Bacteriological and molecular typing of Clostridium perfringens strains isolated in retail beef in Beijing,China

Clostridium perfringens is an important zoonotic pathogen. This study was designed to explore the prevalence and toxin types of C. perfringens in retail beef collected from Beijing, China. Among 221 beef samples collected, 53 samples were positive for C. perfringens, resulting in the average prevalence as 23.98%. By toxin gene-based typing, the most C. perfringens strains belong to type A (96.23%, 51/53), only 2 strains were identified as type D. By a multi-locus sequence typing (MLST)-based analysis, a total of 36 sequence types (STs) were detected, and the most STs (n=30) represented just a single strain. These finding suggested that the prevalence of C. perfringens in retail beef in Beijing was considerably high and these bacteria displayed extreme diversity in genetics.     

应用DPO-PCR方法特异性检测志贺氏菌

In this study, a dual-priming oligonucleotide (DPO)-based PCR method for specific detection of Shigella was established using ipaH gene of Shigella as the target gene. The results showed that detection sensitivity of the DPO-PCR method was 1.65×10² CFU/mL. Compared with conventional PCR primers, the DPO primers were easily designed, which simplified the design procedure of PCR primers. DPO primers were not sensitive to annealing temperature, which could efficiently amplify the target gene in the annealing temperature range from 50 to 70 ℃. Moreover, due to the special structure of DPO primers, it had a higher specificity than conventional PCR primers, and none nonspecific amplifications were produced in reaction. In the practical application, tests on 133 samples including frozen/fresh meat, fruits and vegetables, fresh milk, eggs and cooked food by the DPO-PCR method showed that 15 samples were Shigella positive, which were in accordance with the testing results using GB method (GB/T 4789.5-2012), showing good practicality and reliability. The DPO-PCR method provided a new tool for fast and accurate detection of Shigella.     

鸽新城疫与大肠杆菌混合感染的诊治

1 发病情况 沭阳县陇集镇陇集村养殖户李某饲养肉鸽2000只,2009年2月18日,90日龄鸽群突然发病,当日死亡10只,第二天死亡31只,第三、四、五天每天死亡70～100只,五天死亡300只,死亡率为15%左右,病鸽占40%.病鸽精神沉郁、缩头,羽毛松乱,采食量减少,甩头,呼噜,立即用红霉素、黏杆菌素、抗病毒中药、速补等药物治疗,不见好转,2009年2月25日来我站就诊.     

肉牛企业需用商业增值手段培植品牌

分析导致肉牛养殖效益低的现状和介绍应用商业增值获得效益倍增的案例,对肉牛改良的选种、肉牛企业品牌的内涵、营销手段和消费引导等几方面阐述了肉牛企业品牌培植的策略,为肉牛企业品牌化和效益增值化道路提供了参考。     

维生素C缓解动物热应激机理的探讨

热应激给畜牧业生产造成一定的损失。维生素C对缓解动物热应激有一定作用。作者就动物热应激的机理、维生素C的生理功能及维生素C缓解热应激的机理进行综述。     

细胞凋亡与疾病

细胞凋亡(apoptos is)是普遍存在于人体组织细胞内的细胞死亡的形式之一,是不同于坏死的正常生理性的程序性细胞死亡。细胞抗凋亡是生物机体为了适应环境变化,维持生理平衡的一种主动的自我保护行为。凋亡或抗凋亡均是在基因控制下,多样性、偶联性、多途径的信号转导过程。它也受到内外生存因子的影响和制约,肿瘤等多种疾病均能影响细胞凋亡过程。     

土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白基因的克隆及其序列分析

目的利用RT-PCR和RACE技术克隆土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白基因全长序列并进行序列分析.方法根据日本血吸虫和曼氏血吸虫肌动蛋白基因的保守区设计引物,利用RT-PCR扩增出土耳其斯坦东毕吸虫的肌动蛋白基因的大片段,再结合RACE技术分别得到肌动蛋白的3＇端和5＇端,将三部分序列拼接后获得肌动蛋白基因的全长cDNA序列并进行序列分析.结果成功克隆了土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白的全长cDNA并提交GenBank,登录号为DQ017265,核酸序列比对表明东毕吸虫肌动蛋白基因的核苷酸序列和日本血吸虫、曼氏血吸虫的同源性分别为90%和91%.结论土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白的全长cDNA的克隆为进一步表达及其生物学性能的分析提供了理论基础.     

