家蚕BmE(spl)-like基因的克隆与表达谱分析

从本实验室构建的家蚕蛹cDNA文库中筛选到一条新的cDNA序列,生物信息学分析发现其编码的蛋白质序列与果蝇Enhancer of split基因[E(spl)]编码的DNA结合转录调控因子bHLH(helix-loop-helix)有较高的同源性,将该基因命名为BmE(spl)-like(Bombyx mori Enhancer of split like)。该基因的ORF长606 bp,编码201个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量22.3 kD,等电点9.7。构建重组表达质粒pET-28a-BmE(spl)-like并在E.coli BL21(DE3)菌株中表达BmE(spl)-like蛋白,经亲和层析和FPLC反向柱纯化融合蛋白His-BmE(spl)-like并制备了抗体效价1∶25 600以上的多克隆抗体。用qRT-PCR方法检测BmE(spl)-like在家蚕成虫发育期的转录水平最高,结合果蝇同源基因的功能,推测该基因与蚕蛾的翅发育相关;该基因在家蚕5龄幼虫各组织中的转录水平以表皮最高,马氏管中最低。Western blotting检测BmE(spl)-like在家蚕5龄幼虫性腺中的表达水平最高,其次是丝腺、表皮、脂肪体、肠组织,在头部、马氏管和气管中的表达水平极低,与qRT-PCR检测的BmE(spl)-like在各组织中的转录水平有些差异。     

桂花开放与衰老过程中花瓣蛋白酶活性与种类的变化

 以自然栽培条件下的桂花（Osmanthus fragrans）品种‘柳叶金桂’花瓣为试材,对其铃梗期、初花期、盛花期、盛花末期和萎蔫期的可溶性蛋白质和游离氨基酸含量及蛋白酶的活性和种类变化进行了检测。结果表明,伴随开花进程,花瓣可溶性蛋白质含量先增后减,游离氨基酸含量则持续上升37 ℃,最适pH为8.0;分光光度计法及底物胶电泳法检测时均发现,桂花开花与衰老过程中,花瓣总蛋白酶活性持续上升,在盛花末期达到峰值,至萎蔫期迅速下降;利用专一性酶抑制剂检测到花瓣衰老过程中的丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶和金属蛋白酶3种蛋白酶,其中丝氨酸蛋白酶活性最强,约占总活性的65% ~ 75%;花瓣蛋白酶检测的最适温度为,是影响桂花花瓣衰老最主要的蛋白酶。     

东西方蜜蜂生境重叠导致的新病原扩散

蜜蜂病害的流行与频发是近年来全球蜜蜂饲养蜂群非正常丢失的主要原因。全球化的蜜蜂贸易和迁徙性的养蜂生产使得地区性蜜蜂病害得以快速扩散与传播。分布范围不断扩大的西方蜜蜂(Apismellifera)在对本土蜜蜂资源造成破坏的同时,因生境重叠导致的新病原交叉感染也作用于西方蜜蜂种群。人为地干扰蜂种间历史形成的区域性分布,将间接导致原有生态系统的崩溃。同时将放大地区性病害的威胁,不可避免地会加深对现代脆弱的蜜蜂养殖业的伤害。     

强化科研管理 提高农业科技创新能力

通过认真分析"十一五"以来天津市农业科学院在科研上取得的主要成绩,总结了农业科研单位在科研管理中采取的措施,说明了农业科研管理对科技创新的促进作用。     

川西亚高山区域的水源涵养功能变化趋势

[目的]揭示川西亚高山区水源涵养功能的变化趋势,为明确该区的水源涵养动态特征提供科学依据.[方法]以岷江上游的杂谷脑河流域为例,根据杂谷脑河流域出口处的历年降水、气温和水沙资料,应用水量平衡原理,研究该流域水源涵养能力的变化特征.[结果]①研究区径流量呈明显减少趋势,平均每年减少2.83 mm,即水源涵养量平均每年提升...     

