青鲫sIgZ重链基因的克隆及对嗜水气单胞菌的免疫响应

免疫球蛋白是鱼类适应性免疫中主要的效应因子之一, 研究鱼类免疫球蛋白对鱼类疾病的免疫防控尤为重要。本研究利用 PCR 与 RACE 技术克隆获得青鲫(Carassius auratus indigentiaus)分泌型免疫球蛋白 Z (secretory immunoglobulin Z, sIgZ)重链基因 cDNA 全长序列 (基因序列登录号: MZ274344.1), 青鲫 sIgZ 重链基因 cDNA 序列全长 2083 bp, 其开放阅读框长 1668 bp, 编码一条由 556 个氨基酸组成的肽链, 相对分子质量为 61.59 kD, 理论等电点为 7.03。青鲫 sIgZ 重链基因结构由 1 个可变区(VH), 4 个恒定区(CH1-CH4)以及 1 个分泌型的尾部(secretory tail, Sec tail)构成。在 GenBank 中进行同源序列检索, 青鲫 sIgZ 氨基酸序列与其他鱼类 IgZ 的相似性依次为团头鲂 (Megalobrama amblycephala) (63.17%)、草鱼(Ctenopharyngodon idella) (60.82%)、鲤(Cyprinus carpio carpio) (52.98%)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)(37.06%)和金头鲷(Sparus aurata)(35.01%)。利用 MEGA 5.1 软件进行多重序列比对分析, 采用邻接法构建遗传系统进化树, 发现青鲫 sIgZ 基因与同属鲤科(Cyprinidae)鱼类的 IgZ 聚为一支, 青鲫 sIgZ 与团头鲂的 sIgZ 亲源关系最近。通过 qPCR 检测青鲫不同组织中 sIgZ 基因的表达, 发现青鲫头肾中 sIgZ 基因的表达量最高, 中肾、脾和肝脏次之。利用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)对青鲫进行浸泡感染, sIgZ 在头肾、脾脏、中肾、肝、肠、鳃和皮肤中的表达水平在感染的 28 d 内先升高后降低, sIgZ 的相对表达量在黏膜免疫组织(肠和皮肤)中达到峰值的时间要早于系统免疫组织(头肾和脾脏), 肠和皮肤中 sIgZ 在峰值时的相对表达量显著高于头肾中 sIgZ 在峰值时的相对表达量, 实验结果显示, 青鲫 sIgZ 在肠和皮肤黏膜免疫组织中可能发挥重要的免疫功能。     

益生菌发酵饲料对猪的生长和肉质的影响

应用益生菌发酵饲料喂猪,能提高饲料中粗蛋白含量,明显降低猪粪臭味,促进生长、降低料肉比和提高猪肉品质。     

热泵抽吸一效二次蒸汽与抽吸二效二次蒸汽作为一效加热热源蒸汽消耗比较

本文以生产能力为8000kg/h的四效降膜式蒸发器在奶粉生产中的应用为例,对热泵抽吸不同效的二次蒸汽作为第一效一部分加热热源进行计算比较,从计算可看出:热泵抽吸一效二次、二效二次蒸汽分别用于一效的一部分加热热源,后者生蒸汽耗量比前者增加61.84kg/h,其次是热泵抽吸二效二次蒸汽作为一效的一部分加热热源,经过热量衡算,二效的蒸发量比前者要大,其换热面积显然也要大于前者,从蒸发量分配看,二效与一效差距不是很大。如果热泵抽吸二效二次蒸汽作为一效的一部分加热热源,要达到比热泵抽吸一效二次蒸汽作为一效加热热源节省蒸汽的目的,一是要提高所使用蒸汽的压力,二是提高二效蒸发温度。优点是:二效换热面变大,蒸发量变大,这样更有利于料液在较高的温度下有效蒸发。     

gacS基因在荧光假单胞菌FD6防治番茄灰霉病中的功能分析

 荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）FD6可产生多种抗菌物质,对多种植物病原真菌生长都有抑制作用。将FD6菌株感应激酶gacS基因部分保守区片段克隆到自杀载体中得到质粒pBS-S,将该质粒电击转化到FD6菌株中,利用同源重组构建了gacS基因插入突变体。经测定该突变体不产生抗生素硝吡咯菌素、2,4–二乙酰基间苯三酚、藤黄绿脓菌素、蛋白酶和氢氰酸,与野生型菌株相比形成生物膜和嗜铁素能力显著降低,并且丧失了对番茄灰霉病防病能力。gacS基因互补试验结果表明,gacS基因表达可恢复产生次生抗菌物质的能力,且对番茄灰霉病的防治效果与野生型菌株接近。由此证明,gacS基因是影响拮抗细菌FD6抗生素产生和对病害抑制能力的重要调控因子。     

