尸体剖检

在基层工作中，经常遇到要对动物的尸体进行剖检。在条件不完全具备的情况下，如何及时、准确地完成动物尸体的剖检，除遵循一定的剖检程序外，还需要有一定的具体要求和具体方法。下面以猪的尸体剖检为例作一浅述。１ 要求１．１ 准备必要的工具设施及个人防护工作 工具设施：（大）剪刀（果树剪或长剪）、手术刀片、钩（无齿）、镊子、瓷盆、塑料手套、（贴有标签的）瓶子（广口瓶或塑料小口瓶）、玻片（载玻片、盖玻片）、显微镜，（剖检用的）记录本、照相机、消毒液。个人防护工作中，必须注意有外伤时，不应参加剖检工作。１．２ 做好…     

饲料钙测定中原子吸收法和高锰酸钾滴定法的比较

在国家标准中，饲料中钙的测定方法是高锰酸钾滴定法。其方法原理是：将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离子，用草酸铵定量沉淀，用高锰酸钾法间接测定钙含量。此方法前处理较繁琐，前后需三天时间，检测周期较长。对于大批量的样品检测的速度带来一定的影响。原子吸收法测定比高锰酸钾滴定法更简便和直接，并且更精确。其方法原理为：样品经湿法消化，分解有机质后，将钙元素溶解在稀酸中，将溶液直接吸入空气－乙炔火焰中原子化，并在光路中测定钙原子对特定波长谱线的吸收。1 仪器和试剂1.1 仪器原子吸收分光光度计(美国瓦里安公司，…     

单味与复方中草药提取物抑制镰刀菌的比较研究

本试验以禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)和串珠镰刀菌(Fusarium verticillioides)为供试菌株,从26种中草药水提物中筛选出6种对两种镰刀菌有抑制效果的药物,通过不同的组方配伍,利用生长速率法检验不同组方对镰刀菌的抑制效果。试验显示:对串珠镰刀菌抑菌效果最强的为肉豆蔻-五味子两药配伍组,抑菌率为70.55%(P <0.05),比单药和三药配伍最优组分别高11%、17%。对禾谷镰刀菌抑菌作用最强的是肉豆蔻-诃子-石榴皮三药配伍组,抑菌率为77.91%(P <0.05),比两药配伍最优组高58%,较单药最优组提高90%;结果表明中草药提取物组方后可显著提高抑菌活性。     

急性热应激对山羊血液生化指标及血淋巴细胞热休克蛋白70家族基因表达的影响

旨在研究急性热应激对山羊抗氧化能力、免疫功能和血淋巴细胞热休克蛋白70(HSP70)家族基因表达的影响。本试验选取5只健康、体况接近的(12±0.5)月龄波尔山羊×关中奶山羊杂交F1母羊,饲养于环控舱内(温度维持20℃,相对湿度60%),适应5d。第6天利用环控舱对5只试验羊进行38℃急性热应激处理12h,采集热应激前(0h,20℃)和热应激后2、4、8和12h试验羊血样。分别利用比色法测定血清抗氧化指标(总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量),ELISA法测定血清免疫指标(免疫球蛋白和细胞因子含量),实时荧光定量PCR法测定血淋巴细胞HSP70家族基因(HSPA1A、HSPA6和HSPA8)mRNA的表达量。结果显示:1)热应激时间对血清抗氧化指标有显著影响。与热应激前0h相比,血清T-AOC(P<0.05)、SOD(P<0.05)和GSH-Px(P<0.01)活性均在热应激8h后显著下降,MDA含量在热应激4h后显著增加(P<0.05)。2)热应激时间对血清免疫指标有显著影响。与热应激前0h相比,血清TNF-α、IL-1β、IFN-γ和IL-2含量分别在热应激4、8、8和4h后显著增加(P<0.05);IL-4(P<0.01)、IgG(P<0.01)、IgM(P<0.01)和IgA(P<0.05)含量分别在热应激12、4、4和4h后显著下降。3)热应激时间显著提高血淋巴细胞中HSP70家族基因(HSPA1A、HSPA6和HSPA8)的表达量。HSPA1AmRNA表达量呈先升高后下降的趋势,在热应激4h时达到峰值,各检测时间点均显著高于应激前水平(P<0.01);HSPA6mRNA表达量在热应激2h时显著升高(P<0.01),4h后恢复到应激前水平(P>0.05);HSPA8mRNA表达量在热应激4(P<0.05)、8(P<0.01)、12h(P<0.01)时显著高于应激前水平。在本试验条件下,38℃急性热应激能够抑制山羊的免疫和抗氧化功能;提高血淋巴细胞HSPA1A、HSPA6和HSPA8基因的表达量,其中HSPA1A对热应激温度和时间更敏感,可作为山羊热应激早期的分子标志物。     

小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法的建立

通过优化大肠埃希菌密码子、优化表达条件等方法,在大肠埃希菌表达系统中成功获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白。进一步基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法。该方法敏感性高,特异性强,能够特异性的检测羊血清中的小反刍兽疫病毒抗体,与其他相关疫病病原无交叉反应;重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。对292份临床血清样品进行检测,与法国IDVET竞争ELISA试剂盒比较,阳性样品符合率为92.47%,阴性样品符合率为97.26%,总的符合率为94.86%。该方法与传统的ELISA方法相比,具有敏感性、特异性相当,操作简单、快速,具有较高的推广应用价值。     

