猪雄性生殖干细胞的分离培养及鉴定

本试验旨在探索猪雄性生殖干细胞(mGSCs)体外分离、培养的适宜条件,建立猪雄性生殖干细胞体外培养体系。采用两步酶消化法对新生小猪睾丸生殖干细胞进行了体外分离和初步的培养鉴定,并利用层黏连蛋白和明胶的不同贴壁特性,比较2种差易贴壁分选方法的富集效果,并对传代后的干细胞培养1周后进行碱性磷酸酶染色鉴定,通过免疫荧光技术检测培养细胞是否表达干细胞标志蛋白OCT-4。试验结果表明,层黏连蛋白更适用于猪生殖干细胞的富集、培养,细胞分选效率及增殖生长明显优于采用明胶分选的方法。培养的mGSCs拥有与小鼠mGSCs相同的形态、增殖及表达特征。鉴定结果显示,生长细胞克隆碱性磷酸酶染色呈阳性,支持细胞碱性磷酸酶染色呈阴性;培养的生殖干细胞克隆表达转录蛋白OCT-4,而饲养层支持细胞OCT-4抗体染色则呈阴性。结果表明培养的干细胞克隆仍保持较好的干细胞活性,保持正常的自我复制和分化潜能,初步建立了生殖干细胞培养体系。     

日粮营养水平及肉粉用量对肉小鸭生长性能的影响

本试验选择7日龄健康天府肉鸭720只,随机分为6个处理,每处理3重复,每重复40只,考察两个日粮营养水平(ME 12.05 MJ/kg、CP 19.2％,ME 11.92 MJ/kg、CP 18.3％)及3个肉粉用量(0％、2.5％、5％)对肉鸭生长性能的影响.试验鸭自由采食与饮水,试验期在7～14日龄.试验结果表明,当保持日粮赖氨酸及蛋氨酸水平分别在0.85％～0.9％与0.37％～0.4％时,不同能量与蛋白水平对肉鸭生长性能的影响不显著(P＞0.05),当保持赖氨酸(0.9％)及蛋氨酸(0.4％)水平一致时,肉粉用量对肉鸭生长性能的影响不显著(P＞0.05);但随着日粮中肉粉用量的增加,赖氨酸水平从0.86％降到0.81％时,肉鸭增重有降低的趋势,5％肉粉处理组(赖氨酸0.81％)的增重低于不加肉粉处理组8.3％(赖氨酸0.86％).     

紫花苜蓿MsCOL1基因RNAi表达载体的构建及转化

根据紫花苜蓿CONSTANS类似基因MsCOL1基因(登录号:DQ661682)序列,设计含有酶切位点的两对特异性引物,以紫花苜蓿cDNA为模板,分别合成用于构建干扰载体的正反义片段,将正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置,构建含有发夹结构的RNAi载体pART-S-A.利用农杆菌介导方法,将pART-S-A转化到紫花苜蓿中,经PCR检测,获得了7株转基因植株.经RT-PCR检测,证明转基因植株中MsCOL1基因表达量有所下降,其中5株的表达量明显的降低.结果表明,已构建成功具有发夹结构的RNAi载体pART-S-A,它可有效的抑制紫花苜蓿MsCOL1基因.     

观赏鱼常见寄生虫病的诊治初探

观赏鱼资源丰富,却常发生寄生虫病,给水族爱好者带来较大的损失。本文通过对病鱼或死鱼的临床检查、病理剖检及实验室检查,对常见的瓣体虫病、车轮虫病、小瓜虫病、指环虫病和本尼登虫病的诊断进行了初步研究,并在此基础上进行了治疗。结果表明,以上5种寄生虫病在症状上有很多相似之处,只有经过刮片镜检,才能准确诊断。当鱼体诊断出有寄生虫时要迅速用硫酸铜、甲醛、吡喹酮和黄药粉等高效药物进行治疗。     

兰坪乌骨绵羊的引种适应性观察

兰坪乌骨绵羊是原产于云南省兰坪县、国内外唯一的具有乌骨乌肉特性的独特绵羊种质资源.为探明兰坪乌骨绵羊对环境的适应性,从云南省兰坪县引种兰坪乌骨绵羊160只至安徽省宁国市,通过观察和分析引种后原种和自繁羊群在新的生态条件和饲养管理条件下的成活和抗病、生理指标、生长发育和繁殖等性能.结果表明,虽然引入地与原产地距离遥远,生态差异大,羊群各方面表现良好,云南乌骨绵羊能够适应安徽省宁国市的自然生态环境和气候条件.     

