小尾寒羊产后子宫内细菌类型和数量的研究

通过子宫内膜活检采样器得到子宫腔内液,应用细菌分离培养鉴定技术,研究10只小尾寒羊产后不同时期子宫内细菌的种类和数量的变化规律。结果发现:在产后1~25 d,小尾寒羊子宫腔内存在4个属的细菌,这些细菌是以芽孢杆菌属、葡萄球菌属、微球菌属为主的革兰氏阳性菌和以大肠杆菌群为主的革兰氏阴性菌等。产后子宫细菌数量和种类随着子宫内环境的改变而有规律地变化:从无菌状态增加到最高点约7 d左右,而下降比较缓慢,到子宫颈管复旧完成(22 d)后,才接近于无菌状态。产后子宫内一定数量的细菌对子宫复旧无显著影响。     

金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺上皮细胞Wnt/β-catenin信号通路和相关修复因子的影响

采用金黄色葡萄球菌侵袭原代奶牛乳腺上皮细胞,观察该病原菌对乳腺上皮细胞Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白和相关修复因子EGFR、TGF-β3和VEGF基因mRNA表达的影响。金黄色葡萄球菌以MOI=1∶1的比例接种奶牛乳腺上皮细胞,分别作用0,15,30,45,60,120,240 min,采用Western blot法检测乳腺上皮细胞β-catenin、Cyclin D1及c-Myc蛋白表达水平;免疫荧光法检测β-catenin的表达及核易位;荧光定量PCR检测EGFR、TGF-β3和VEGF基因mRNA表达。结果显示,β-catenin蛋白在45,60,120 min表达量升高,与0 min相比差异显著(P<0.05);Cyclin D1蛋白在45,60,120和240 min表达量升高,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01);c-Myc蛋白在15,30,60,120,240 min表达量升高,差异极显著(P<0.01)。修复相关因子EGFR、TGF-β3和VEGF基因mRNA的表达量在30 min均出现极显著升高(P<0.01),且VEGF基因mRNA在45,60,120和240 min均呈现极显著升高(P<0.01),EGFR基因mRNA表达量在30,45和60 min时表达量极显著升高(P<0.01)。结果表明,金黄色葡萄球菌侵袭奶牛乳腺上皮细胞后,诱导Wnt/β-catenin信号通路的转导和修复因子EGFR、TGF-β3和VEGF基因转录,该信号通路和修复因子可能参与金黄色葡萄球菌导致的炎症和细胞损伤的修复过程。     

饲粮中添加牛至精油对绵羊复胃发育、消化酶活性及瘤胃微生物区系的影响

本试验旨在研究饲粮中添加牛至精油对绵羊复胃发育、消化酶活性及瘤胃微生物区系的影响。选取18只体重相近[(20.30±1.27) kg]、体况良好的3月龄萨福克×小尾寒羊F1代公羔,随机分为3组(每组6只):对照组(CON组)饲喂基础饲粮,牛至精油组饲喂在基础饲粮基础上分别添加4(EO4组)和7 g/d(EO7组)牛至精油的试验饲粮,预试期10 d,正试期72 d。结果显示:1)绵羊瘤胃容积随饲粮中牛至精油添加量的增加显著增大(P<0.05),与CON组相比,EO7组瘤胃容积指数提高了2. 09%(P <0. 05),皱胃容积指数降低了1. 61%(P <0. 05)。2)与CON组相比,EO4组瘤胃中纤维素酶和胃蛋白酶活性显著升高(P<0.05),皱胃中纤维素酶和β-葡萄糖苷酶活性显著升高(P<0.05); EO7组瘤胃、网胃中纤维素酶、β-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶活性显著升高(P<0.05),瓣胃中纤维素酶和皱胃中胃蛋白酶活性显著升高(P<0.05)。3)饲粮添加4和7 g/d牛至精油均显著降低了瘤胃中原虫数量(P<0.05);与CON组相比,EO4组瘤胃中黄色瘤胃球菌数量显著升高(P<0.05); EO7组瘤胃中真菌、黄色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌和产琥珀酸丝状杆菌数量均显著升高(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加牛至精油能促进瘤胃发育及瘤胃中真菌和纤维分解菌的增殖,抑制原虫的生长,提高瘤胃消化酶活性,且以7 g/d的添加量效果较好。     