Effect of over-expression of transcription factor CDX2 on proliferation and cell cycle of human gastric cancer cell line SGC-7901

AIM: To study the effect and the molecular mechanism of CDX2 over-expression on the proliferation, growth and cell cycle of human gastric cancer cell line SGC-7901. METHODS: The SGC-7901 cells in LV-CDX2-GFP group were transfected with the recombinant lentivirus vector LV-CDX2-GFP, the cells in LV-GFP group were transfected with the negative control lentiviral vector for the negative control, and the cells in blank control group were without any treatment. The cell proliferation was detected by CCK-8 assay. The cell cycle distribution was analyzed by flow cytometry. The expression of CDX2, Bax, Bcl-2, cyclin D1 and survivin was determined by semi-quantitative RT-PCR and Wes-tern blotting. RESULTS: Compared with LV-GFP group and blank control group, the proliferation activity of the SGC-7901 cells was significantly lower (P<0.05), the G0/G1 phase proportion increased (P<0.05), the mRNA and protein levels of Bcl-2, cyclin D1 and survivin were reduced (P<0.05), and the mRNA and protein levels of Bax were up-regulated (P<0.05) in LV-CDX2-GFP group. No statistically significant difference of the above indexes was observed (P>0.05) between LV-GFP group and blank control group. CONCLUSION: Over-expression of CDX2 mediated by lentivirus inhibits the proliferation and growth of human gastric cancer SGC-7901 cells and arrestes the cell cycle at G0/G1 phase, which may be related to down-regulation of Bcl-2, cyclin D1 and survivin and up-regulation of Bax.     

根肿菌侵染对茎瘤芥（榨菜）根系玉米素和吲哚乙酸含量的影响

以根肿菌侵染的茎瘤芥（榨菜）为试材,采用高效液相色谱法研究了根肿菌侵染对茎瘤芥内源激素含量的影响。结果表明：根肿菌侵染后茎瘤芥根系玉米素（ZT）含量和吲哚乙酸（IAA）含量均明显升高,ZT 含量呈先升高后降低的变化趋势,45～60 d 时远高于健康植株,其峰值出现在第50 天,约为健康植株根系ZT 含量的3 倍;IAA 含量则在55 d 后开始升高,其峰值出现在第70 天,约为健康植株根系IAA 含量的4 倍;侵染后第85 天,发病植株根系ZT 含量和IAA 含量均下降至与健康植株相近。     

高山立体气候资源与高山蔬菜种植分布规律研究

2009～2013 年在鄂西南山区174～1 800 m 不同海拔高度上进行了小气候观测及蔬菜田间试验,对不同界限温度（5、
10、15 ℃）、降水量、蒸发量等气象要素时空变化特征以及喜温蔬菜辣椒、耐寒蔬菜莴苣等蔬菜产量、品质与气象条件之间
的关系进行了分析。分析表明：≥ 5 ℃、≥ 10 ℃、≥ 15 ℃的持续天数随海拔高度每升高100 m 分别递减4.8、5.5、6.8 d,
降水量及地表湿润指数均随海拔高度的升高而增加;辣椒单株坐果数、单位面积产量与开花结果期≥ 15 ℃的持续天数呈显
著线性相关,≥ 15 ℃持续每增加1 d 对单株坐果数、单产贡献率分别增加0.32 个、73.47 kg·（667 m²） ^-1;海拔800～1 200 m
高度≥ 15 ℃的持续时间为100～130 d,且无高温天气胁迫,是喜温蔬菜最佳种植带;海拔1 600 m 以上高度基本无夏季,是
喜冷凉蔬菜的适宜种植区     

Dietary copper supplementation improves pelt characteristics of female silver fox (Vulpes fulva) during the winter fur‐growing season