鸡Bcl-2基因的克隆及其对卵泡颗粒细胞凋亡的影响

将鸡的 Bcl- 2基因克隆到真核表达载体 JL V中 ,构建了重组质粒 JL VB。 0 .2μg/孔 JL VB重组质粒经脂质体介导转染卵泡颗粒细胞 ,应用流式细胞术等方法分析了转染 Bcl- 2基因后原代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。与对照组相比 ,转染后的传代细胞分裂速度较快 (P<0 .0 1) ,凋亡比率较低 ,G2 / M S期细胞比例极显著高于对照组 (P<0 .0 1)。这些结果表明 ,Bcl- 2基因具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用 ,这种作用是直接的。在转染时间为 12 h、DNA量为 0 .3μg/孔的条件下 ,较好的脂质体介导用量为 1.2 μL/孔。     

鸽新城疫四原材料病毒的灭活试验研究

经鸽新城疫ND-GS O1四原材料病毒的最佳灭活时间,最佳灭活温度以及甲醛浓度的试验研究,确定了0.1%甲醛在37 ℃条件下经过16 h,70 ℃的温度条件下经过20 min灭活病毒为最佳灭活方法,不仅能有效的完全灭活ND病毒,而且能使病毒的血凝活性保持在94%以上.     

草原和农田几种主要鼠种数量动态研究及预测

2007年4～10月,在内蒙古呼和浩特郊区和锡林郭勒草原分别对长爪沙鼠、黑线仓鼠、五趾跳鼠和布氏田鼠进行了种群数量动态和预测研究.根据2007年实地调查数据,利用已经建立的预测模型,分别对上述4种鼠2008年的数量作出预测:预测2008年上述两地长爪沙鼠数量均不多,不致形成危害;黑线仓鼠2008年春季捕获率为0.97±0.48%～1.49±0.59%,秋季捕获率为0.52%,也不会形成危害;2007年五趾跳鼠捕获率0.06%,预测2008年该鼠数量也不多,不会造成危害;锡林郭勒草原2007年布氏田鼠年捕获率为1.67%,预测2008年布氏田鼠数量仍处在低谷期,不会形成大面积危害,但局部地方,如锡林浩特市郊的草场春季可能增多,应作好防治的准备工作.建议建立草原鼠类数量长期监测点,开展预测预报,在鼠的数量上升之前采取主动防治措施,把鼠密度长期控制在危害阈值之下,实现草原鼠害的持续控制.     

德美与中美〖HTSS〗（新疆型）〖HTH〗杂交后代体尺体重变化

德国美利奴是肉毛兼用细毛羊,原产德国,对于干旱地区有较好的适应性。该羊具有生长发育快、适应性强、产肉性能好和繁殖率高的特点。本次试验研究的主要内容是中国美利奴羊（新疆型）在导入德国肉用美利奴羊血液后,其后裔(周岁公羊)在体重体尺方面的变化情况。根据试验测得的数据,经统计分析结果表明：杂交一代与中国美利奴（新疆型）相比,在各阶段平均体重均得到提高,提高范围0.07~2.1 kg。杂交二代各阶段平均体重与中国美利奴（新疆型）相比,其提高幅度大于杂交一代。在体尺上杂交一代在胸深、胸围、胸宽、十字部宽上均表现了较高的杂交优势,在体尺大小上得到了很大提高。为体重增加、产肉性能的提高提供了良好的潜在条件。杂交二代在各体尺指标上没有增加（除前肢高）,同杂交一代相比具有降低趋势。所以杂交一代是我们需要的经济类型。引进德国美利奴有利于提高中国美利奴（新疆型）的产肉性能,它是提高新疆细毛羊毛肉综合性能较为理想的父本品种。     

基于荧光显色的环介导等温扩增技术(LAMP)检测禽呼肠孤病毒

建立了一种基于荧光显色的禽呼肠孤病毒(ARV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法.该检测方法使用针对ARV的p10基因8个区域的6条LAMP引物,能够在等温(63℃)条件下1h内完成反应,具有良好的敏感性和特异性,最低能够检出102个拷贝的病毒,敏感性比普通PCR高100倍,而对其他病毒检测结果为阴性.在荧光显色中分别应用SYBR Green Ⅰ和钙黄绿素作为显色剂,其结果与琼脂糖凝胶电泳一致.在对80份临床样本的检测中,使用LAMP和PCR检测出阳性样本的数量分别为68份和55份.因此,基于荧光显色的LAMP方法可以应用于ARV的快速检测,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力.