Effects of PPARγ agonist on calpain expression in model of acute experimental autoimmune encephalomyelitis

AIM: To explore the effects of peroxisome proliferator-activated receptor γ （PPARγ） agonist on calcium-activated neutral proteinase, calpain, expression in the brain of rats with acute experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE). METHODS: EAE model was established in rats by inoculating the homogenate contained spinal cord of guinea pig and complete Freunds adjuvant. Respectively, the PPARγ agonist rosiglitazone and non-steroid anti-inflammatory drug (NSAID) ibuprofen were used to treat the EAE rats. Outcome measures (Kohs scale) were applied at baseline and after treatment to assess the improvement of clinical symptoms. Calpain expression levels were detected by RT-PCR and Western blotting. RESULTS: All the groups showed significant improvements of scales scores after treatment with rosiglitazone and ibuprofen. No significant difference of the expression of calpain mRNA was found among EAE group, rosiglitazone and ibuprofen groups (P>0.05), but the expression of calpain reduced markedly in rosiglitazone and ibuprofen groups compared with that in EAE group (P<0.05). CONCLUSION: Rosiglitazone and ibuprofen inhibit the expression of calpain and improve the clinical symptoms of EAE rats. PPARγ agonist plays a neuroprotective role in EAE rats.     

猫泛白细胞减少症病毒北京株NS1基因克隆与生物信息学分析

为分析猫泛白细胞减少症病毒（FPV）北京株（FPV-BJ 05株）NS1基因的分子特征及其编码蛋白的生物学功能,本研究对FPV-BJ 05株NS1基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学软件分析FPV-BJ 05株与GenBank上登录的11株FPV参考株NS1基因的同源性,并预测NS1蛋白理化性质、信号肽、跨膜结构、B细胞抗原表位、磷酸化位点、亚细胞定位及蛋白结构与功能、高级结构等。结果显示,NS1基因全长2 007 bp,编码668个氨基酸,且与其他FPV分离株NS1基因核苷酸序列同源性为98.8%~99.3%,氨基酸序列同源性为97.9%~98.8%。系统进化树分析结果显示,FPV-BJ 05株NS1蛋白与GenBank上登录的3株FPV参考株处于同一大分支,但由于氨基酸的突变导致其属于独立的一小分支。NS1蛋白既无信号肽也无跨膜结构域,属于非分泌型的疏水性蛋白。B细胞抗原表位预测结果显示,NS1蛋白柔韧性较好,抗原性及表面可及性较高,预测该蛋白含有13个优势抗原位点。修饰结构预测表明,NS1蛋白含有62个潜在磷酸化位点,27个O-糖基化位点和2个N-糖基化位点。亚细胞定位结果显示,NS1蛋白在细胞质和细胞核的概率较高,分别为69.6%和17.4%。NS1蛋白二级结构中α-螺旋、延伸链、无规则卷曲和β-转角分别占39.37%、15.42%、39.37%和5.84%。应用在线软件SWISS-Modle对NS1蛋白进行建模,预测其三级结构,结果发现NS1蛋白主要以α-螺旋为主。本试验结果将为北京地区FPV免疫诊断及核酸疫苗研究提供理论依据。     

邻烯丙基苯酚对植物病原真菌抑制机理初探

用含毒介质培养法测定了邻烯丙基苯酚(银果)对番茄灰霉病菌Botrytis cinerea、苹果腐烂病菌Valsa mali和小麦纹枯病菌Rhizoctonia cerealis的影响。通过培养观察发现,邻烯丙基苯酚可抑制番茄灰霉病菌分生孢子的产生、促进灰霉病菌菌核的形成及苹果腐烂病菌子囊壳的形成。光学显微观察表明:用50μg/mL的邻烯丙基苯酚处理番茄灰霉病菌菌丝后,菌丝伸长缓慢,分支间距缩短,分生孢子形成受到抑制。电镜观察表明:经邻烯丙基苯酚处理后,番茄灰霉病菌菌丝内液泡增多,苹果腐烂病菌菌丝细胞壁增厚,小麦纹枯病菌菌丝中内质网处泡囊增多。     

噬菌体表面展示技术的发展及应用

随着噬菌体展示技术自身建库、筛选方法等方面的进一步改进和完善,目前已被广泛应用于生命科学的许多领域,特别是噬菌体表面展示技术在蛋白质相互作用方面的成功应用,为筛选新的结合蛋白提供了一种简单、有效的手段,还为功能基因组学的研究提供了一个新的方法。该技术还在药物研制和疾病机理方面显示出很大的应用潜力,目前已成为筛选对人类疾病有诊断和治疗价值的生物活性分子的重要手段,并已广泛用于癌症、艾滋病、心血管病、组织器官移植、神经性疾病等领域药物的研究和开发。     

