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101.
102.
旨在构建表达猪圆环病毒2型(PCV2)cap蛋白的重组罗伊氏乳酸杆菌(Lactobacillus reuteri,L.reuteri),并评价其在小鼠体内诱导的免疫应答效果。利用PCR扩增实验室分离保存的PCV2b型毒株的cap蛋白基因,以猪源L.reuteri为宿主菌,构建表达cap蛋白的重组菌株pPG-T7 g10-PPT-cap/L.reuteri,通过口服免疫BALB/c小鼠。采用间接ELISA方法测定免疫后小鼠血清中抗原特异性IgG抗体水平,粪便、鼻腔洗液、生殖道洗液、肠黏液中抗原特异性sIgA抗体水平,小鼠血清中各细胞因子水平;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖水平;流式细胞技术检测小鼠脾淋巴细胞中CD4+T细胞、CD8+T细胞的水平;荧光定量PCR检测免疫后攻毒的小鼠体内器官的病毒载量。结果显示,口服免疫重组乳酸菌组小鼠血清IgG抗体水平显著高于对照组(P<0.01);小鼠粪便、鼻腔洗液、生殖道洗液、肠黏液中sIgA抗体水平显著高于对照组(P<0.01);小鼠血清中细胞因子水平和对照组相比,IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-12水平升高,IL-10水平降低,IFN-α无显著变化;体外孵育PCV2和小鼠脾淋巴细胞结果表明,重组乳酸菌组小鼠脾淋巴细胞增殖刺激指数显著高于对照组(P<0.01);流式细胞技术检测结果显示,口服免疫重组乳酸菌组小鼠脾细胞中CD4+T细胞、CD8+T细胞含量高于对照组;荧光定量PCR结果显示,相比于对照组,口服免疫重组乳酸菌组小鼠体内的病毒载量明显低于对照组。综上所述,本研究成功构建了表达PCV2 cap蛋白的重组罗伊氏乳酸杆菌,经口服途径免疫动物,构建的重组乳酸杆菌能够刺激小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答,且具有一定的免疫保护效果。 相似文献
103.
选取W1-2、W1-3、W4-2、W13-4、W17-1、W28-2、W33-3这7个转胡杨(Populus euphratica)PeDREB2b基因白三叶(Trifolium repens)株系为试材,以非转基因白三叶海发为对照,测定了植株的形态特征和永久萎蔫率,以及在不同时间、不同浓度PEG模拟干旱胁迫下的叶片相对含水量、相对电导率和丙二醛含量的变化,旨在评价转基因白三叶株系的抗旱能力。结果表明:1)部分转基因白三叶株系的叶形、叶色、叶片斑纹及叶片大小发生了较明显的变化;2)转基因株系W1-3、W28-2永久萎蔫率明显低于对照,且能维持较长时间的正常生长,表现出一定的抗旱性;3)随着模拟干旱胁迫程度的增加及时间的延长,参试材料的叶片相对含水量呈不同程度下降的趋势,叶片相对电导率、丙二醛含量均有不同程度升高。但转基因株系W1-3、W28-2的叶片相对含水量始终保持较高水平,未出现较大波动,且株系W1-3的相对电导率、丙二醛含量始终保持较低水平,变化较小。综合分析表明,7个转基因白三叶株系的抗旱性强弱依次为W1-3W33-3W28-2W1-2W13-4W17-1W4-2,均优于对照白三叶海发品种。 相似文献
104.
中药制剂产后康复宁的药理研究 总被引:2,自引:0,他引:2
应用LMS-2B二道生理记录仪及配套装置,通过免疫器官重量法和鸡红细胞(CRBC)作免疫原的溶血素(IgM)测定法及体内抑菌试验法,观测了中药制剂产后康复宁对家兔离体、在位子宫和小鼠免疫功能的影响,以及对感染大肠杆菌K88小鼠的保护作用。结果表明,产后康复宁可使兔离体子宫收缩频率显著增加(P<0.01),张力显著增强(P<0.01),振幅显著增高(P<0.01);与麦角相比,仅5min相同时间的子宫收缩频率差异明显(P<0.05),其余相同时间子宫收缩频率、张力、振幅均无明显差异(P>0.05)。使在位子宫收缩频率明显增加(P<0.05),张力明显增强(P<0.05),振幅明显增高(P<0.05);与麦角比较,子宫收缩频率、张力、振幅在5、10min相同时间内差异均不明显(P>0.05)。对免疫功能的影响,不但使小鼠脾脏显著增重(P<0.01),而且溶血素明显增多(P<0.05)。对感染大肠杆菌K88的小鼠有明显的保护作用(P<0.05)。提示产后康复宁有增强子宫收缩,促使宫内恶露排除,加速子宫复旧,增强机体免疫功能等作用。 相似文献
105.
106.
107.
108.
109.
为体外表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白GP5,以及制备其多克隆抗体,以PRRSV PC疫苗株RNA为模板,应用RT-PCR扩增GP5基因,并克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达载体pET-32a-GP5。经过酶切和测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,加入IPTG低温诱导表达。使用亲和层析法纯化PRRSV GP5蛋白。然后将纯化的蛋白免疫北京大耳白兔制备多克隆抗体,并进行酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光分析(IFA)。结果显示,表达的PRRSV GP5原核蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在,相对分子质量大约30 kDa;制备的GP5蛋白多克隆抗体ELISA效价可达1:64 000;IFA检测显示,制备的多克隆抗体能够识别PRRSV。重组PRRSV GP5蛋白及其多克隆抗体的成功制备为PRRSV血清学检测方法的建立提供了良好的生物学材料。 相似文献
110.
Papazoglou LG Mann FA Wagner-Mann C Song KJ 《Journal of the American Animal Hospital Association》2008,44(2):67-74
Fifteen dogs with extrahepatic biliary tract disease underwent cholecystoenterostomy. Long-term survivors were significantly older at presentation (mean age 140.5 months) than dogs that survived the first 20 days after surgery but subsequently died from causes related to the surgery or hepatobiliary disease (mean age 72 months). Dogs that died during the first 20 days had significantly more complications in the hospital than dogs that survived this period. The type of underlying hepatobiliary disease (i.e., benign or malignant) was not associated with either short-term outcome or long-term survival. Eight dogs died from causes related to surgery or hepatobiliary disease. Long-term complications included hepatic abscesses, acquired portosystemic shunts, pancreatitis, and vomiting. 相似文献