血管内皮细胞粘附分子及中药对其表达的调节

细胞粘附分子（cell adhesion molecules．CAMs）是指参与细胞与细胞、细胞与基质之间粘附．影响和调节细胞与其周围环境之间反应的细胞因子。它们在细胞的生长发育、炎症反应、免疫应答、血栓形成、组织修复以及肿瘤的转移等生理病理过程中发挥着重要作用。目前已发现的粘附分子可以分为五类：免疫球蛋白超家族（immunoglobulin guper family，ISF）、选择索家族（seleetin family，SF）、整合素家族（integrin family．IF）、钙粘合素家族（cadhefin family．CF）和归巢受体（homing receptor）。     

禽呼肠病毒P10、P17非结构蛋白基因的克隆及序列分析

根据GenBank上的禽呼肠病毒(ARV)S1基因序列,设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物,对13个ARV毒株进行RT-PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示,13个ARV毒株的P10蛋白基因ORF全长均为297bp,编码98个氨基酸;P17蛋白基因ORF全长为441bp,编码146个氨基酸。这13个ARV毒株P10、P17蛋白基因核苷酸同源性分别在96.6%~100%和95.2%~99.3%之间,推导的氨基酸同源性分别在98.2%~100%和91.9%~99.0%之间。将这13个ARV毒株与GenBank上其他正呼肠病毒毒株,包括番鸭株(DRV)和飞狐上分离到的内尔森海湾病毒(NelsonBayvirus,NBV)及两个澳洲分离株(ARM-1和SOM-4)进行同源性比较和遗传进化树分析,结果表明,呼肠病毒有地域和种类的差别。     

H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立

采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒（AIV）A／Goose／HLJ／p46／2003（H5N1）的NSl基因，将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上，转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞，经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析，表明筛选到了重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE电泳结果显示，重组质粒转化TB1大肠埃希氏菌后，经0．3mmol／L的IPTG诱导，融合蛋白MBP-NS1得到大量表达，融合蛋白以可溶形式存在，分子质量约为67ku。Western-blotting检测结果表明，融合蛋白MBP-NS1能够与H5N1亚型AIV活病毒感染康复鸭血清发生特异性反应，而不能够与H5N1亚型AIV灭活疫苗免疫鸭血清发生反应。试验初步建立了以纯化的融合蛋白MBP-NS1为包被抗原的间接ELISA检测方法，为AIV灭活疫苗免疫家禽与AIV感染家禽的鉴别诊断奠定了基础。     

猪水泡病病毒结构蛋白基因的克隆及其蛋白二级结构和淋巴细胞表位的预测

以免疫信息学和反向疫苗学为理论根据，利用RT-PCR法获得了猪水泡病病毒（SVDV）HK／70株的基因组序列并测序，应用生物信息学相关软件和方法，对SVDV结构蛋白的二级结构的不同方面及其抗原特异性淋巴细胞表位进行了预测，综合评价了SVDV结构蛋白的抗原特异性细胞表位，并计算出一些潜在的抗原位点。结果表明，VP1蛋白含有的细胞优势抗原表位最多，但其他结构蛋白也含有抗原特异性淋巴细胞表位，有的甚至有可能成为优势抗原表位或对优势抗原表位有协同作用。     

重视粮食转化发展绿色肉牛产销供应链

1995年-1998年中国连续4年粮食丰收，1999-2001年中国粮食连续3年减产，但粮食库存仍然较多。并不能够扭转转收带来的供大于求的局面，预计2002年粮食增产1.1%，在短期内粮食供给大于需求的买方市场态势不会改变，因此，应充分利用当前时机，调整产业结构，发展肉牛生产，促进农业结构调整是提高农民收入的重要途径。文中还分析了欧盟，日本，韩国等国疫情风波及其原因，提出了中国发展绿色肉牛产销供应链的若干对策。     

桑树省力化全年条桑收获法的研究

全年条桑收获留干 0 4～ 0 .6m ,一留多年 ,且全年收获条桑。经过小区近 10年的试验及几年的农村示范表明 ,该收获法的收获工效比收获叶片提高 2倍以上 ,小区 9年平均产量比传统的冬根刈收获法增长 9 7个百分点 ,条桑饲养大蚕成绩明显比片叶饲养好。留干几年后根刈 ,桑树的再生长不受影响     

