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AIM: To express osteopontin 13 peptide (OPN 13) in E.coli, and to test the biological activity of the purified products. METHODS: cDNA fragments containing RGD sequences were cloned into prokaryotic expression vector pET-32c(+) including His coding sequence to construct pET-32c-OPN 13 plasmid. E.coli DH5α transformed by pET-32c-OPN 13 plasmid was induced by IPTG at different concentrations for different times to identify the optimal induction condition. Expressed His-OPN 13 fusion protein was purified via Ni-NTA His Bind Resin metal chelation chromatography, and detected by VSMCs adhesion and migration analysis. RESULTS: His-OPN 13 fusion protein was expressed in soluble manner. The fusion proteins were purified via Ni-NTA His Bind Resin affinity chromatography. His-OPN 13 fusion protein specifically inhibited adhesion and migration of VSMCs stimulated by osteopontin in dose-dependent manner. CONCLUSION: The OPN 13 peptide is successfully expressed in E.coli DH5α. The purified His-OPN 13 fusion protein could inhibit the adhesion and migration of VSMCs stimulated by osteopontin. 相似文献
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WEI Chun-ying WANG Meng-hong WEI Yun-feng ZHENG Ze-qi PENG Jing-tian HUANG Jun WEN Yuan WU Zhi-yong 《园艺学报》2009,25(11):2122-2125
AIM: To investigate the effect and the mechanism of apolipoprotein (a) [apo (a)] on proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMCs). METHODS: All VSMCs used in experiments were serial subcultured from primary cells and were identified by immunohistochemistry staining of α-actin. Cell growth assay was observed as cell counting and MTT assay. Western blotting was also employed to detect the related mechanism. RESULTS: All cells used in experiments were confirmed as VSMCs. Although apo (a) enhanced VSMCs proliferation, this effect was attenuated by anti-integrin αⅤβ3, LM609. Use these reagents alone had no effect on VSMCs growth. The results of Western blotting demonstrated that focal adhesion kinase (FAK) was activated by apo (a) and the expression of total or phosphorylated transforming growth factor β1 (TGF-β1) was also decreased. However, these effects described above were all blocked by LM609. CONCLUSION: Apolipoprotein (a) enhances VSMCs proliferation and this effect is mediated by integrin αⅤβ3, which activates FAK and attenuates TGF-β1 and phospho-TGF-β1 expression. 相似文献