羊布鲁氏菌16M基因组分泌蛋白的生物信息学分析

对羊布鲁氏菌全基因组16M中全部3 197个氨基酸序列进行生物信息学分析.利用SignalP和TatP软件分析N-端信号肽,结果显示具有N-端信号肽的序列有288个;继而用TMHMM和Phobius软件对这288个序列进行跨膜区预测,得到不含跨膜区的蛋白208个;最后利用LipoP对这208个蛋白进行分类,得到具有信号肽的蛋白191个.使用SecretomeP软件对被预测为无信号肽的蛋白质进行分析,结果显示有391个可能通过非经典途径分泌.由于分泌蛋白在细菌的致病过程中起着重要作用,而布鲁氏菌基因组编码的大多数蛋白的功能尚未确定,因此分析和预测布鲁氏菌的分泌蛋白可为更完整地、系统地研究布鲁氏菌的分子致病机理提供非常重要的信息.     

致弱过程中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株部分生物学特性的研究

为了研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)弱毒疫苗,将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN4株进行了致弱驯化,在Marc-145细胞上对其进行了3次蚀斑克隆和连续传代.该毒株的病变速度随着代次增高逐渐加快,传至80代以后其病毒滴度达到最高并保持稳定;电镜观察发现低代次病毒粒子形态以棒状为主,高代次病毒粒子形态以球形为主;蚀斑形态比较发现低代次病毒形成的蚀斑大小不一,而高代次病毒形成的蚀斑大小均一;序列分析和病毒抗原性分析表明HuN4株传代过程中GP5蛋白羧基端1个主要抗原表位(196QWGRL200)发生突变即196Q突变为196R,针对该表位的单克隆抗体只与HuN4株低代次病毒反应而不与高代次病毒反应.以上结果表明:在Marc-145细胞上经蚀斑克隆和连续传代致使HP-PRRSV HuN4株部分生物学特性发生改变,这些特性的改变在病毒弱化过程中的作用还有待进一步的研究.     

Phylogenetic analysis of Newcastle disease viruses isolated from wild birds in the Poyang Lake region of China

Newcastle disease virus (NDV) causes a highly contagious viral disease in poultry and wild birds, and it can cause significant economic loss worldwide. Eight viral strains were isolated by inoculating embryonated chicken eggs from the Poyang Lake region of China with swab samples. All eight of the NDV isolates were identified as class I genotype 3 strains, but they diverged notablely from class II viruses. Further analysis revealed that all eight NDV isolates were lentogenic strains containing the ¹¹²ERQER↓L¹¹⁷ motif at the F protein cleavage site. The strains were highly identical and were more species specific (chicken and waterfowl) than site specific (Nanchang and Duchang regions). The close phylogenetic proximity of these isolates indicates that viral transmission may happen between poultry and wild birds. Our study demonstrates that lentogenic class I NDVs exist in clinically healthy wild waterfowl and poultry within the Poyang Lake region. Active surveillance of these viruses to determine their evolution and origin is one of the most realistic strategies for preventing and controlling NDV outbreaks.     

不同苜蓿种质材料对茎点霉叶斑病的抗性评价

为了明确不同苜蓿材料（Medicago Sativa）对茎点霉叶斑病的抗性,对来自国内外的30份苜蓿材料进行了苗期抗病性评价,采用紫外分光光度计比色法,对不同抗感病材料体内的苯丙氨酸解氨酶（PAL）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物歧化酶（SOD）活性变化进行了研究。结果表明：不同苜蓿材料对茎点霉叶斑病的抗病性存在显著差异,各材料间病情指数（4.28~51.65）变化较大,其中抗病性最强的是来自内蒙的‘敖汉苜蓿’,感病性最强的是来自陕西的‘陕西苜蓿’,中抗材料有10份。接菌前,各材料间CAT,SOD活性差异显著（P<0.05）,而PAL活性差异不显著;接菌后,3种酶活性均比接菌前有所升高,CAT和PAL呈先增后减的趋势,SOD活性呈依次递减趋势;同一材料在接菌后第4,8,12天3种酶活性也表现显著性差异（P<0.05）。     

典型草原开垦弃耕后不同年限群落植物多样性和空间结构特征

本文旨在研究不同退耕年限下典型草原群落空间结构和植物多样性的变化特征。以长武王东沟流域不同退耕年限的典型草原为研究对象,采用空间序列代替时间序列的方法,对植物群落空间结构和植物多样性的变化特征进行了调查和研究,旨在为草地恢复和管理提供一定的理论基础。结果表明,随着退耕年限的增加,群落高度、盖度、多样性指数、地上生物量、平均个体大小和禾草类功能群所占比例均显著增加（P<0.05）,而群落均匀度指数、密度均显著降低（P<0.05）。在演替的过程中,群落中主要植物种的优势地位发生了明显的替代变化,由演替初期的冰草（Agropyron cristatum）、散穗早熟禾（Poa subfastigiata）,经过中期的异燕麦（Helictotrichon schellianum）、散穗早熟禾,到演替后期的散穗早熟禾。植物群落的空间结构也发生了显著变化,由初期的高密度、小个体分布到后期的低密度、大个体分布。退耕时间对草地群落的物种组成、空间结构及系统功能等方面均存在显著影响。