人心果AFLP反应体系的建立与优化

为给人心果分子生物学研究奠定基础,以人心果嫩叶为材料,采用改良CTAB法提取到高质量的总DNA,可用于AFLP实验分析。通过优化酶切—连接反应、预扩增和扩增反应过程中的关键因素,建立了适合人心果的AFLP实验体系和反应条件,得到了带型清晰、多态性丰富的AFLP指纹图谱。研究结果对人心果遗传多样性分析及其分子标记辅助育种具有重要意义。     

猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒和乙型脑炎病毒多重RT-PCR检测方法的建立

根据猪瘟病毒(CSFV)的E2基因保守序列、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的ORF7基因及部分ORF6和3-UTR基因序列和猪乙型脑炎病毒(JEV)的E基因保守序列,设计了3对引物,扩增大小分别为288 bp、430 bp和1 015 bp目的片段.以纯培养病毒抽提RNA,制备cDNA模板,利用3对引物,通过条件的优化,建立了同时检测这3种病毒的多重RT-PCR.CSFV、PRRSV和JEV的RNA最小检出量分别为0.270 ng、0.049 ng、0.067 ng,其它的RNA病毒如TGEV以及DNA病毒如PPV、PrV、PCV-2检测结果为阴性.以β-actin为对照,利用本方法检测了174份临床样品(血清、肺脏和胎儿),其结果为:PRRSV、CSFV和JEV的阳性率分别为30.4%、4.6%和1.7%;CSFV和PRRSV混合感染阳性率为1.7%.同时对临床样品中CSFV、JEV和PRRSV阳性PCR产物进行测序分析,发现CSFV、PRRSV和JEV的PCR产物序列和NCBI数据库中目标基因的同源性分别为92%、90%和89%,这证实了多重PCR的阳性结果为上述3种病毒.结果证明,所建立的多重RT-PCR可用于临床检测.     

猪血凝性脑脊髓炎病毒HE基因的克隆及真核表达

应用特异性引物,从猪血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）中扩增出HE蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体,得到重组质粒pTHE。用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pTHE,回收目的基因HE片段并将其定向克隆到pPiCZαA中,构建重组质粒pPiCZαA HE。用BstXⅠ酶切pPICZαA HE使其线性化,并电击转化至感受态毕赤酵母细胞GS115。PCR法鉴定阳性重组子,用1％甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及westem blot分析。结果在酵母菌培养基上清中检测到相对分子量为43kD的重组蛋白,且该重组蛋白可与HEV多克隆抗体发生特异性血清学反应,表明HEV的HE蛋白片段在Pichia Pastoris中获得成功表达。     

春小麦旗叶性状与产量性状的相关与回归分析

以14个春小麦品种为试材,对旗叶性状与产量及产量性状作了相关与多元回归分析。结果表明,测试小麦旗叶长、旗叶宽、叶面积、旗叶与茎秆的夹角与穗粒数、千粒重、株穗数和产量等性状间的相关系数分别达显著或极显著,建立了旗叶性状与产量及产量因素的最优多元回归方程。     

减氮下不同肥料配施对麦玉复种体系作物氮素积累分配及产量的影响

为探索陕西关中地区冬小麦-夏玉米复种体系氮肥减量增效潜力,构建适宜的作物养分管理体系,于2018-2019年采用田间试验研究了减氮并配施不同肥料对麦玉复种体系作物生长状况、植株氮素积累分配、作物产量以氮素利用效率的影响。试验设置5个处理：常规施氮（225 kg·hm^-2,N₁₀₀）;减氮20%（180 kg·hm^-2 ,N₈₀）;减氮配施生物炭（180 kg·hm^-2,生物炭22 500 kg·hm^-2,N₈₀+BC）;减氮配施缓释肥（180 kg·hm^-2,尿素∶缓释肥=1∶1,N₈₀+S）;减氮配施微生物菌肥（180 kg·hm^-2,微生物菌肥3 600 kg·hm^-2 ,N₈₀+BF）。结果表明：减氮及其配施不同肥料对夏玉米大喇叭口期后株高、干物质和氮素积累没有显著影响;而N₈₀+BF促进了夏玉米氮素向籽粒中的分配;N₈₀+BC提高了夏玉米产量和收获指数,且较N₈₀处理分别显著提高8.3%和20.1%;减氮下三种配施处理均能提高夏玉米氮农学利用率和氮肥偏生产力,且以N₈₀+BC处理表现最佳,较N₁₀₀分别显著提高43.3%和29.0%,较N₈₀分别显著提高45.8%和8.3% ;N₈₀+BC和N₈₀+BF还能显著提高夏玉米氮肥表观表观回收率,二者较N₁₀₀显著增加18.1%和10.7% ,较N₈₀处理显著增加26.9%和19.0%。与N₈₀相比,N₈₀+BF有效提高了冬小麦扬花期和成熟期分蘖数、茎蘖成穗率以及成熟期干物质和氮素积累量,并能显著提高冬小麦穗数和产量,增幅分别为13.7%和16.2%。减氮下3种配施处理均能提高冬小麦氮农学利用率、氮肥偏生产力和氮素利用率,其中氮农学利用率和氮肥偏生产力在N₈₀+BF处理表现最佳,较N₁₀₀分别显著提高了31.2%和28.4%,较N₈₀分别显著提高了33.7%和16.2%,氮素利用率在N₈₀+S处理表现最佳。综上所述,减氮及其配施处理中,180 kg·hm^-2配施生物炭（22 500 kg·hm^-2）和180 kg·hm^-2配施微生物菌肥(3 600 kg·hm^-2)更有利于作物生长,促进氮素积累与分配,提高作物产量和氮素利用效率,实现关中地区麦玉复种体系氮肥管理的“减量增效”。     

