禽流感病毒H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的制备和鉴定

以常规方法纯化H9亚型禽流感病毒，制备了两株分泌抗禽流感病毒H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞11A5和1182，其上清ELISA效价均为1：10^4，腹水效价为1：10^7和1：10^6，HI效价上清分别为8、7log2，腹水效价均为15log2。采用HI方法证明其对禽流感病毒H9亚型的特异性，通过Western blot方法证明两株单抗都针对H9亚型禽流感病毒HA1蛋白。     

禽流感H9亚型病毒WD株毒种的纯化研究

采用鸡胚终点稀释法并结合ND抗血清中和法对禽流感H9亚型病毒WD株毒种进行了纯化。将纯化的WD株毒种在SPF鸡胚连续传12代，对各代次毒种进行了毒价测定，选择一定代次的毒种进行了免疫原性试验及外源病毒检验。结果表明，WD株在鸡胚中连续传12代，其HA价稳定在1：512—1：1024，毒价在10^7.0-10^8.3 EID50／0．1mL；不同代次毒种不含外源病毒，免疫原性均符合要求。由此可见，毒种的纯化方法是有效的，将WD株毒种限制在12代内是可行的，并建立了该毒种的种子批。     

溶血卵磷脂提高肉仔鸡对禽脂的表观消化率

试验研究日粮中禽脂水平(30和24 g/kg)以及是否添加外源乳化剂溶血卵磷脂(LPC)对肉仔鸡生长性能、脂肪酸表观消化率以及日粮表观代谢能(AME)的影响.本试验选用168只1日龄AA肉仔鸡(公雏),按照2×2因子设计,分4个处理,每个处理7个重复,每个重复6只鸡.试验中测定生长性能、营养物质表观消化率以及日粮AME.结果表明,禽脂添加水平对肉仔鸡生长性能、脂肪酸表观消化率以及日粮AME没有显著影响(P>0.05).日粮中添加LPC提高肉仔鸡体增重(P<0.05)、降低料重比(P<0.05)、提高14～17日龄日粮AME(P<0.05).添加LPC有提高14～17日龄肉仔鸡粗脂肪表观消化率的趋势(P=0.086).日粮中添加外源乳化剂LPC提高了C18:0脂肪酸的表观消化率(P<0.05),对其他脂肪酸、粗蛋白质以及粗脂肪表观消化率没有显著影响(P>0.05).这些结果表明,在含禽脂的日粮中添加500 mg/kg LPC能改善肉仔鸡生长性能;LPC改善肉仔鸡生长性能的作用是通过提高脂肪表观消化率实现的.     

柔嫩艾美耳球虫感染对肉仔鸡粪便水分的影响

采用单因子试验设计法,测定肉仔鸡感染柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)后对粪便中水分变化的影响。试验表明:感染柔嫩艾美耳球虫后,鸡的生产性能受到显著的影响(P<0.05)。粪便中水分含量高于未感染组,感染后4d粪便中水分含量呈上升趋势,研究认为,粪便中水分含量的增加是球虫感染后的鸡的病理性变化的一种生理反映。在临床上,可将鸡粪便中水分含量的变化作为评判鸡感染球虫的参考指标之一。     

规模化肉鸭场污水污染物排放及其影响分析

为了解规模化肉鸭场污水污染物排放及其对水环境污染现状,本试验选择河南省5个有代表性的规模化肉鸭场,对其所排放污水以及附近水体中的化学需氧量(COD)、五日生化需氧量(BOD5)、氨氮(NH3-N)、总磷(TP)、悬浮物(SS)等污染物含量进行了分析,并利用单因子污染指数法对其污染程度进行评价.结果表明:鸭场排放污水中COD、BOD5、NH3-N、TP、SS的平均含量均超出《畜禽养殖业污染物排放标准》.其中COD、BOD5、NH3-N、TP属于较严重污染,而SS属于严重污染.鸭场下游水体中COD、BOD5、NH3-N、TP的平均含量均高出《地表水环境质量标准》,其中COD、BOD5、TP污染较严重,而NH3-N为严重污染.因此,规模化肉鸭场污水排放污染物指标全部超标,并且排放的污水对周围水环境造成不同程度的污染.     