牛至精油和莫能菌素对荷斯坦犊牛瘤胃发酵参数和菌群结构的影响

本试验旨在研究牛至精油和莫能菌素对荷斯坦犊牛瘤胃发酵参数和菌群结构的影响。试验选用了80头新生荷斯坦犊牛,体重(41.31±2.23)kg,随机分为4组,每组20头。牛至精油组开食料中添加4.0 g/kg牛至精油,莫能菌素组开食料中添加3.6 g/kg莫能菌素,混合组开食料中添加4.0 g/kg牛至精油+3.6 g/kg莫能菌素,对照组开食料中不添加任何饲料添加剂。饲喂70 d后,从每组中选取体重相近的试验牛3头,采集12头犊牛的瘤胃液,检测瘤胃发酵参数,并运用高通量测序方法测定瘤胃菌群结构及多样性。结果表明:1)莫能菌素组和混合组的瘤胃液氨态氮含量显著低于对照组(P<0.05);莫能菌素组的瘤胃液丙酸比例显著高于对照组(P<0.05)。2)门水平上,牛至精油组、莫能菌素组、混合组的瘤胃液中变形菌门的相对丰度极显著低于对照组(P<0.01);莫能菌素组的瘤胃液中拟杆菌门的相对丰度有高于对照组的趋势(0.05≤P<0.10)。3)属水平上,牛至精油组、莫能菌素组和混合组的瘤胃液中普雷沃氏菌属的相对丰度有高于对照组的趋势(0.05≤P<0.10);牛至精油组的瘤胃液中丁酸弧菌属的相对丰度有低于对照组的趋势(0.05≤P<0.10);莫能菌素组的瘤胃液中奥尔森菌属的相对丰度显著低于对照组(P<0.05),瘤胃球菌属和丁酸弧菌属的相对丰度均有低于对照组的趋势(0.05≤P<0.10);混合组的瘤胃液中梭菌属的相对丰度有低于对照组的趋势(0.05≤P<0.10)。综上所述,饲粮中添加牛至精油可以调节瘤胃微生物的菌群结构,提高犊牛瘤胃中蛋白质降解菌的相对丰度,降低产丁酸菌属的相对丰度,同时可能避免或者缓冲莫能菌素对有益菌群的破坏。     

家兔Zfx基因shRNA干扰载体构建及验证

研究主要是为了构建出针对家兔Zfx基因的shRNA重组载体及效果验证。根据家兔Zfx基因mRNA序列特征,设计出3条shRNA片段,再与线性化的pLL 3.7载体进行连接重组,最后经过qRT-PCR检测Zfx基因mRNA表达量筛选出有效重组表达载体并通过体内试验进行效果验证。结果表明:试验组shRNA-c和shRNA-f干扰效率分别为74%和67%,与空白对照组相比差异极显著(P<0.01);试验组shRNA-e干扰效果为17%,与空白对照组相比差异不显著(P>0.05)。用shRNA-c和shRNA-f进行体内试验,结果显示,两试验组雄性率分别为44.92%(P>0.05)和33.16%(P<0.01)。本试验成功构建针对家兔Zfx基因的重组载体,体内试验显示子一代出现性别偏移,说明Zfx基因对动物的性别决定有一定作用,关于导致体内验证出现反转的原因仍需进一步验证。     

Radiosensitivity of canine osteosarcoma cells transfected with wild‐type p53 in vitro*

The p53 gene is one of the important tumour suppressor genes that are involved with the cell survival signal pathway. One of the major functions of the p53 protein is to organize cell cycle regulation and induction of apoptosis for cellular genetic stability. It has been documented that more than 50% of all human cancers include a p53 mutation. We evaluated the difference in radiosensitivity between upregulating the expression of canine wild‐type p53 (cp53) in cultured osteosarcoma (D17) cells and naive D17 cells in vitro. We found that upregulating transfected cp53 D17 cells increased their radiation sensitivity in vitro, and there was a significant decrease (P < 0.009) in survival between cp53‐transfected D17 cells and naive D17 cells. In this experiment, a p53 enhancement ratio (p53ER) reached approximately 3.0 at high doses. The transfected cp53 D17 cells were significantly more radiosensitive at all doses evaluated than naive D17 cells, except at 1 Gy where too few data points were available. The p53ER increased rapidly at doses less than 4 Gy, achieving a maximum of about 3.0 for doses of 4 Gy and above. This study shows the enhanced radiosensitivity of the transfected p53 at clinically relevant doses.     