不同施肥种类及施用量对小麦禾谷胞囊线虫病发生的影响

 在大田及室内条件下研究了尿素(Urea)、过磷酸钙(Superphosphate)、硫酸钾(Potassium sulphate)、硝酸磷钾复合肥(Phosphorus-potassium nitrate fertilizer)4种肥料、10个配比施用量对小麦禾谷胞囊线虫病的影响。室内盆栽结果表明,尿素375kg/ha处理对线虫的抑制作用最好,过磷酸钙900kg/ha、尿素300kg/ha和尿素225kg/ha次之;硫酸钾270kg/ha、硝酸磷钾复合肥525kg/ha、硝酸磷钾复合肥525kg/ha+硫酸钾120kg/ha3个处理对线虫的抑制作用均为负值。大田试验结果表明尿素300kg/ha、尿素225kg/ha和过磷酸钙900kg/ha3个处理对线虫的抑制作用最好;硫酸钾270kg/ha、硝酸磷钾复合肥525kg/ha、硝酸磷钾复合肥525kg/ha+硫酸钾120kg/ha3个处理对线虫的抑制作用较差。在抑制线虫增殖方面,复合肥525kg/ha+尿素75kg/ha处理效果最好,过磷酸钙900kg/ha、尿素300kg/ha2个处理对线虫增殖也具有一定的抑制作用;硫酸钾270kg/ha、硝酸磷钾复合肥525kg/ha、硝酸磷钾复合肥525kg/ha+硫酸钾120kg/ha3个处理则促进线虫增殖。产量测定结果表明,过磷酸钙900kg/ha、尿素300kg/ha、复合肥+磷肥187.5kg/ha3个处理增产效果均在10%以上;硫酸钾270kg/ha、硝酸磷钾复合肥525kg/ha、硝酸磷钾复合肥525kg/ha+硫酸钾120kg/ha3个处理增产效果均低于5%。     

马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株囊膜基因的优化及其DNA疫苗体外瞬时表达研究

马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)的密码子使用频率与哺乳动物间存在着明显差异。为此,对马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株(DLA-EIAV)囊膜全长基因按照哺乳动物优势密码子的使用原则进行了重新设计和合成,并以此为基础通过重叠延伸PCR、限制酶切等方法得到结合型和分泌型囊膜基因,将其插入含有鸡beta-actin/兔beta-globin复合启动子(AG)的高效表达载体pCAGGS中,构建了EIAV驴白细胞弱毒疫苗株结合型和分泌型囊膜基因的DNA疫苗质粒pCAGGS-opti-bou-env、pCAGGS- opti-sec-env。将构建的质粒纯化后分别转染293T细胞,以间接免疫荧光和Western blot方法检测转染48 h后细胞及上清中囊膜蛋白的表达。结果显示,两种表达质粒均可正确表达EIAV囊膜蛋白,与相对应未优化的表达载体pCAGGS-wt-bou-env和pCAGGS-wt-sec—env相比,密码子优化的基因体外瞬时表达水平有极为显著的提高,而且蛋白表达部位也与预期的结果符合。这一结果为EIAV囊膜蛋白的单抗制备、表位鉴定、免疫试验、新疫苗的开发等奠定了基础。     

基于SD模型的吐鲁番市生态-生产-生活承载力分析

文中在SD模型的基础上建立吐鲁番市生态-生产-生活承载力模型,模拟该地区在生态城市相关指标下的生态、资源环境和经济三个系统的发展趋势,将其可持续指标体系引入承载力的评价,在多种参数的调控下,设计四种发展模式,选出最优.结果表明:将2010-2030年吐鲁番绿洲农业、工业增长率分别维持在11％、9％左右,乡村人口、城镇人口增长率分别控制在2.5％、1％,把耕地面积增长率和减少率分别控制在4％、2％,灌溉面积增长率控制在2.1％,地表水、地下水开发率分别降低为2.4％、3.8％,吐鲁番市2030年城市化率将达到50％,耕地面积达到70074hm2,地表水减少到7.3013亿m3,地下水资源量降到1.59亿m3,水资源承载力、经济承载力、耕地承载力也处于相对平衡的状态.     

水稻内生细菌B196的鉴定及其对水稻纹枯病的防治作用

从水稻体内分离得到的细菌菌株B196对水稻纹枯病菌Rhizoctonia solani的生长有较强抑制作用.通过形态学和生理生化鉴定及16S rDNA序列分析,将菌株B196鉴定为巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium.采用浸种和喷雾的方法将菌株B196接种到水稻植株后,均能在稻株体内回收到该菌株,表明菌株B196能在水稻体内定殖.菌株B196对水稻纹枯病的盆栽和田间防效分别为64.29%和55.13%.     

芸薹种作物抽薹相关基因BrFLC1的CAPS标记

以16份芸薹种作物DH系为试材,通过人工春化处理对其抽薹性状进行了鉴定,明确了材料间抽薹早晚存在显著差异;根据BrFLC1基因序列设计引物进行PCR扩增发现,所有16份材料均获得980 bp的片段。多序列比对与抽薹性的关联分析发现,材料的抽薹早晚与扩增片段的碱基变异相关联,并发现关联位点的碱基变异为限制性内切酶Mva I的识别位点;利用该酶对PCR产物酶切可以将材料明显区分开来,从而建立了BrFLC1基因的CAPS标记（命名为G-Mva I）。利用此标记对96份芸薹种作物DH材料的验证表明,该基因的分子标记结果与抽薹时间表型显著相关,用该标记可以进行分子标记辅助选择。     

陕西关中地区土地生态价值时空动态

为探明土地生态系统服务价值的空间差异性,以关中地区遥感影像、气象气候、土壤植被及地形地貌数据为依据,借助格网插值技术和土壤潜力测算模型获取土壤潜力栅格图,运用土地利用栅格图及生态系统服务价值当量因子加权,生成土地生态系统服务价值栅格图;从而在栅格尺度上揭示土地生态系统服务价值的空间异质性。结果表明:1986—2007年间,关中地区土地生态系统服务价值总量由509.61亿元增加到561.02亿元,增幅约为10.09%,2000—2007年段增速约为1986—2000年段的33.65倍;周边山地和黄土梁峁区生态价值增加,增量最大的为周至县;中部平原区的生态价值量减少,减量最大的是西安市区;研究期内的土地利用结构调整取得了较明显的生态效益。