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以白花芥蓝‘四季粗条’为材料克隆了Boa DFR基因,Gen Bank登录号为MT472647,CDS序列长为1158 bp,编码385个氨基酸,与甘蓝型油菜、甘蓝和白菜等具有高度同源性。Boa DFR表达水平在芥蓝不同发育时期、不同器官中存在显著差异,随植株发育总体呈现先下降后上升的趋势,在幼嫩种子中表达量最高。芥蓝原生质体的亚细胞定位结果显示Boa DFR定位在细胞核上。构建了农杆菌介导的芥蓝瞬时过表达体系,将Boa DFR转入白花芥蓝‘四季粗条’和黄花芥蓝‘福州黄花’中,发现Boa DFR在两种芥蓝中均高水平表达,转基因植株叶片颜色明显变紫,花青素苷显著积累,总含量最高达461.43μg·g-1 FW,而野生型和转空载体芥蓝叶片中几乎检测不到花青素苷。通过HPLC在转基因植株叶片中共检测到8种花青素苷,均为矢车菊花青素苷,其中矢车菊–3–阿魏酰–丙二酰–槐糖苷–5–葡萄糖苷占比最高。 相似文献
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XU Jia-qi AN Mei-ling YUAN Yue HAO Yi-fan WANG Xiu-wen ZHANG Min WEI Xiao-wei LI Hua WANG Ren-jun 《园艺学报》2021,36(12):2148-2158
AIM To investigate whether microRNA-9-5p (miR-9-5p) mediates sympathetic overactivity by targeting KCNN3 (potassium intermediate/small conductance calcium-activated channel, subfamily N, member 3) gene,which encoded small-conductance calcium-activated potassium channel 3 (SK3) protein, in paraventricular nucleus (PVN) of rats with type 2 diabetes mellitus (T2D). METHODS A rat model of T2D was established by high-fat diet combined with intraperitoneal injection of 30 mg/kg streptozotocin. The levels of miR-9-5p and KCNN3 mRNA in PVN were detected by real-time PCR. The relationship between KCNN3 and miR-9-5p was predicted by TargetScan. Recombinant adeno-associated virus (rAAV)-miR-9-5p or KCNN3 were bilaterally microinjected into the PVN to observe the changes in plasma glucose levels and sympathetic drive indicators. The number of FosB and SK3 positive cells was measured by immunofluorescence staining. The protein expression of SK3 was determined by Western blot. The relationship between KCNN3 and miR-9-5p were confirmed by cell transfection and dual-luciferase reporter assay. RESULTS Compared with the rats in diabetes control (DC) group, the blood glucose, sympathetic drive indexes and the level of miR-9-5p in PVN were significantly increased, while the SK3 expression in PVN was obviously reduced in the diabetes mellitus (DM) rats. After microinjecion of rAAV-miR-9-5p in PVN, the sympathetic drive indexes, blood glucose, and the number of FosB-positive cells were increased significantly, but the SK3 protein expression was significantly reduced (P <0.05). However, up-regulation of KCNN3 in PVN had the opposite effect. These responses were obviously enhanced in DM rats compared with DC rats. The results of cell transfection and dual-luciferase reporter assay demonstrated that miR-9-5p bound to the 3’-UTR of KCNN3 and inhibit its expression. CONCLUSION miR-9-5p was up-regulated in PVN of the rats with T2D, and it may mediate sympathoexcitation by targeting KCNN3 . 相似文献
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植物刺激素寡糖具有提高作物抗逆作用、促进作物生长的功效。在黄瓜生长早期及生长期施用复合寡糖制剂,通过分析复合寡糖对植株光合作用特性、产量和黄瓜3个生长阶段植株叶片、根系及根围土微生物群落,阐明复合寡糖施用对黄瓜的增产增效作用。采用大棚小区试验,设置清水对照、化学常规和复合寡糖3个处理,于盛花期、盛果期和拉秧期分别采集黄瓜叶片、根系和根围土样本,测定各个采样时期黄瓜产量、叶绿素含量和抗氧化酶活性,进行高通量测序检测样本细菌群落结构和组成。复合寡糖的施用与清水对照相比,提高了单株黄瓜产量,使得每公顷的产量增加了4.96%;显著提高了黄瓜叶片叶绿素的含量,复合寡糖处理对比其他处理能够显著提升叶片叶绿素含量的相对值(SPAD)6.14%~11.46%;同时提高了叶片的超氧化物歧化酶活性39.9%~81.5%,提高了过氧化氢酶活性8.4%~40.4%,提高了过氧化物酶活性1.19%~18.5%。高通量测序分析结果表明,复合寡糖的施用提高了叶片微生物群落中鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)和甲基杆菌属(Methylobacterium sp.)的丰度,它们均具有促进植物生长和协助植... 相似文献
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