鸡白介素18成熟蛋白的发酵工艺及其对新城疫疫苗的免疫增强作用

为探讨重组鸡白介素18（mChIL-18）毕赤酵母工程菌在5L发酵罐中大规模发酵的工艺及其对新城疫疫苗的免疫增强作用,复苏工程菌GS115/pPIC9K-mChIL-18于YPD培养基,在其D600值达到5.2左右时转入发酵罐中,采用分批补料方式对毕赤酵母工程菌进行高密度发酵。控制和优化各种发酵条件,经历84h结束发酵。将发酵液离心,用6×His镍柱对上清中的表达产物进行纯化,并将纯化后的mChIL-18用脂质体包被后和新城疫疫苗一起对鸡群免疫。结果显示,毕赤酵母工程菌在5L发酵罐采用甲醇诱导补料批式发酵,在pH5.5,溶氧值20%～30%,温度28℃,诱导72h,mChIL-18的表达产量为560mg/L,发酵上清经纯化后纯度可达70%以上;用0.2mL的mChIL-18脂质体能够显著增强机体的免疫力,其中HI抗体效价和淋巴细胞亚群CD4＋、CD8＋含量均显著高于对照组。这表明mChIL-18毕赤酵母工程菌在5L发酵罐高密度发酵成功,并能显著增强新城疫疫苗的免疫效果,为IL-18在生产实践得到更好的应用奠定了基础。     

伊犁绢蒿荒漠草地围封后的土壤动态

本研究对伊犁绢蒿(Seriphidium transiliense)荒漠草地的土壤理化性质及光谱进行测定,探讨围封对土壤理化性质的影响和草地光谱的响应。结果表明,土壤含水量在各土层随植物生长期呈递减趋势,5月与9月土壤含水量随围封年限的延长总体上呈增加趋势,并对群落光谱和土壤含水量间关系进行建模,R2=0.63;土壤有机质随封育年限增加呈升-降-升的趋势,围栏内外有机质差值在5月随封育年限的增加而增加,封育7年、10年草地有机质差值,植物生长期内呈线性递减。通过室内土壤光谱及野外裸地光谱对土壤有机质进行建模,均取得较好效果,R2分别为0.64与0.38。研究表明,草地土壤含水量及有机质对于草地恢复状况较为敏感,可用于该类草地封育状况的监测。     

高效液相色谱-串联质谱法检测猪尿中四种β-受体激动剂残留的研究

建立了猪尿中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和西马特罗残留检测的高效液相色谱-串联质谱方法(HPLC-MS/MS).液相色谱条件为色谱柱为XBridge C18柱(150 mm×2.1 mm,5 μm);流动相为0.1%甲酸甲醇溶液 0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;柱温为30 ℃;流速为0.2 mL/min;进样量为20 μL.质谱条件为电喷雾离子源(ESI ),多反应监测(MRM)方式进行采集;同位素内标法定量.结果表明,四种β-受体激动剂在1～50 ng/mL浓度范围内呈现良好的线性关系,相关指数R2均大于0.998;方法检测限为0.3 ng/mL,定量限为0.5 ng/mL;从0.5、1和2 ng/mL 3个添加浓度检测结果可以看出,方法平均回收率为86.6%～110%,批内RSD为1.1%～8.4%,批间RSD为2.0%～6.2%.     

糖原合成酶激酶3β对奶牛乳腺上皮细胞增殖及细胞周期的影响

本试验通过向纯化的奶牛乳腺上皮细胞中添加不同浓度（0（对照组）、10、20、40 mmol/L）的糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase 3β,GSK3β）特异性蛋白抑制剂氯化锂（Licl）,作用细胞24 h,研究其对奶牛乳腺上皮细胞增殖及细胞周期的影响,并利用qRT-PCR和Western blotting分别检测不同浓度Licl对奶牛乳腺上皮细胞中GSK3β、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1） mRNA水平及GSK3β、磷酸化GSK3β （p-GSK3β）、Cyclin D1蛋白水平表达的影响。结果显示,Licl能促进奶牛乳腺上皮细胞的增殖活性,Licl抑制GSK3β后促进奶牛乳腺上皮细胞增殖的最佳浓度为20 mmol/L。与对照组相比,添加Licl后GSK3β蛋白表达受到抑制,p-GSK3β蛋白表达上调,同时提高了Cyclin D1蛋白表达。表明GSK3β对于奶牛乳腺上皮细胞增殖的能力是负调控因子,失活的GSK3β通过Cyclin D1途径促进细胞周期的进行。     