可定点整合的无筛选标记LacS基因表达载体的构建与鉴定

试验旨在构建一个能够定点整合且无筛选标记基因的半乳糖苷酶基因LacS表达载体.本研究以pEGFP-N1质粒为原始框架,通过PCR及限制性酶切位点在pEGFP-N1质粒的标记基因两端添加两个同向LoxP序列,在多克隆位点上游添加能够定点整合的attB序列,最后再将目的基因BC promoter-LacS-PolyA通过限制性酶切位点插入多克隆位点.每一步都进行PCR、酶切及测序鉴定.PCR产物及酶切片段大小符合预期结果,测序结果也与相应寡核苷酸序列一致,证明各个基因片段正确地连接到载体相应位置.本试验成功构建了可定点整合的无筛选标记半乳糖苷酶基因表达载体pEGFP-N1-LacS.     

Determination of reference intervals for metabolic profile of Hanwoo cows at early,middle and late gestation periods

Background

Metabolic profile was initially designed as a presymptomatic diagnostic aid based on statistical analyses of blood metabolites to provide an early warning of certain types of metabolic disorder. However, there is little metabolic profile data available about Korean Hanwoo cows. Therefore, this study aimed to determine the reference intervals of metabolic profile for Korean Hanwoo cows.

Methods

Healthy animals (2,205) were selected and divided into early (day 1 to 95), middle (day 96 to 190) and late (day 191 to 285) period according to their gestating period. Metabolic profile including total protein (TP), albumin (Alb), urea (UREA), glucose (Glu), total cholesterol (T-Cho), long-chain fatty acid (LCFA), aspartate aminotransferase (AST), gamma-glutamyl transpeptidase (GGT), creatinine (Crea), calcium (Ca), inorganic phosphorous (iP) and magnesium (Mg) were analyzed using a TBA-40FR automatic biochemical analyzer. The data of Korean Hanwoo cows were then compared to those of the Japanese Wagyu cows.

Results

Most of the data of the Korean Hanwoo cows were relatively higher than those of Japanese Wagyu cows, with the exception of Glu and GGT. This may indicate that the nutritional level of feed for the Korean Hanwoo cows was higher than that of the Japanese Wagyu cows because of the different feeding system. In particular, relatively higher levels of UREA and LCFA were observed in the Korean Hanwoo cows, and this may also contribute to the low reproduction efficiency.

Conclusions

These findings may provide some theoretical basis for understanding the reproductive and feeding situation of Korean Hanwoo cows.     

代谢组学技术在有毒有害物质检测应用中的研究进展

有毒有害物质如致病微生物、生物毒素、农药、兽药及添加剂残留等会造成极大的食品安全隐患,严重威胁人类健康。目前,对有毒有害物质的风险监测仍然面临着巨大挑战。代谢组学技术通过考察生物受到有毒有害物的刺激或干扰后代谢产物的变化,进行系统的定量定性分析,获得具有高度敏感性及特异性的代谢组学投影,适用于对多种微量毒物的鉴别监测。同时,代谢组学技术可反映出毒物代谢过程中可能的生物标志物,为毒物代谢过程和毒理机制的进一步研究提供参考。因此,以色谱质谱联用、核磁共振等为代表的代谢组学方法逐渐成为检测和研究有毒有害物质的关键技术,为其风险评估提供依据。同时各种生物标志物的发现及检测方法的优化将进一步促进代谢组学技术在毒物监测中的实际应用。作者介绍了代谢组学技术的产生和发展,总结了代谢组学技术对常见有毒有害物质的检测方法和生物标志物的研究进展,旨在为代谢组学技术在有毒有害物质检测中的进一步应用提供参考。     

食源性寄生虫的风险评估

风险(risk)是由一种或多种危害因子而引发危害事件的一种可能性或概率。危害因子可能属于物理的、化学的、微生物的范畴,病原微生物中的细菌、病毒、寄生虫等都可成为引发危害事件的风险因子。评估某一因子是否对人或其他生物构成威胁以及所危害的程度显得至关重要。事实上,存在于环境中的危险因子及其多种可能的传播途径都会引发多种危害性事件。因此,要想充分了解并揭示由危害因子引发危害的概率,以及其随后对人类健康造成的危害并非易事。风险评估则是对不良结果或不期望事件发生几率进行描述及定量的系统过程,现已被视为一种用于揭示存在于环境中的各种危害及其对人类健康造成的影响的方法。论文主要对食源性寄生虫风险评估的方法进行全面阐述。