耐氟喹诺酮类药物大肠埃希氏菌基因突变的MAMA-PCR检测

采用MAMA-PCR法对72株已知突变菌株的突变情况进行了检测。结果，有2种gyrA83位突变：TCG→TTG和TCG缺失；4种gyrA87位突变：GAC→AAC、GAC→GGC、GAC→TAC和GAC→CAC；1种parC80位突变：AGC→ATC以及4种parC84位突变：GAA→AAA、GAA→GCA、GAA→GGA和GAA→GTA。采用同样的方法，对38株未知突变菌株的检测结果显示，gyrA83、gyrA87、parC 80和parC84位的突变检出的正确率分别为97．4％、94．7％、81．6％和94．7％。结果表明，MAMA-PCR有望成为监测耐氟喹诺酮类药物大肠埃希氏菌的分子生物学常规方法。     

猪孤雌激活早期胚胎线粒体分布及mtDNA拷贝数变化的研究

本研究通过线粒体分子探针标记技术检测孤雌激活早期胚胎线粒体的分布变化,运用实时荧光定量PCR技术检测mtDNA拷贝数的变化,揭示早期胚胎发育过程中线粒体分布、mtDNA拷贝数变化趋势。结果表明,成熟卵母细胞电激活后,由2-细胞胚胎开始,卵裂球内线粒体分布均匀且密集,每个细胞均有分布,卵裂球之外的空隙未见线粒体分布,直到囊胚形成,线粒体均有分布。孤雌激活4-细胞胚胎mtDNA拷贝数显著高于8-细胞胚胎mtDNA拷贝数(907210.77±145520.77,186224.33±103308.00,P<0.05),但显著低于2-细胞胚胎、桑椹胚、囊胚的mtDNA拷贝数(1563422.54±224666.51、1697626.25±176999.53和1752301.29±101146.64,P<0.05)。孤雌激活扩张囊胚mtDNA拷贝数最高,为2812545.67±156819.31,显著高于其他发育时期胚胎的mtDNA拷贝数(P<0.05)。由此可见,孤雌激活早期胚胎发育进程中线粒体分布及mtDNA拷贝数会发生变化。     

乙型脑炎病毒NS1蛋白的可溶性表达与抗原性分析

为获得可溶性表达的乙型脑炎病毒(JEV)NS1蛋白,将编码JEV SA14-14-2株NS1蛋白基因克隆至原核表达载体pMAL-c5X中,构建重组融合表达质粒pc5X-NS1;用重组质粒转化宿主菌ER2523后,经IPTG诱导得到可溶性的融合蛋白MBP-NS1;优化诱导表达条件,于28℃、0.3 mmol/L IPTG诱导4 h;最后融合蛋白经直链淀粉树脂柱纯化。结果表明:重组融合蛋白MBP-NS1具有良好的抗原性和特异性。     

豚草属植物研究进展

外来物种的入侵已经对我国的农林牧业造成了巨大的经济损失,也严重破坏了生态系统的平衡和物种多样性的保持。作为我国五大入侵植物之一的豚草,更是对人体有严重的致敏作用,在每年的8-9月份能够造成大面积的花粉过敏疾病。它不仅危害人体的健康,对环境和农业生产的危害也非常严重。因此豚草属植物作为外来入侵植物的代表应该更多的被认识其各种特点和习性,以便于进一步防范和治理。本研究对豚草属植物的生物学特性、生态学特性、危害、防治和利用等方面进行了综述。     

恩诺沙星微囊在猪体内的药动学及生物利用度研究

为了比较恩诺沙星微囊和原粉在猪体内的药动学特征及生物利用度,试验采用高效液相色谱法(HPLC),将10头健康猪分2组采用正交试验,经灌胃给药后采血、甲醇提取和HPLC分析,所得药时数据用MCPKP计算机程序处理。恩诺沙星微囊和原粉经口服给药后在猪体内的药时数据均符合一级吸收一室模型,主要药动学参数分别为:t1/2Ka1.73 h±0.93 h和0.36 h±0.31 h(P0.01);Tmax5.69 h±1.68 h和2.04 h±1.06 h(P0.01);t1/2Ke16.53 h±5.23 h和10.17 h±1.87 h(P0.01);Cmax1.71μg/mL±0.47μg/mL和2.51μg/mL±0.45μg/mL(P0.01);AUC为每小时51.98μg/mL±16.08μg/mL和40.58μg/mL±6.40μg/mL;微囊的相对生物利用度为128%。说明恩诺沙星微囊口服给药吸收较慢但完全,达峰时间较长,消除缓慢。     

