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为建立一种操作简单并且能获得大量猪血管内皮细胞的分离培养方法,本研究采集新生健康长白猪脐带,取其脐静脉血管,灌注0.1%的Ⅰ型胶原酶,于37℃水浴消化10 min后收集内皮细胞,培养于含20%胎牛血清的M199培养基中,长满单层后用胰酶消化传代培养。并对培养的细胞形态学、相关抗原和其他特征以及对病毒的易感性进行鉴定。结果表明,Ⅰ型胶原酶消化后可获得大量内皮细胞,细胞培养后的形态学观察显示细胞贴壁生长良好,呈典型的铺路石状排列;第Ⅷ因子相关抗原和细胞摄取乙酰化低密度脂蛋白均呈阳性,内皮细胞比率可高达100%。传3代后的生长曲线显示细胞传代后延迟期小于1 d,对数生长期约3 d,第5 d进入平台期,第7 d开始脱落死亡。病毒感染试验表明所获得的内皮细胞对猪瘟病毒高度易感,病毒生长与常用的PK-15没有区别。上述研究结果表明本研究建立的血管内皮细胞分离培养方法简便有效,为大量制备原代血管内皮细胞提供了可靠的方法。 相似文献
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以采自新疆维吾尔自治区阿勒泰市阿拉哈克镇境内的罗布麻属(Apocynum)和白麻属(Poacynum) 8个基因型植物的种子为材料,进行了8个基因型植物种子形态特征、千粒重和生活力测定方法探究。研究结果显示,参试罗布麻种子的长为2.75 mm,宽为0.68 mm,厚为0.49 mm。白麻属7个基因型中以紫斑中花的种子最长,为4.51 mm;青杆白花最宽,为0.90 mm;青杆白花和大叶白麻最厚,为0.61 mm。8个基因型种子的长、宽、高的变化范围分别为2.75~4.51、0.68~0.90和0.48~0.61 mm。其中,紫斑中花为最大基因型,罗布麻为最小基因型。千粒重变化范围在0.38~1.32 g,所有参试种子颜色均为褐色,其中以大叶白麻颜色最深。参试种子均表现出非休眠性种子萌发的特征,萌发时间较短,可以用来快速测定参试种子的生活力。采用四唑染色测定生活力时,参试种子均表现出不透四唑的特征,应该纵切切破种皮,预湿时间为12~14 h,染色时间为12 h,鉴定标准为种子胚80%完全染色。此次针对罗布麻属和白麻属种子形态特征与生活力测定方法的研究,能够为罗布麻种子生活力鉴定、大规模种... 相似文献
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采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)在蛋白质水平上对T2~T5代小麦转基因株系高分子量谷蛋白亚基(HMW—GS)的遗传表达及其分离进行了鉴定和分析。结果发现,外源1Dx5和1Dy10基因在T2代部分株系中表达;在有的株系中出现了原亚基(8亚基)的缺失或沉默和新亚基(暂定8^*)的产生,因而检测出2 5 10 12,2 5 7 8^* 10 12,5 7 10,2 7 10 12的多种类型。对2 5 10 12型株系进行了多代跟踪分析,发现其在T2~T5代陆续发生分离,存在于不同单株、不同单穗的子粒和同一单粒后代之间。经筛选,获得了天然不存在的亚基类型为2 5 10 12,2 10 12,2 5 12等稳定表达的种质创新株系。 相似文献
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