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采用石英砂加液氮研磨方法破碎花粉,然后用两种不同的方法提取水稻花粉总蛋白质,之后采用固相pH梯度等电聚焦/SDS PAGE 双向凝胶电泳对红莲型细胞质雄性不育水稻单核期花粉总蛋白质进行了分离。通过银染显色, PDQuest 2DE软件可识别约1 000~1 500个蛋白质点。其中TCA 丙酮提取法更适合提取花粉总蛋白质进行双向凝胶电泳分离,并可获得分辨率和重复性较好的双向电泳图谱。对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系单核期和二核期花粉总蛋白进行了双向电泳分离,通过比较两个时期花粉蛋白质电泳图谱后发现,二核期的花粉蛋白质较单核期花粉蛋白质数目减少,并且部分蛋白质表达量下降。 相似文献
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在天鹅洲湿地,原位测定了在水淹及未水淹条件下灰化苔草(Carex cinerascens Kükenth.)的光合特征,利用神经网络对2种条件下灰化苔草的光合特征进行了研究,全面评价了不同条件下灰化苔草光合速率对环境因子响应程度。结果表明:水淹导致灰化苔草光合速率下降。通过神经网络,可以很好地预测灰化苔草光合速率的响应,水淹和未水淹2种条件下,气孔导度(gs),蒸腾速率(E),气温(Ta),叶温(Tl)和外界水分含量(Ha)均表现出极大的差异。 相似文献
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纳板河自然保护区土壤酶对不同海拔、坡向的响应 总被引:1,自引:0,他引:1
在纳板河自然保护区内分海拔和坡向采集土样,测定分析了尿酶、蛋白酶、蔗糖酶、过氧化氢酶4种主要土壤酶活性和主要养分指标的变化。结果表明:土壤有机质、水解氮含量随海拔升高显著增加;阳坡全氮含量随海拔升高呈现由中间向两端减小的趋势,阴坡全氮含量随海拔升高波动增加;土壤速效磷含量随海拔呈现由中间向两端减小趋势;蛋白酶活性高海拔 > 低海拔,海拔对表层过氧化氢酶活性影响较小,脲酶、蔗糖酶活性随海拔呈现波动。土壤有机质、全氮、水解氮、速效磷含量阳坡 > 阴坡;土壤蛋白酶、过氧化氢酶、蔗糖酶活性阴坡 > 阳坡,各土层土壤脲酶活性阳坡 > 阴坡。各养分含量及酶活性表层 > 中下层。土壤酶活性与各肥力因子间相关关系显著,各土壤酶活性间相关性显著。有机质、全氮、全磷是影响蛋白酶活性的主导因子,速效磷和水解氮为次要因子;全磷、速效磷、水解氮为影响脲酶活性的主要因子,有机质、全磷、速效钾为次要因子。主成分分析结果表明蛋白酶和脲酶活性作为保护区土壤肥力指标具有可行性。 相似文献
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4种水生植物深度净化村镇生活污水厂尾水效果研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过设置动态模拟试验,持续进水、出水条件下分析比较了漂浮植物凤眼莲和水浮莲、沉水植物轮叶黑藻和挺水植物黄菖蒲对村镇生活污水厂(一级A标准)尾水深度净化效果,筛选出具有去污效果优势的水生植物,为优化水生植物生态修复工程技术在尾水深度净化中的应用提供依据。结果表明:经水生植物深度净化后,尾水水质得到明显改善,漂浮植物凤眼莲和水浮莲对尾水氮、磷的净化效果优于挺水植物黄菖蒲和沉水植物轮叶黑藻。试验周期内,污水厂尾水总氮、总磷和高锰酸盐指数(CODMn)平均浓度为12.22 mg?L-1、0.38mg?L-1和3.88 mg?L-1,凤眼莲、水浮莲、轮叶黑藻、黄菖蒲和对照各系统的总氮平均去除率分别为46.25%、45.74%、43.41%、38.39%和29.22%,总磷去除率分别为36.84%、34.21%、31.58%、28.95%和26.32%,CODMn去除率分别为42.27%、30.93%、32.47%、32.47%和37.89%。凤眼莲、水浮莲、黄菖蒲和轮叶黑藻生物量净增长率分别为550.5%、418.8%、210.6%和80.3%,凤眼莲生物量净增率最大。各处理系统内凤眼莲、水浮莲、黄菖蒲和轮叶黑藻对尾水氮富集量分别为7.36 g、2.33 g、5.12 g和4.46 g,对磷的富集量分别为0.60 g、0.19 g、0.33 g和0.78 g,凤眼莲富集氮能力优于另外3种水生植物,轮叶黑藻磷富集量高于另外3种水生植物。凤眼莲、水浮莲、黄菖蒲和轮叶黑藻植株吸收作用对尾水总氮去除的表观贡献率分别为15.29%、4.90%、11.17%和11.34%,对尾水总磷去除的表观贡献率分别为50.34%、17.17%、35.24%和76.34%。因此,可利用漂浮植物凤眼莲和沉水植物轮叶黑藻立体复合种养的方式深度净化生活污水厂尾水。 相似文献
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中国耕地空间格局变化及其生态系统服务价值响应 总被引:1,自引:1,他引:1
研究耕地空间格局变化对耕地生态系统服务供给能力的影响,能为我国耕地空间格局优化和耕地生态保护提供科学参考,具有重要的理论和实践意义。以往研究缺乏全国耕地生态系统服务供给能力动态变化的综合研究,因此在深入分析耕地空间格局演变的基础上,构建了图斑尺度的耕地生态系统服务价值时空异质评估模型,全面评估2000—2015年我国耕地生态系统服务价值,探究了我国耕地生态系统服务供给能力时空变化规律。结果表明:(1)2000—2015年,中国耕地重心持续向西北方向迁移,水田和旱地重心分别向西北和东北迁移。北方干旱半干旱区旱地持续增加,东北平原区水田持续增加,其他农业区耕地持续减少;(2)2000—2015年我国耕地生态系统服务总价值和单位面积价值均减少,减幅分别为1.35%和0.55%。耕地供给服务总价值和单位面积价值增加,调节服务、支持服务和文化服务总价值与单位面积价值均减少。(3)中国耕地生态系统服务价值变化空间分异明显。北方的北方干旱半干旱区、东北平原区耕地生态系统服务总价值增加,单位价值减少; 青藏高原区耕地生态系统服务总价值和单位价值均减少; 其他农业区耕地生态系统服务总价值减少,而单位价值增加。应通过优化耕地空间格局、精准实施耕地休养生息策略、建立耕地保护生态补偿机制等有效提升耕地生态系统服务供给能力。 相似文献