源链球菌的协同抑菌作用最强;佩兰醇提物的乙酸乙酯萃取物、氯仿萃取物与环丙沙星联用对猪源链球菌分别具有协同、相加抑菌作用。     

Effects of Photoperiod on Stem Cells Activation in Cashmere Goat Hair Follicles

In order to extend the anagen of cashmere goat hair follicles and increase the production of cashmere,this study was performed with artificially shorten the daylight time among Arbas White cashmere goats. Skin tissue sections from cashmere goats were collected to compare the morphologic changes between artificial daylight and natural daylight,and immunohistochemical method was used to study the hair follicle cell proliferation and important protein expression in related signaling pathways. The results showed that strong cell proliferation occurred in cashmere goat hair follicle cells during artificial daylight,plenty of cytokeratin 15 (K15) positive signals were distributed in the outer root sheath,β-catenin protein was actively expressed in hair matrix and root sheath, indicating that the hair follicles were in the anagen growth phase;Meanwhile,cashmere goat hair follicles under natural daylight were in telogen with weak signals. Above all prove that short photoperiod played an important role in promoting hair follicle growth,the artificial short photoperiod could change hair follicle growth cycle and make hair follicles earlier enter to the anagen growth phase,causing a variety of typical gene expressions during hair follicle growth.     

抑制USP7活性对鸡抗沙门菌感染的影响

本研究旨在阐明去泛素酶USP7对雏鸡抵抗鼠伤寒沙门菌感染的影响。选用3日龄的白来航鸡40只,随机分为2组,每组20只,隔天腹腔注射USP7抑制剂P5091或对照溶剂,连续注射5次,待最后一次注射结束后第4天,对雏鸡人工口服感染鼠伤寒沙门菌,感染24 h后,采集样品,RT-qPCR检测IL-1β、IL-8、TNFα以及NF-κB的mRNA表达,平板涂布法检测雏鸡肝载菌量,H&E染色观察肝和肺的炎症状况。结果表明,P5091抑制USP7活性后,转录因子NF-κB mRNA水平显著降低,并且下游细胞因子IL-1β、IL-8以及TNF-α的表达均下调,雏鸡载菌量下降,H&E染色显示肝与肺炎症反应加剧。综上表明,USP7可能在机体抗沙门菌感染方面起重要作用。     

犬类诱食剂中酶解反应与美拉德反应最佳条件优化研究

试验旨在开发一款适用于干犬粮的诱食剂,研究犬类诱食剂中酶解反应与美拉德反应的最佳条件.试验选用鸡胸肉、鸡心、鸡肝为主要原料,采用木瓜蛋白酶进行水解,在酶解液中添加木糖和L-半胱氨酸,利用美拉德反应产物制备适合犬类的诱食剂.采用单因素和正交试验,以水解度为考核指标,研究水解反应过程;通过感官评价及动物试验探索最佳美拉德反...     

多浪绵羊骨骼肌卫星细胞的分离培养、鉴定及成肌诱导分化

为了在体外细胞水平模拟多浪绵羊肌肉生长发育过程,本研究以多浪绵羊为试验动物,采用胶原酶和胰酶两步酶消化法分离多浪绵羊骨骼肌卫星细胞（satellite cells,SCs）,并利用差速贴壁的方法纯化分离得到的SCs。利用免疫荧光技术检测SCs标记基因Desmin、Pax7和MyoD1的表达情况,鉴定分离得到的SCs。采用血清撤离的方法诱导SCs向成肌方向分化。通过显微镜观察和成肌分化标记基因肌球蛋白重链（myosin heavy chain,MHC）的免疫荧光,检测肌管的形成情况。通过对SCs标记基因Desmin、Pax7和MyoD1的免疫荧光鉴定,确认本研究成功分离得到多浪绵羊SCs。采用血清撤离的方法诱导SCs成肌分化,显微镜观察和MHC免疫荧光可以明显观察和检测到肌管的形成。本研究对多浪绵羊SCs成功地进行了分离和鉴定,并建立了体外培养条件下多浪绵羊SCs的成肌诱导分化。     

全膜覆土穴播粒数对紫花苜蓿生产性能的影响

采取随机区组排列的方式,设置3种不同穴播粒数,对陇中苜蓿和岩石进行生长高度、产草量、茎叶比、粗蛋白含量等指标测定,结果表明:穴播粒数为14时,陇中苜蓿和岩石的生长高度表现较为突出,鲜草产量分别为43 404.5kg/hm~2和47 436.9kg/hm~2,显著高于其它两个处理;在品质方面也表现较好,粗蛋白含量分别为15.33%和14.74%。综合评价全膜覆土穴播苜蓿14为最佳穴播粒数。