基于核糖体DNA第二内部转录间隔区(ITS2)序列鉴定四季青及其近缘种和混伪品

中药材四季青(Ilicis Chinensis Folium)的基原植物冬青(Ilex chinensis)是重要的园林观赏物种。利用DNA条形码技术可以快速、准确鉴定四季青及其近缘种和混伪品。本研究以冬青、铁冬青(Ilex rotunda)、秤星树(Ilex asprella)、枸骨(Ilex cornuta)和女贞(Ligustrum lucium)等37份植物样本为实验材料,提取全基因组DNA,扩增核糖体DNA第二内部转录间隔区(internal transcribed spacer 2,ITS2)序列并进行双向测序。测序结果利用Codon Code Aligner 4.2.7进行序列拼接,获得高质量ITS2序列。同时从Gen Bank中获得28条冬青的同属近缘种以及混伪品女贞、四川山矾(Symplocos setchuensis)的ITS2序列。基于隐马尔科夫模型(hidden Markov model,HMM)注释5.8S和28S,获得完整的ITS2区域,进而应用MEGA6.0(molecular evolutionary genetics analysis)进行冬青种间和种内序列分析,计算种内种间K2P(Kimura 2-parameter)遗传距离,构建邻接树(neighbor-joining tree,NJ tree)。结果表明,琼脂糖凝胶电泳得到清晰明亮的均一条带,说明利用通用的ITS2引物可以成功扩增到用于测序的PCR产物。通过PCR产物测序、数据处理和序列分析可知,冬青种内ITS2长度经过比对后为239 bp,全部样品的种间ITS2比对后长度为269 bp。冬青种内有4个变异位点以及6个单倍型,种间有143个变异位点,远远多于其种内变异位点。MEGA6.0分析结果表明,种间最小K2P遗传距离(0.094)大于种内最大K2P遗传距离(0.013)。邻接树显示,女贞和四川山矾分别以100%的自展支持率分别聚类,表现出良好的单系性,冬青属物种聚为一大支。冬青在冬青属下可以单独聚为一支,可以进行区分。冬青属其他物种以同一亚属聚为一支。研究结果表明,作为一种快速、准确、简便的分子生物学鉴定方法,ITS2可以应用于冬青及其近缘种和混伪品的鉴定,同时对于准确鉴定冬青属物种亦有巨大潜力,可为冬青属植物在临床上的用药安全和开发应用提供科学依据。     

不同桃品种贮藏特性分析

以不同品种桃果实为试材,通过测定果实IAD值、硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量,研究了采后贮藏过程中果实生理指标变化规律,评估了不同品种桃的耐贮性,以期为果实适时采收提供参考依据.结果 表明:不同品种的耐贮性差异较大,在贮藏过程中可溶性固形物含量和可滴定酸含量没有表现出统一规律,各供试品种果实IAD值和硬度均呈下降趋势.综合各项指标,'中油18号'耐贮性最好.在桃果实采后贮藏过程中,果实IAD值和硬度变化呈正相关关系,相关系数为0.886～0.972.     

仙草多糖提取工艺条件优化研究

采用水提法浸提仙草，以仙草多糖的提取率为指标，研究料液比、浸提温度、浸提时间及浸提次数4个因素对其提取率的影响，并从中挑取合适的因素水平进行正交试验及SPSS分析。结果表明：在这4个因素中，对提取率影响最大的因素是浸提温度，然后是浸提时间，再次是料液比，最后是浸提次数；在料液比1:60、温度100 ℃、浸提时间3 h的最优条件下，仙草多糖的提取率高达17.89 %，此时仙草多糖的含量为44.13 %。     

美国夏威夷组织培养技术考察报告

对美国夏威夷组织培养技术的应用及现状进行考察学习，及时总结，以期对我国组织培养技术的应用提供借鉴。     

青花菜肉桂酰辅酶A还原酶基因的克隆与表达特征分析

为研究肉桂酰辅酶A还原酶在青花菜生长发育中的作用,采用RT-PCR技术克隆青花菜Bo CCR基因全长c DNA序列,并利用q RT-PCR检测其在不同器官中的表达模式。结果表明:Bo CCR基因开放阅读框为987 bp,推导编码328个氨基酸。预测蛋白分子量为36.86 ku,PI值为6.04。该蛋白亲水性氨基酸多于疏水性氨基酸,为亲水性蛋白。高级结构预测表明青花菜Bo CCR蛋白具有完整的二级结构,三级结构的α-螺旋主要位于外部,β-折叠位于内部。分子进化分析显示CCR蛋白在植物进化过程中,各属形成单独的分枝,可以区分其亲缘关系。荧光定量技术检测到青花菜的Bo CCR基因在花蕾发育早期表达最高,推测该基因可能与青花菜花粉发育相关。     

甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究

甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。     

广东郁南51年生灰木莲生长研究

研究以广东省郁南林场大东坑工区内 51 年生灰木莲 Manglietia conifera 为研究对象，对灰木莲树高、胸径、材积、树干通直度、侧枝生长习性等指标进行调查和分析。结果表明：51 年生灰木莲生长良好，胸径平均为 44.28 cm，最大为 79.60 cm，树高平均为 20.79 m，最高为 27.00 m，单株材积平均为 1.48 m3，最高为 3.65 m3。可见，灰木莲引种在广东郁南适应性强，能够生长良好，具有生长速度快，树干通直，自然整枝好等特点，是该地区可以推广种植和培育大径材的优良树种。     

泰山古树名木健康监测系统的开发及应用前景

泰山古树名木是世界自然与文化遗产的重要组成部分,是泰山历史发展的见证,泰山的活文物,不可再生的宝贵财富。古树健康监测系统主要采取目前最流行的B/S架构模式,使对古树的生长情况能够做到"一树一档案"的监测管理目标。同时增加GPS地图信息显示模块,使古树名木信息更能够直观的展示给工作人员。本文介绍了泰山古树健康监测系统的组成板块及功能,讨论了该系统存在的问题,为该系统的推广与应用奠定了基础。     

鸡公山自然保护区芳香植物资源调查研究

鸡公山自然保护区内芳香植物资源丰富,经初步调查,共计26科106种,其中裸子植物4科11种,被子植物22科95种。论述了鸡公山自然保护区芳香植物的种类、分布及精油提取部位,对其开发利用提出了建议。