彭水县野生药用蜜粉源植物资源

位于重庆市东南部的彭水县因亚热带湿润季风气候使其生物资源丰富,种类繁多。对彭水县蜜粉源植物调查发现150余种蜜粉源植物,其中野生具有药用价值的99种,隶属于49科,84属。重要的药用蜜粉源植物有盐肤木(Rhus chinensis Mill.)、川莓(Rubus setchuenensis Bureau et Franch.)、川续断(Dipsacus asperoides C. Y. Cheng et T. M.Ai)、大叶醉鱼草(Buddleja davidii Franch.)等。     

中蜂对不同蜂花粉的取食偏好

以来自不同地区的10个蜂花粉,在云南及重庆两地的缺粉季节饲喂中蜂蜂群,探索中蜂对花粉取食的偏好。研究结果显示中蜂蜂群对来自不同地方不同种类的花粉有选择偏好性,对同种花粉选择差异性不显著,发现中蜂对所用的山东茶花粉的取食量最大。     

复合益生菌对早期断奶仔猪生长性能和体液免疫水平的影响研究

为研究枯草芽胞杆菌、酵母菌和乳酸菌三者组合的复合益生菌对早期断奶仔猪生长性能和体液免疫水平的影响,选取"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪40头,分为对照组、试验A组、试验B组和试验C组,每组10头,试验A组、试验B组和试验C组与基础饲粮按质量比分别添加1.0‰、2.0‰和3.0‰复合益生菌,对照组不添加复合益生菌,以评价复合益生菌对早期断奶仔猪生长性能、免疫器官指数、血液生理指标和血清生化指标的影响。结果表明,试验B组和试验C组末重极显著高于试验A组和对照组(P<0.01),试验C组平均日增重极显著高于试验A组、试验B组和对照组(P<0.01),对照组和试验B组腹泻率极显著高于试验A组和试验C组(P<0.01);在免疫器官指数上,试验B组、试验C组和对照组腹股沟淋巴结指数显著高于试验A组(P<0.05),试验A组、试验B组脾脏指数显著高于试验C组(P<0.05),试验各组肾脏指数均显著高于对照组(P<0.05),试验A组胸腺指数显著高于试验B组和试验C组(P<0.05);在生理水平上,试验组仔猪血液中,中间粒细胞比率、粒细胞比率、中间细胞数量、粒细胞数量、红细胞数量、血红蛋白、红细胞平均体积以及血小板数量低于对照组,且大部分指标表现为差异显著(P<0.05),淋巴细胞比率高于对照组,但差异不显著(P>0.05);在生化水平上,试验B组和试验C组谷草转氨酶含量显著高于对照组和试验A组(P<0.05)。试验结果表明,枯草芽胞杆菌、酵母菌、乳酸菌三者组合的复合益生菌与基础饲粮混合可提高早期断奶仔猪生长性能和体液免疫功能。     

高分辨四极杆飞行时间质谱仪判别复原乳和超高温灭菌乳

采用高分辨四极杆飞行时间质谱仪,结合化学计量学方法,利用非靶向代谢组学方法,对超高温灭菌乳和复原乳进行检测。牛乳样品经过前处理后,经过C18色谱柱分离,采用FullScan模式进行一级全扫描,扫描结果通过数据预处理后,导入SIMCA-P14.1软件中进行主成分分析和偏最小二乘方差判别分析。结果表明:正、负离子模式下共找到14种判别超高温灭菌乳和复原乳的表征因子,进一步通过这14种表征因子建立区分2种乳的判别模型,通过该判别模型能够准确地区分超高温灭菌乳和复原乳,为复原乳的判别提供理论依据。