畜果结合生态养殖模式的研究

本研究系统探讨了果园和畜禽养殖的种养结合型生态模式,分析研究了“猪-沼-果”、“草-鸡-果”两种生态模式下的猪、鸡生产性能,畜舍空气质量以及苹果的产量和质量。研究结果表明:生态养殖模式下生长肥育猪和鸡的增重显著高于庭院养殖(P<0.05),分别提高了17.46%和29.28%;猪舍、鸡舍空气中的CO2和NH3比庭院猪舍、鸡舍显著降低(P<0.05);苹果产量比单纯果园平均分别提高28.97%和21.15%,含糖量分别相对提高6.79%和6.36%。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株ORF6基因的克隆及原核表达

从河北沧州分离到一株疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒,接种Marc-145细胞,经4代盲传,出现细胞病变,经鉴定为PRRSV,命名为HB-3(cz)株。根据GenBank公布的PRRSV JXA1株ORF6基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物(P1/P2),用RT-PCR方法扩增完整ORF6基因,将扩增产物连接到pGM-T载体并转化克隆菌,阳性重组质粒PGM-M进行序列测定与分析。后将克隆质粒PGM-M双酶切后连接原核表达载体pET-32a(+),在Rosseta-DE3中成功获得表达,经Western-blotting分析表明,表达蛋白与阳性血清发生特异性反应。     

Vero E6细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

To seek out proteins which interact with structural proteins of porcine epidemic diarrhea virus （PEDV） in Vero E6 cells and study the mechanisms of viral infection.We created a Vero E6 cDNA yeast hybrid library. The total RNA of Vero E6 was extracted using Trizol method, and double strands cDNA was synthesized by SMART technique. We created a Vero E6 cDNA library by using homologous recombination in yeast. The results showed that the titer of cDNA library was 9.7×10⁸ CFU with the average of inserted fragments about 1.6 kb, and the recombination rate was 87%. These data indicated that the yeast two-hybrid cDNA library of Vero E6 was successfully constructed and might be useful for screening the host proteins interacting with structure protein of PEDV.     

NaCl胁迫下黑麦草种子萌发过程中DNA甲基化与基因表达分析

为了解黑麦草（Lolium perenne）种子在正常条件与NaCl胁迫下萌发过程中DNA甲基化动态变化以及重要盐胁迫相关基因的表达。运用甲基化敏感扩增多态性技术分析对照和150 mmol·L^-1 NaCl处理下黑麦草种子萌发过程（0,1,2,4,7 d）的DNA甲基化水平及动态变化,并通过实时荧光定量 PCR（QRT-PCR）检测8个重要的盐胁迫相关基因的表达情况。结果表明：黑麦草种子萌发过程中甲基化水平呈下降趋势,以双链甲基化方式为主,甲基化变化同时发生在编码序列和非编码序列中。NaCl处理下DNA甲基化程度高于CK,而去甲基化程度低于CK,最终导致NaCl处理下基因组净的甲基化位点数目增加。黑麦草种子耐盐萌发过程中代谢增强,8个盐胁迫相关基因表达量呈上升趋势,而NaCl胁迫延缓了种子萌发进程,在大多数时间点的基因表达低于对照。     

蜀宣花牛体型外貌、线性评定及生理指标测定

[目的]为了充分了解牛群的体型外貌及生理指标情况,我们对牛群体型外貌进行了评定、同时对牛群的毛色、肤色、踢、角及生理指标进行了调查研究。[方法]通过对牛群生理指标测定、体型外貌评定及毛色、肤色、踢、角颜色和形状分析。[结果]表明:蜀宣花牛肉用指数公母牛分别为5.3769和4.0725,低于国外专门化肉牛品种,但也明显高于国内几个比较有名的地方牛品种,由此说明,蜀宣花牛的肉用指数界于专用型肉牛和肉役兼用型牛之间。毛色以黄白花和红白花为主,占90.16%;皮肤颜色以纯粉色和粉色有斑点的为主,占96.92%;蹄质颜色以纯蜡黄色为主,占86.28%;角型以照阳角为主,占93.94%。成年母牛的生理指标分别为:体温平均38.38℃、心跳74.56次/min、呼吸18.74次/min和瘤胃蠕动2.84次/2min;体型外貌线性评定分析表明,蜀宣花牛母牛的14个性状中,除后房宽度、尻角度和乳房底部3个性状平均分略低于75分,强壮度、后房高度、乳头位置和乳静脉4个性状的平均分高于80分外,其余7个性状的平均分都在75~80分之间。[结论]从乳用性能的角度看,牛群的平均体型尚处在较理想型和理想型之间,还有待进一步选育提高。