施肥对贵南县轻度退化草甸植被特征的影响

草地退化已严重影响青藏高原高寒牧区畜牧业的发展,施肥是改良轻度退化草地的常用措施。2011-2012年,本研究以贵南县轻度退化草地为研究对象,2011年施加不同氮肥量（0,60,105,150,195和240 kg·hm^-2）和菌肥（45 m³·hm^-2）,探讨施肥在退化草地治理过程中对草地群落盖度、高度和地上生物量的影响。结果表明：施肥处理能够有效提高轻度退化草地植被群落的盖度、高度和总地上生物量,且施肥后次年轻度退化草地群落的盖度、高度和总地上生物量显著（P<0.05）优于当年。45 m³·hm^-2菌肥处理在当年的效果较好,195 kg·hm^-2氮肥处理在次年更佳,2012年7-10月地上总生物量均为最高,分别比不施肥处理分别高出44.3%,97.1%,123.0%和135.4%。不同草种对施肥的响应也不同,195 kg·hm^-2氮肥处理下,2011年禾草地上生物量较高,2012年莎草生物量高于禾草。综上,195 kg·hm^-2尿素施用量配合围栏封育的措施可用于贵南县轻度退化草地的植被恢复。     

鸡源高产淀粉酶丁酸梭菌的分离鉴定

为了获得产淀粉酶的丁酸梭菌,本研究从鸡小肠表面黏液中进行丁酸梭菌的分离与筛选,首先对样品进行80℃水浴10 min除去非芽孢菌后,然后接种到TSN培养基进行菌株的分离与筛选。对分离到的菌株进行菌落形态、显微形态初步观察,然后对疑似丁酸梭菌的菌株进行产酸能力和淀粉酶酶活检测,最后对既产酸又高产淀粉酶的菌株进行生理生化鉴定和16S rDNA序列分析。结果表明分离到一株革兰氏阳性厌氧菌C.B1,菌体呈短杆状,能形成圆形或椭圆形芽孢,生理生化结果也符合丁酸梭菌的基本特征,16S rDNA序列长度为1450 bp,与丁酸梭菌的同源性高达99%以上,因此确定该分离菌株为丁酸梭菌,为进一步开发新的微生态制剂奠定了基础。     

猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验

为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(181-235aa)、E(151-200aa)、F(51-150aa)、G(101-235aa)、H(51-235aa)),将其插入到pcDNA3.0载体中,构建出真核表达质粒,并将其转染至PK-15细胞,用间接免疫荧光试验检测其瞬时表达情况。将试验小鼠随机分成9组,其中免疫组7组,阴阳性对照各1组,将纯化的真核表达质粒对小鼠进行组合免疫;二免后,用经处理过的PCV-2 GXWZ-2株阳性病料悬液腹腔注射免疫组和非免疫对照组小鼠,阴性对照组用生理盐水腹腔注射;其后进行体重记录、病理切片制作及PCR检测。结果表明:共有6个真核表达质粒成功在PK-15细胞中表达。在攻毒后的3周内,阳性对照组小鼠PCR诊断均为阳性;免疫组中,部分组小鼠在攻毒后第1周或在第2周为阳性,到第3周时各免疫组小鼠全部为阴性;阴性对照组始终为阴性。免疫组在病理保护学方面明显优于非免疫对照组,非免疫对照组的体重增长速率略低于免疫组和阴性对照组。由此可见猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒试验中有明显的保护作用。