中华绒螯蟹RXR基因全长cDNA克隆及表达分析

维甲类X受体(retinoid X receptor,RXR),属于核受体超家族(nuclear receptor super family)成员,是一种重要的调控因子,对甲壳动物生长发育和繁殖具有十分重要的作用。本研究根据陆地蟹 RXR基因保守区序列设计上下游引物,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)以及cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)RXR基因并进行各组织间的表达分析。序列分析表明中华绒螯蟹RXR cDNA全长1517bp,编码433个氨基酸。经BLASTn和BLASTx分析表明,中华绒螯蟹RXR氨基酸序列与陆地蟹RXR基因的氨基酸序列相似性最高,为96%。系统进化树分析显示,中华绒螯蟹RXR的氨基酸序列与陆地蟹RXR聚为一支。荧光定量PCR结果显示,RXR在所有检测的组织中均有表达,且在中华绒螯蟹Y器官中表达量最高,肝胰腺、鳃和肌肉中有少量表达,心脏、胃、肠、胸神经节和脑神经节中微量表达。在中华绒螯蟹不同蜕皮时期中,Y器官中RXR表达量在D期最高,与AB期、C期呈显著性差异（P＜0.05）;肌肉中RXR在AB期表达量最高,与其他蜕皮时期呈显著性差异（P＜0.05）;肝胰腺和鳃中RXR在AB期表达量最高,E期表达量最低,但各蜕皮时期表达量之间差异不显著。     

鲫和鳜主要过敏原小清蛋白的基因克隆及序列分析

小清蛋白(parvalbumin, PV)是鱼类的主要过敏原, 为分析淡水鱼PV的序列及结构特征,采用RT-PCR方法, 从鲫和鳜肌肉中分别克隆得到2种小清蛋白的基因序列。生物信息学分析结果显示, 4种基因的序列长度均为330 bp, 编码109个氨基酸残基, 推导分子量在11.6 ku左右, 等电点为4.45~4.69。氨基酸序列分析表明, 克隆得到的这4种PV序列均含有丙氨酸-14、亮氨酸-16、半胱氨酸-19、苯丙氨酸-67、谷氨酰胺-69以及苏氨酸-79等β型PV特征性残基序列, 表明克隆的目的基因均为β型PV。鲫的2种PV序列相似性为80.73 %, 鳜的2种PV的序列相似性为83.49 %。对克隆得到的PV序列进行空间结构分析显示, 这4种PV序列均含有3个螺旋-松弛-螺旋结构, 即EF-手型结构, 其中靠近C端功能域的两个手型结构为Ca^2﹢结合位点。     

饲料中添加"健肝散"预防丁(鱼岁)脂肪肝的作用

研究了在饲料中添加"健肝散"预防丁(鱼岁)(Tinca tinca)脂肪肝的作用.采用"健肝散"添加量分别为0 1%、0.2%、0.4%的饲料进行丁(鱼岁)养殖试验,试验周期为40 d,观察"健肝散"对其生长指标、血清主要生理、生化指标的影响.结果表明,当"健肝散"添加量为0.4%时,丁(鱼岁)的增重率、相对生长率和高密度脂蛋白胆固醇最高,肝脏脂肪含量最低,与空白对照组相比有显著差异(P＜0.05),与氯化胆碱组均无显著差异(P＞0.05);血浆中胆固醇、甘油三酯含量最高,与空白对照组相比有显著差异(P＜0.05),与氯化胆碱组有显著差异(P＜0.05);谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶的活性较低,与空白对照组相比有显著差异(P＜0.05),其中乳酸脱氢酶的活性显著低于氯化胆碱组(P＜0.05).当"健肝散"添加量为0.2%和0.4%时,肝体比均较低,与空白对照组相比有显著差异(P＜0.05),与氯化胆碱组无显著差异(P＞0.05);添加量为0.1%、0.2%和0.4%时,低密度脂蛋白胆固醇均较高,与空白对照组相比有显著差异(P＜0.05),与氯化胆碱组无显著差异(P＞0.05).在本研究条件下,丁(鱼岁)饲料中添加0.4%的"健肝散"时,可有效预防其脂肪肝疾病.     

Changes of immune function and mortality in patients with sepsis-induced stress hyperglycemia