氮,磷,钾,硅肥配施对大青杨一年生苗干物质及苗木等级影响的研究

本文采用416D饱和最优回归设计在砂壤质冲积土设置田间试验。回归分析和频率分析的结果表明,大青杨优质高产的综合施肥方案为N:16.46g/m~2,P_2O_5:3.24g/m~2,K_2O:17.0g/m~2,沸石:31.61g/m~2。     

基于耕地质量评价与空间集聚特征的基本农田划定研究

综合考虑耕地的自然质量、耕作条件、形态、空间分布等,以济南市为研究区,从自然禀赋、区位条件和稳定性3个方面选取11个指标,构建耕地质量综合评价指标体系,在耕地质量综合评价的基础上,采用局部空间自相关法定量刻画耕地质量的空间集聚格局特征,采用矩阵组合法进一步将耕地质量等级和空间集聚格局类型两两组合,综合确定基本农田划定类型。研究表明,济南市耕地区位条件较好,且区域差异最小,耕地稳定性和自然禀赋相对较差。济南市耕地质量以高和较高为主,二者分别占济南市耕地总面积的35. 12%和22. 67%,主要分布在济南市北部商河、济阳和章丘北部。耕地质量低等级的耕地面积最少,为475. 98 km~2,所占比例为11. 98%,主要分布在历城和长清。济南市耕地划分为优先划入型、适宜划入型和整治调控型3种类型。济阳、商河、章丘北部和平阴东南部的耕地质量高、集聚特征显著,应作为优先划入型,该类型耕地最多,面积为2 121. 23 km~2,占济南市耕地总面积的53. 38%;适宜划入型耕地质量也较高,并且多分布在优先划入型周边,对优先划入型耕地具有保护和缓冲作用,应与优先划入型耕地一起作为基本农田,以提高优质基本农田的集聚程度;整治调控型耕地面积为988. 98 km~2,占济南市耕地总面积的24. 89%,主要分布在中心城区和南部山区,该类型耕地质量低、集聚程度不高,开发利用时应注意生态环境保护,必要时可通过土地整治提高质量和集聚程度。     

黄瓜花叶病毒(CMV)2个山西分离物CP序列测定及亚组分类分析

 在生物学检测的基础上,利用酶联免疫检测、非序列依赖性PCR(sequence-independent amp-lification, SIA)对感病番茄进行分子鉴定,表现卷叶和花叶症状的番茄均被黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)侵染,分离物分别命名为SXFQ(GenBank登录号为JX993914)和FQ(GenBank登录号为JX993912)。为明确其分类地位,对二者外壳蛋白(coat protein, CP)进行克隆和测序分析。应用DNAMAN软件对本课题组前期检测的7个CMV山西分离物、SXFQ、FQ以及其他3个CMV典型分离物CP序列进行比较分析,发现核苷酸和氨基酸序列最大相似性分别为77.1%~100%和81.6%~100%。氨基酸序列系统进化分析表明,9个CMV山西分离物属于CMV亚组I B的2个分支,其中在指示植物上表现较强症状的SXFQ与其他5个分离物为一分支,在指示植物上表现较弱症状的FQ与其他2个分离物为另一分支。对9个山西分离物CP进行亚组分类分析,结果表明其理化性质、稳定性、疏水性与预测结果相近,2个分支的分离物分别出现相近的氨基酸变异和蛋白结构,存在一定规律性。     

Diagnostic real-time PCR assay for the quantitative detection of Theileria equi from equine blood samples

We developed a TaqMan real-time polymerase chain reaction (PCR) assay for the quantitative detection of Theileria equi from the in vitro-cultured parasite and field blood samples collected from horses living in Ghana and Brazil. The detection limit for the assay was determined to be 1.5 parasites/microl per sample, and the quantitative capacity was demonstrated using the in vitro-cultured parasite. For field applications, the real-time PCR assay was compared to a previously established nested PCR assay used as the gold standard for the real-time PCR assay. Of 65 field blood samples, 46 samples were T. equi-positive in the nested PCR assay, while the real-time PCR assay also detected the parasite in all 46 of the nested PCR-positive samples but did not detect T. equi in the remaining 19 negative blood samples. This quantitative real-time PCR assay provides a valuable tool for fast laboratory diagnostic assessment of T. equi infection in horses.     

Detection of DNA closely related to 'Candidatus Rickettsia principis' in Haemaphysalis danieli recovered from cattle in Xinjiang Uygur Autonomous Region Area, China

Tick DNA samples from cattle in Xinjiang Uygur Autonomous Region Area, China, were examined for Rickettsia infection by citrate synthase gene-based PCR and sequencing. Four positive samples were detected from Haemaphysalis danieli and high levels of similarity were found with recently detected 'Candidatus Rickettsia principis.'