微生物菌群培养组学在动物医学中的应用

实验室条件下可培养的微生物约占自然界中微生物总数的1%,这限制了人们对99%未知微生物的认识和利用,而研究表明,那些“不可培养的微生物”是可以被开发和利用的,未能被纯培养的微生物才是未知微生物的主体。微生物培养组学探索利用多种培养条件和长时间的培养,结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法（MALDI-TOF-MS）和16S核糖体RNA（rRNA）测序可以大规模鉴定各种微生物,同时利用全基因组测序和宏基因组测序手段对未知微生物进行深入分析。本文综述了国内外近年来微生物菌群培养组学在反刍动物胃肠道、禽类盲肠及家畜鼻腔微生物菌群研究中的最新进展,探讨将动物体内菌群培养组学方法应用于动物疾病防治领域的可行性。作为一个新兴的研究方法,尽管该培养组学还存在一些不够成熟的方面,但它的发展前景十分广阔,微生物菌群培养组学方法和其他研究方法的互补已经逐渐成为发展兽医微生物学新的突破口。     

不同NDF水平肉羊日粮养分表观消化率研究

为了测定不同中性洗涤纤维(NDF)水平对肉羊日粮养分表观消化率的影响,选用4只体重相近[(23.5±0.6)kg7的4月龄杂交一代(小尾寒羊×尤角陶赛特)羯羊,采用4×4拉丁方设计进行试验.4种试验口粮按等能等氮而NDF水平分别为30%、35%、40%和45%进行配制(干物质基础),定量饲喂.在本试验条件下,除45%NDF日粮的干物质表观消化率显著(P<0.05)低于其他日粮外,不同NDF水平对肉羊日粮的有机物、粗蛋白质和淀粉表观消化率均未产生显著影响(P>0.05);不同NDF水平并未显著影响(P>0.05)肉羊日粮的NDF、酸性洗涤纤维、纤维素和半纤维素表观消化率,但30%和45%NDF日粮相应指标均较低.综合分析,不同NDF水平对肉羊日粮养分的表观消化率有一定影响,肉羊日粮的适宜NDF水平为35%～40%.     

牛初乳与牛常乳中乳脂肪球膜蛋白质的组成及功能的对比研究

利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)将牛初乳与牛常乳中乳脂肪球膜蛋白质的组成部分进行分离鉴定,发现牛初乳与牛常乳中乳脂肪球膜蛋白质的组成存在较大的差异,且在牛初乳中鉴定出628种乳脂肪球膜蛋白质,牛常乳中鉴定出487种乳脂肪球膜蛋白质.由基因本体(gene ontology,GO)功能注释分析发现,在生物过程中生物调控作用是牛初乳和牛常乳中乳脂肪球膜的主要生物过程.在分子功能上,牛初乳的乳脂肪球膜蛋白质的绑定作用大于牛常乳.在细胞组成上,牛初乳乳脂肪球膜蛋白质参与细胞外区域远远大于牛常乳.通过京都基因与基因组百科全书系统(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)代谢通路分析可知,牛初乳和牛常乳乳脂肪球膜蛋白质参与的代谢途径不同,表明牛初乳在日后的生产加工中更具有利用价值.     

马媾疫锥虫SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种特异、快速的媾疫锥虫检测方法,本研究通过PCR方法从马媾疫锥虫动基体基因组中扩增得到395 bp的特异的保守序列,将其克隆到pMD-18T载体中构建重组质粒标准品,以10倍倍比稀释的质粒标准品为模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立马媾疫锥虫荧光定量PCR的检测方法。结果表明:该方法的检测灵敏度可达到1拷贝/μL,并且与马属动物其他传染病无交叉反应。其组间及组内变异系数分别小于3.183%和3.842%。该方法的建立为快速及特异性检测马媾疫锥虫提供了有效的方法。     

獭兔生殖器官生长发育规律研究

选择15、30、60、90、120日龄獭兔进行屠宰,测定其睾丸、附睾、阴茎、卵巢、子宫等主要生殖器官的长度和质量,研究獭兔生殖器官发育规律。结果表明：睾丸、附睾、卵巢和子宫生长发育的高峰期均在60-90日龄,阴茎的发育高峰在90日龄以后,且发育平缓。     