Copper has an essential role in normal fur pigmentation and fur quality. This study evaluated the effects of cupric citrate (CuCit) supplementation on growth, nutrients metabolism and pelt characteristics of the female silver fox (Vulpes fulva). Fifty age‐matched female silver foxes with similar body weights were randomly divided into five dietary groups for 58 days during the winter fur‐growing season. The basal diet contained 4.92 mg/kg copper. Groups I‐V were supplemented with 6, 30, 60, 90 or 150 mg Cu from CuCit per 1 kg dry matter basal diet. Serum alkaline phosphatase activity was significantly higher (P < 0.05) in those fed 90 mg/kg Cu than those fed 150 mg/kg Cu. Pelt total thickness was significantly higher (P < 0.05) in those fed 30 mg/kg Cu than foxes fed 6 mg/kg Cu supplemented diet, but were similar to the other groups. Length of guard hair was significantly lower (P < 0.05) in those fed 90 mg/kg Cu than fed 6 mg/kg Cu and 30 mg/kg Cu, but were similar to the other groups. Length of underhair was significantly higher (P < 0.05) in those fed 6 mg/kg Cu than those fed 90 mg/kg Cu, but was similar to the other groups. Considering decreasing environmental contamination and improving pelt performance, supplementing 30 mg/kg Cu from CuCit (actual copper 35 mg/kg dry matter) is appropriate for female silver fox.     

兽用抗生素中非法添加5种解热镇痛类药物的高效液相色谱检测方法研究

建立兽用抗生素注射液与可溶性粉剂中非法添加对乙酰氨基酚、安乃近、安替比林、萘普生、氨基比林5种药物的高效液相色谱—二极管阵列检测分析方法。样品经甲醇超声提取后进行液相色谱分析,采用CAPCELL PAK MG C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,流动相为乙腈和磷酸盐缓冲液,梯度洗脱,检测波长229 nm,流速1.0 m L/min。对乙酰氨基酚、安乃近、安替比林、萘普生、氨基比林进样量分别在5.04~100.88、12.04~240.72、5.04~100.72、2.02~40.40、5.02~100.32μg/m L范围内呈良好的线性关系;平均加样回收率(n=5)分别为97.9%~102.8%、91.9%~98.8%、96.2%~101.1%、94.1%~102.3%、96.0%~102.8%,RSD分别为1.0%~3.1%、0.9%~6.4%、1.7%~4.2%、1.4%~3.9%、0.9%~4.8%。该方法快捷、简便,其准确性和灵敏度经方法学验证能很好地满足检测多种抗生素中非法添加解热镇痛类药物的筛查要求。     

叶黄素和中草药对高温环境中罗曼蛋鸡产蛋性能与蛋品质的影响

试验旨在利用叶黄素与中草药组合缓解热应激对蛋鸡的危害。选取210只罗曼粉壳蛋鸡,在高温环境中设立6个试验组,每组30只鸡,Ⅰ组饲喂基础日粮,Ⅱ组饲喂基础日粮+0.3%中草药+维生素C(200mg/kg),Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组在饲喂基础日粮+维生素C(200mg/kg)的基础上分别添加180mg/kg、240mg/kg、300mg/kg和360mg/kg叶黄素,常温环境中设立1个试验组,有30只鸡,饲喂基础日粮,分析叶黄素、中草药、叶黄素与中草药组合对高温环境中罗曼蛋鸡产蛋性能和蛋品质的影响。结果表明:(1)高温使蛋鸡的产蛋率、平均蛋重、蛋壳厚度分布分别显著下降9.79%、7.21%和11.55%(P0.05);(2)比Ⅰ组高温对照组相比,Ⅱ组中草药组的产蛋率、平均蛋重、鸡蛋蛋白质含量分别显著提高7.66%、4.09%和11.53%(P0.05);(3)在高温环境中,与Ⅰ组高温对照组相比,Ⅳ组中240mg/kg叶黄素与中草药组的产蛋率、蛋壳厚度显著提高6.90%和12.42%(P0.05),破软壳蛋率显著降低76.69%(P0.05),罗氏等级显著提高(P0.05),鸡蛋蛋白质含量提高8.56%(P0.05);(4)与Ⅱ组中草药组相比,Ⅳ组中240mg/kg叶黄素与中草药组合的破软壳蛋率显著降低72.26%(P0.05),罗氏等级显著提高(P0.05)。试验结果显示,在本试验条件下,高温使蛋鸡的生产性能下降,0.3%中草药能提高高温环境中蛋鸡的产蛋率,蛋鸡日粮中添加240mg/kg的叶黄素+0.3%中草药可提高高温环境中蛋鸡的产蛋性能,改善蛋品质。