AIM: To investigate the role of stress hyperglycemia on condition assessment and predicting prognosis in patients with sepsis. METHODS: The study included 44 patients with sepsis, divided into three groups according to their blood glucose profile within 24 h after admission: patients with stress hyperglycemia (group SH, n=15), diabetes mellitus type 2 (group DM, n=10), and normal glucose levels (group NG, n=19). CD4+/CD8+ ratio, Th1/Th2 ratio and HLA-DR% of the patients were measured within 24 h after admission by flow cytometry as assessment of their immune function. The sepsis-related organ failure assessment (SOFA) scores and acute physiology and chronic health evaluation II (APACHE II) scores of patients were recorded at the same time to analyze whether stress hyperglycemia affects the immune function and the 28 d mortality in patients with sepsis. RESULTS: A higher mortality rate of septic patients with stress hyperglycemia was observed compared to diabetic patients (53.3% vs 10.0%) and group NG (53.3% vs 21.1%). SOFA score and APACHE II score were higher in group SH than those in group DM and group NG while lower levels of human leucocyte antigen DR (HLA-DR) expression and CD4+/CD8+ ratio was found in group SH than those in group DM and group NG. No difference in the levels of Th1/Th2 among the three groups was observed. Non-survivors had higher levels of SOFA score, APACHEⅡ score, Th1/Th2 ratio and HLA-DR%. No difference was detected for CD4+/CD8+ ratio, mean glucose values and age. CONCLUSION: Stress hyperglycemia is associated with decreased immune function and an adverse clinical outcome in patients with sepsis.     

模糊层次评判法在中小型泵站老化状态评价中的运用

模糊层次评判法是一种基于模糊数学理论的评价方法.由于农村机电泵站较为复杂,对泵站综合性状高低的原因作出正确的评价需要涉及到许多方面的问题,相当多的参数很难制定一个严格的数值界限来进行评价.在农村机电泵站老化评价中,通过建立泵站工程老化病害评估的模型和中小型泵站老化模糊评估指标体系,运用层次分析法给出评估指标的权重,对指标的定性描述的模糊判断进行数字化和定量化,提出中小泵站老化评估指标的评级标准,根据评价得分,将泵站老化状态分为四类进行综合评价.利用该体系可以在不进行泵站参数测试的情况下,对泵站老化程度进行评估,确定泵站老化状况,并给出恰当的老化评级和评语,为工程改造提供决策依据.     

中国主栽水稻品种微卫星标记数据库的初步构建

以前期筛选的微卫星标记为基础,并在4个染色体上增加新标记,进一步检测了63个主栽常规稻品种和杂交稻亲本,推荐了24个微卫星标记（每条染色体2个）作为水稻品种鉴别的标记;除了63个常规稻品种和杂交稻亲本外,这24个标记还应用于检测41个主栽杂交稻组合,并确定了各个标记在试验材料中检测到的等位基因类型。通过杂交稻组合与其亲本的标记匹配性检验,确认了杂交稻母本的高真实性,提高了恢复系数据的可靠性,剔除了1个假杂交稻,建立了103个水稻材料×24个标记的主栽水稻品种微卫星标记数据库,并分析了数据库中各个标记、各组材料的多态性表现。此外,还讨论了材料真实性和典型性对数据库构建的影响,提出了水稻品种间差异判别标准的建议及其应用风险和解决途径。     

华南春大豆氮磷钾肥配施效应及用量研究

为探明华南春大豆生产的适宜施肥量,采用"3414"肥效试验设计,选用桂春豆106开展了氮磷钾肥配施效应和推荐施肥量研究。结果表明:氮、磷、钾肥料配施可明显提高华南春大豆产量,各肥料因素对大豆产量的增产效应依次为磷氮钾,氮、磷、钾三因素之间存在互作效应,效应大小依次为氮磷磷钾氮钾;经模型最优分析表明采用三元肥效函数模型做出施肥决策是合理可行的,经回归模型的拟合得出推荐施肥量,达到最高产量时氮(N)、磷(P_2O_5)和钾(K_2O)的施肥量分别为80.6,21.6和58.4 kg·hm~(-2),达到最佳经济产量时氮(N)、磷(P_2O_5)、钾(K_2O)的施肥量分别为75.5,21.3和54.1 kg·hm~(-2)。这些研究结果将为华南地区春大豆合理施肥提供指导,为下一步建立施肥指标体系提供依据。     

Cloning and Bioinformatical Analysis of Phospholipase Dα1 Gene and Its Promoter in the Latex of Rubber Tree (Hevea brasiliensis Muell.Arg.)

植物磷脂酶PLDα1与伤害信号转导密切相关,是伤害诱导内源茉莉酸(Jasmonic acid,JA)生物合成的关键酶之一.橡胶树胶乳PLDα1基因(HbPLDα1)表达的研究将有助于揭示橡胶树乳管细胞JA信号转导及其调控橡胶生物合成的机制.在EST序列的基础上,通过RACE和Genome Walking方法分别克隆了橡胶树胶乳的HbPLDα1基因及其启动子序列.HbPLDα1基因的cDNA全长为2 870 bp,包含长度为2427 bp的完整开放阅读框(ORF),具有典型的植物PLDα蛋白保守功能域,与同属大戟科的蓖麻和麻风树的PLDα1基因亲缘关系最近.HbPLDα1基因启动子区域长为1 559 bp,除含有TATA box和CAAT box等基本顺式作用元件外,还存在JA和脱落酸等激素响应元件以及干旱胁迫等环境信号响应元件,这表明HbPLDα1基因的表达可能受激素和环境信号的调控,在橡胶树乳管细胞对激素和环境信号的响应过程中发挥重要作用.