叶绿素荧光技术在筛选光合突变体中的应用

叶绿素荧光技术作为光合作用研究的手段,在光合突变体筛选中起到了重要作用。使用该技术,大量光合突变体得以分离,并且随着分子生物学的进展,突变基因也被陆续克隆,同时利用这一技术的筛选方法也随着人们对光合作用机制认识的深入,不断得到了改进,本研究就这方面进展做以综述。     

延胡索及其不同配伍镇痛作用研究

延胡索系罂粟科紫堇属多年生草本植物延胡索（Corydalia yanhusuo W．T.Wang）的块茎,《本草纲目》曰：“延胡索能行血中气滞，气中血滞,故专治一身上下诸痛,用之中的,妙不可言，盖延胡索活血化气,第一品药也”，现代药理研究证明延胡索具有较好的镇痛作用,其强度为阿片的1／100。临床上延胡索常与其它药物配伍治疗各种疼痛,血瘀气滞所致疼痛配伍川芎,阳明头痛配伍白芷,风湿痹阻配伍当归。笔者采用热板法和扭体法，观察延胡索、延胡索配伍川芎、延胡索配伍白芷、延胡索配伍当归的镇痛作用,为中医的临床用药提供实验依据。     

对德国畜牧业运行模式的认识与思考

通过对德国下萨克森州等的畜牧业及农产品加工企业的实地考察,对德国畜牧业的组织形式、运作方式、技术现状与农牧结合现状有了较深刻的认识．为探讨我国未来畜牧业发展方向提供参考。     

猪场生物安全体系中十个通道的设计应用

2018年8月开始,非洲猪瘟在我国快速多点发生,该病是高度接触性传染性疾病,目前无有效的疫苗和药物控制,各大公司和养殖户开始了猪场生物安全体系的升级改造。两年后我国大部分猪场的成功复产,全国生猪出栏量的大幅提升,证明了生物安全措施巨大效力;同时在严格的生物安全措施下创新了精准剔除、快速复产等操作,进一步证明了生物安全措施的有效作用。文章主要介绍猪场生物安全体系中入口(大门)和出口(后门)最为关键防线处的通道设计,方便所有的生物安全操作能够高效落实,切断病原轻易进出猪场的途径。     

雏鸡感染传染性法氏囊病病毒后血浆肿瘤坏死因子-α和花生四烯酸代谢物的动态变化

选取经传染性法氏囊病病毒(IBDV)弱毒苗免疫和未免疫的AA 鸡120 羽,研究了感染IBDV 强毒后血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和花生四烯酸代谢物水平的动态变化及相互关系。结果表明,攻毒后第1 天,未免疫攻毒鸡(A 组)血浆TNF-α即表现较大的变化,至第3 天,A 组和免疫攻毒鸡(B组)TNF-α显著高于未免疫未攻毒鸡(C组),至第5 天3 个组虽均下降,但A 组仍高于或明显高于B、C组,以后3 组间无明显差异;攻毒后的3～5 d,A 组血浆前列腺素E(PGE2 )上升或明显上升,高于或明显高于B、C组,B组虽也见上升但与C组无明显差异,5 d 后3 组均下降,同期各组相比无明显差异;血栓素B2 (TXB2 )除在攻毒后第3 天C组明显高于A、B组以及攻毒前水平外,其他时间各组间无显著差异;A、B组的6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)在攻毒后头5 d 内升高,但组间无差异。分析3 组TNF-α与几种花生四烯酸代谢物水平间的相关性发现,仅A 组的TNF-α分别与PGE2 、TXB2 和6-keto-PGF1α呈显著正相关。