禽腺病毒血清4型贵州株全基因序列分析

为了解禽腺病毒血清4型(FAdV-4)地方流行毒株的分子进化情况,基于实验室分离的2株FAdV-4贵州株GZ-BJ株和GZ-QL株,分别对2株FAdV-4毒株进行PCR分段扩增,扩增产物克隆至载体,提取质粒进行PCR和双酶切鉴定后筛选出重组质粒进行测序,将测序结果依次拼接得到病毒的全基因组,获得FAdV-4贵州株的全基因序列,并对其进行序列和遗传进化分析。结果显示,通过PCR分段扩增成功获得了2株FAdV-4贵州株(GZ-BJ株和GZ-QL株)的全基因序列,长度分别为43352、43723 bp,FAdV-4 GZ-BJ株全基因序列长度比FAdV-4 GZ-QL株短371 bp,少6个ORF(22K、putative 9.1 ku、u-exon、ORF17、ORF28、ORF42),二者的氨基酸同源性为57.1%。2株FAdV-4贵州株同国内外不同地区FAdV-4毒株核苷酸同源性在88.7%~100%,与FAdV-4经典毒株ON1比对,2株FAdV-4贵州株和国内FAdV-4分离株均缺失ORF19、ORF27、ORF30。系统进化树分析显示,2株FAdV-4贵州株GZ-BJ株和GZ-QL株仍属于Ⅰ群C种FAdV。研究结果表明,2株贵州株FAdV-4 GZ-BJ株和FAdV-4 GZ-QL株较国内外FAdV-4毒株均存在进化与突变,且FAdV-4 GZ-BJ株变化较大,但尚未改变其血清型,这为探索FAdV-4致病机理的分子机制研究提供依据。     

松嫩草原盐碱土过氧化物酶活性及其与肥力因素的关系

2007年5-9月,对松嫩草原盐碱土过氧化物酶活性及肥力因素进行测定,为改良利用盐碱草地提供理论依据。结果表明:研究样地内过氧化物酶活性变化范围较大,8月份变异系数最高;随着植被盖度的增加,酶活性呈现逐渐降低的趋势;在植被生长季内酶活性5月较高,而在8月较低;过氧化物酶活性和全氮呈显著负相关;和速效磷、全盐、pH值有显著的正相关关系;和其他肥力因素相关性因月份而异。主成份分析结果表明可以用过氧化物酶活性作为盐碱土肥力变化的指示指标。     

蛋氨酸硒和纳米硒对波尔山羊种公羔生长及血液、组织硒含量的比较

[目的]为了研究纳米硒(nano-selenium)和蛋氨酸硒(methionine-selenitim)对种公羊羔羊生长发育以及血液、组织中硒的沉积和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响.[方法]试验选用体重相近的30只种用波尔山羊断奶公羔随机分3组,每组10个重复,预试2周,正试12周,分别饲喂基础日粮(对照组);基础日粮+0.3 mg/kg纳米硒;基础日粮+0.3 mg/kg蛋氨酸硒(以硒浓度计算).每隔4周采血样一次,试验结束时,每组随机屠宰羔羊3只测量组织硒浓度.[结果]不同的硒源和一定浓度的硒对公羔生长发育影响不显著(P>0.05);添加蛋氨酸硒和纳米硒的公羔组织器官,血清,全血硒含量以及肝脏谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照组(P<0.05),添加组之问差异不显著.[结论]统计结果表明,纳米硒和蛋氨酸硒与对照相比都能有效地增加血液、组织中硒的沉积,添加纳米硒组羔羊硒沉积和谷胱甘肽过氧化物酶活性稍高于蛋氨酸硒组,羔羊添加纳米硒更易于硒的吸收和沉积.     

水貂TYR基因T138A位点多态性及其与毛色性状的关联分析

试验旨在检测水貂酪氨酸酶（tyrosinase,TYR）基因T138A位点的多态性,并分析其与水貂毛色表型的相关性。提取5种被毛色型430只水貂血液基因组DNA,采用PCR-RFLP技术,对TYR基因T138A位点进行多态性检测,统计等位基因频率与基因型频率,通过卡方（χ²）独立性检验分析该位点多态性与水貂毛色性状的相关性。结果表明,T138A位点存在2个等位基因T和A,形成TT、TA和AA 3种基因型,AA基因型在吉林白水貂群体中为优势基因型（0.9069）,而TT基因型为金州黑水貂、珍珠水貂、咖啡水貂和银蓝水貂群体的优势基因型,其中在金州黑水貂群体中基因型频率最高（1.0000）。关联分析表明,TYR基因T138A位点的多态性与毛色性状呈极显著相关（P<0.0001）。表明TYR基因T138A位点可能是影响水貂毛色的主控位点或与调控白色被毛表型主控位点连锁的分子标记。     

空肠弯曲菌耐药机制研究进展

空肠弯曲菌是一种全球关注的人兽共患病病原菌,由于滥用抗生素而造成其耐药性不断增强,成为公共卫生日益关注的问题.各类抗生素作用位点的基因突变是诱发空肠弯曲菌对各类临床常用的抗生素产生耐药的主要原因,同时细菌对药物的外排机制也在其对抗生素耐药过程中发挥了一定的作用.文章对空肠弯曲菌对各类临床常用抗生素的耐药机制做一综述.