一株野生地生亚侧耳的分离鉴定及其生物学特性

从西藏农牧学院校园采集到一株野生亚侧耳(编号为HGHZ02),为了使该菌种得到更好的开发和利用,对其进行了鉴定和生物学特性研究。通过形态学和ITS序列聚类分析,鉴定菌株HGHZ02与勺状亚侧耳(Hohenbuehelia petaloides)的相似度达到100%,但通过形态学鉴定与地生亚侧耳形态特征最相似,因此将菌株HGHZ02鉴定为地生亚侧耳(Hohenbuehelia geogenia)。菌株HGHZ02菌丝最适生长碳源为麦芽糖,最适生长氮源为麦芽浸粉,最适温度为25℃,最适pH为pH 7.0,最适无机盐为磷酸氢二钾。正交试验结果表明,菌株HGHZ02最佳生长因子组合为麦芽糖25.0 g/L、麦芽浸粉3.0 g/L、pH 7.0和温度26℃。     

弱光及干旱条件下AMF对切花月季光合和AsA-GSH循环的影响

旨在探究弱光及干旱条件下丛枝菌根真菌（AMF）对切花月季光合、AsA-GSH循环以及渗透调节物质的影响。盆栽条件下设置100%全光照（L1）、50%全光照（L2）2个光照处理组,80%土壤持水量（W1）和40%土壤持水量（W2）2个水分处理组,接种AMF\[变形球囊霉(Glomus versiforme)+异形根孢囊霉(Rhizophagus irregularis)\]及不接种对照（CK）共8个处理。结果表明,AMF能够侵染切花月季根系,显著提高切花月季生长品质。弱光和/或干旱胁迫下,与不接种对照相比,接种AMF能有效地促进切花月季叶片的净光合速率（P_n）、蒸腾速率（T_r）、气孔导度（G_s）和水分利用效率（WUE）增加,降低细胞间隙CO₂浓度（C_i）;在L2W2处理条件下,与不接种对照相比,接种AMF使切花月季叶片中的抗坏血酸过氧化物酶（APX）、谷胱甘肽还原酶（GR）、单脱氢抗坏血酸还原酶（MDAR）和脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）活性分别提高5.2%、 15.4%、21.7%和35.9%;接种AMF的抗坏血酸（AsA）含量与对照处理无显著差异,还原型谷胱甘肽（GSH）含量提高8.1%,GSH／GSSG比值增加7.9%;接种AMF后切花月季丙二醛（MDA）含量显著降低,可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸（Pro）含量明显增加。结论认为AMF通过维持AsA/DHA和GSH/GSSG的稳定,提高AsA-GSH循环中相关酶活性,增加切花月季叶片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸含量而降低MDA含量来适应水分和光照的变化,形成适应光照和水分条件变化的生理生态对策来改善切花月季生长品质。     

参与碳氮磷转化的水解酶对不同施肥响应的差异

本文旨在研究土壤水解酶对不同施肥的响应差异以及影响因素。通过在红壤中添加牛粪有机肥、化肥进行90d的室内土壤培养试验,采用微孔板荧光法动态分析5、30和90d参与碳氮磷转化的土壤水解酶(α-1,4-葡萄糖苷酶、β-1,4-葡萄糖苷酶、纤维素酶、木聚糖酶、亮氨酸氨基肽酶、β-1,4-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶、磷酸酶)活性。与不施肥(对照)相比,在30 d后,化肥处理的总酶活性显著下降,对应的参与碳氮磷转化酶活性均有不同程度下降;而有机肥处理的总酶活性在培养期内均未发生显著变化,但是其α-1,4-葡萄糖苷酶显著增加,而磷酸酶活性显著降低。参与碳转化的4种水解酶中,只有α-1,4-葡萄糖苷酶活性对施肥的响应较强,且施加有机肥增加其活性而无机肥则降低其活性;对于参与氮转化的水解酶而言,化肥明显抑制了亮氨酸氨基肽酶活性,而有机肥增加了β-1,4-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性;磷酸酶活性明显受到有机肥的抑制作用,而对化肥的响应总体不明显。不同水解酶对不同施肥的响应有明显差异,NMDS分析表明,α-1,4-葡萄糖苷酶和亮氨酸氨基肽酶响应最明显,其次为磷酸酶与木聚糖酶;相关和冗余分析显示,土壤p H、可溶...     

"CALIS重点学科导航库"与"方略-学科导航库"的比较分析

本文通过对数据库内容比较、检索功能比较、数据使用方式比较以及可持续发展比较.可得出"CALIS重点学科导航库"与"方略-学科导航库"是各有千秋,各有自己的特点,为我们建设学科导航数据库提供了新的思路.     

基于GSM的家校短信管理系统的设计

本文所设计的短信系统,有助于搭建学校与学生以及家长互相沟通的信息平台,建立老师与家长同步教育的网络,形成科学量化的教育管理模式,提升学校的管理实力.本系统用串口通信技术与AT指令实现了手机短信软件的核心.同时使用了SOCKET技术,实现了短信的单发与群发、到达提醒、未读提醒、重发和回复等功能;实现对学生、学生家长和导师信息的管理.具有一定的实用价值和参考价值.