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马传贫驴白细胞弱毒疫苗株跨膜蛋白主要免疫决定区基因的克隆与表达 总被引:3,自引:0,他引:3
从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码跨膜蛋白主要免疫决定区(TMIR)的基因,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的融合蛋白有一部分是可溶的,其氨基端带有6个组氨酸的标签,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化。在间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验中,重组的TMIR蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应,而与健康马血清无任何反应。这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性,可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制、接种马体内免疫应答及马传贫诊断的研究。 相似文献
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鸡致病性大肠杆菌I型菌毛交叉保护性研究及其结构基因 FimA 的序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从山东省各地分离到107株鸡致病性大肠杆菌,选择了其中2株高致病性大肠杆菌,血清型分别为O78和OM,经增菌培养后提取菌毛制备为单价菌毛油乳苗,分别接种于1日龄和14日龄雏鸡,于4周龄攻毒。结果二者之间有一定的交叉保护作用。根据Genbank收录的人源大肠杆菌I型菌毛FimA基因和P型菌毛papA基因序列,分别设计了2对引物。通过PCR对上述2株大肠杆菌进行扩增,结果只有FimA的一对引物扩增出相应的条带,经测序证明为FimA基因。papA基因的引物未扩出任何条带,证明这2株大肠杆菌表达I型菌毛。通过对2株大肠杆菌结构基因FimA进行分析,发现二者具有高度的同源性。本研究的目的是探讨菌毛亚单位之间的交叉保护性与其菌毛的结构基因之间是否存在相关性。 相似文献
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用分离到的空肠弯曲菌制备鸡空肠弯曲菌甲醛灭活疫苗 ,并进行了该病的免疫保护实验。制备 2× 10 9个 / m L浓度的细菌悬液 ,4m L / L浓度的甲醛溶液作用 12 h灭活后制成空肠弯曲菌灭活苗 ,免疫 2周龄的 SPF雏鸡 ,14 d后 ,进行攻击实验 ,观察其临床症状 ;并分别于感染后 7d和 14 d捕杀 ,观察病理学变化及进行细菌分离实验以揭示其保护率。结果表明 ,鸡空肠弯曲菌灭活苗的保护率可达 10 0 % ,说明该苗经口免疫后安全可靠 ,无毒副作用 相似文献
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猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建与筛选 总被引:1,自引:0,他引:1
在体外将猪带绦虫虫卵孵化为有活力的六钩蚴。采用商品化试剂盒抽提六钩蚴总 RNA、m RNA,反转录为双链c DNA,再加 Eco R Adapter。在去除小片段后 ,dsc DNA与 λgt11噬菌体 DNA连接 ,经蛋白包装 ,构建了猪带绦虫六钩蚴λgt11c DNA文库。该文库效价为 3.5× 10 9pfu/ m L ,重组 DNA片段大小为 0 .5~ 3.2 kb,平均为 1.6 kb,蓝白斑比 1∶ 9。用抗体探针对文库进行免疫学筛选 ,在消除非特异性反应的基础上筛选约 10 6 重组子 ,共得到 118株强阳性克隆 ;应用 PCR鉴定上述部分阳性克隆 ,均扩增到 0 .5 kb以上的片段。结果显示 ,构建的文库合格 ,含六钩蚴所有抗原基因 ,可用于六钩蚴 c DNA克隆的筛选 ;用免疫学与 PCR联合筛选 c DNA文库 ,可消除假阳性 相似文献
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酸碱对低活力苜蓿种子萌发及初期生长的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
以H2SO4,HCl,HNO3及NaOH为激活荆,研究其对低活力苜蓿种子萌发及初期生长产生的影响。结果表明:不同酸碱处理及其时间不同,效果差异明显,但各处理在不同程度上均对苜蓿种子萌发和初期生长有促进作用;尤其是短时间HNO3处理,对激发苜蓿种子活力效果最佳。 相似文献
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