抑制素免疫在家畜繁殖中的应用

抑制素是一种主要由动物性腺分泌的糖蛋白激素,对促卵泡素的分泌具有负反馈调节物作用。用抑制素主动或被动免疫可以提高家畜的排卵率和产仔数。本文就抑制素、抑制素免疫的机制及其在家畜繁殖中的应用等方面的研究进展做一概述。     

马耳它布氏杆菌bp26基因缺失株的构建及鉴定

为了建立马耳他布氏杆菌M5-90株弱毒疫苗株与野生株的鉴别诊断,本研究以bp26基因作为重组靶位点,以M5-90为亲本,利用bp26基因ORF外侧序列作为同源序列,将卡那霉素抗性基因(Kan')整合到细菌基因组中,双交叉重组阳性菌株,经SDS-PAGE和western blot试验表明迁移率约为29 ku的BP26蛋白在亲本菌中表达并可被鼠抗BP26高免血清识别,而突变株M5-90-26反应结果为阴性,表明BP26蛋白在突变疫苗株M5-90-26中未表达.M5-90-26具备从血清学角度区分M5-90-26免疫与野生型布氏杆菌感染,对布氏杆菌病防制、监测及净化具有重要的意义.     

抗水牛伊氏锥虫变异表面糖蛋白抗原单克隆抗体的研制

用纯化的伊氏锥虫变异表面糖蛋白（variant surface glucoprotein, VSG）免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过3次克隆和间接ELISA方法筛选,获得3D7、5B9 2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用间接ELISA方法检测杂交瘤细胞培养液上清效价和小鼠腹水效价,其中细胞培养上清效价分别为1∶6400和1∶12800,腹水效价分别为1∶105和1∶106。单抗的亚型鉴定结果表明,3D7、5B9分泌的抗体都为IgG1亚类κ链。     

五指山猪H—FABP基因不对称PCR—SSCP研究

以海南五指山猪为试验材料,采用不对称PCR-SSCP和测序相结合技术,对海南五指山猪心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因第3内含子(intron 3)进行多态检测,并分析其与生长性状(体重、体高、体长、胸围)的相关性.结果表明:在五指山猪H-FABP基因intron 3中发现了3种基因型,分别命名为AA、AB、BB,对其中的纯合子AA、BB进行测序,发现intron 3的第335位点处发生了突变,都是由碱基A→G的转换造成.AA、AB、BB三种基因型频率分别为63.5%,18.2%,18.2%,A、B等位基因频率分别为73%和27%.不同基因型个体各生长性状的方差分析表明,不同基因型之间的生产性状无显著差异.     

利用观赏植物物候预测草坪杂草发生

杂草影响草坪美观,还会使草坪丧失功能,防治杂草的关键是要掌握杂草的发生时间,但由于草坪杂草植株矮小,生育期短导致其不易辨认及观察。本研究以探究常见观赏植物物候与杂草爆发之间的对应关系为前提,自2012年11月至2014年4月间,采用样线样方结合的方法调查了广州地区草坪杂草发生情况,以及常见观赏植物的物候特点。结果显示:样地中,杂草群落具有类似的分布模式,以多年生杂草为主,一年生杂草次之,二年生杂草最少;与草坪草具有相似生活型或具有类似的生物学特性的杂草,容易在环境选择过程中被保留下来,成为主要杂草;夏季是杂草爆发的高峰时期。木棉(Bombax malabaricum)初花期可以预测白花蛇舌草的(Hedyotis diffusa)爆发;猫尾木(Dolichandrone cauda-felina)初花期可以预测红花酢浆草(Oxalis corymbosa)、黄花酢浆草(Oxalis pes-caprae)、黄鹌菜(Youngia japonica)爆发;杜英(Elaeocarpus decipiens)盛花期、葱兰(Pouzolzia zeylanica)盛花期可以预测雾水葛(Pouzolzia zeylanica)的2个爆发期等。