FQ-PCR在转基因产品检测中的应用研究进展

实时荧光定量PCR（real-time fuoreseent quantitative PCR,FQ—PCR）是近年来定量PCR技术中兴起的最新定量检测技术,因其具有灵敏性高、特异性强、结果精确、反应快速、安全可靠等优点,现已广泛应用于医学和生命科学的各个研究领域,论文就实时荧光PCR技术的主要原理、分类方法以及在转基因产品检测中的应用等进行简要综述。     

猪皮炎肾病综合征组织病理学和PCR诊断

应用病理学和PCR方法,对浙江某猪场送检的疑似猪皮炎肾病综合征（PDNS）病猪进行诊断。结果发现肾脏呈现纤维蛋白性肾小球肾炎变化,真皮及皮下血管表现为坏死性脉管炎,淋巴组织中大量淋巴细胞缺失、多核巨细胞浸润,PCR扩增产物显示猪圆环病毒2型（PCV-2）阳性。结果表明,该猪场感染了PCV-2,并表现为PDNS的病理特征。     

干扰素研究进展

干扰素（IFN）是由干扰素诱生剂诱导生物细胞后所产生的一类高活性多功能的糖蛋白。IFN具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等生物学功能,IFN基因工程产品在临床上的应用取得了显著的成效,但是还有一些问题需要进一步的探索。     

赖氨酸硫酸盐相对于赖氨酸盐酸盐的生物学效价评定

本文旨在通过对肉仔鸡生长性能、氮平衡和血浆尿素氮指标来比较赖氨酸硫酸盐相对于赖氨酸盐酸盐的生物学效价,以便为赖氨酸硫酸盐在肉鸡中的合理应用提供科学的理论依据。选用486只1日龄爱拔益加肉公鸡评定赖氨酸硫酸盐相对于赖氨酸盐酸盐的生物学效价。鸡只预饲3d,第4天按体重随机分为9个处理,每个处理9个重复,每个重复6只鸡。分别通过赖氨酸硫酸盐或赖氨酸盐酸盐向玉米-玉米蛋白粉-花生粕-麦麸型基础日粮中添加0.09%、0.18%、0.27%和0.36%的赖氨酸。结果表明,4～21d赖氨酸硫酸盐相对赖氨酸盐酸盐的效价分别为:0.93(日增重)、0.86(饲料转化效率)和0.95(氮存留);22～42d赖氨酸硫酸盐相对赖氨酸盐酸盐的效价分别为:1.01(日增重)、1.36(饲料转化效率)和1.06(氮存留);对于生长全期,赖氨酸硫酸盐相对于赖氨酸盐酸盐的生物学效价分别为:0.99(日增重)、1.07(饲料转化效率)和1.03(血浆尿素氮)。可见,由不同指标得到的赖氨酸硫酸盐相对赖氨酸盐酸盐的生物学效价不同,但总的平均相对效价为1.03。即两者对肉鸡的生物学效价相当。     

壳聚糖对仔猪生长性能及血清中类胰岛素生长因子-Ⅰ和生长激素水平的影响

本文旨在研究日粮中添加不同剂量壳聚糖对仔猪生产性能及血清中类胰岛素生长因子-I(IGF-I)和生长激素(GH)水平的影响。试验选择60日龄大白×长白×VI系杂交仔猪96头,随机分为4个日粮处理组,每个处理3个重复,每个重复8头,进行为期21 d的饲养试验。4种日粮分别是在基础日粮中添加0、0 .01 %、0 .05 %、0.1 %的壳聚糖配制而成。结果表明,壳聚糖对仔猪生长性能的影响呈二次剂量依赖关系,添加0 .01 %~0 .05 %壳聚糖能够提高仔猪平均日增重、平均日采食量及增重耗料比,并可提高仔猪血清中IGF-Ι和GH含量。而添加更高水平时生长性能却有下降趋势。因此,在本试验条件下初步得出,0 .01 %~0 .05 %为壳聚糖在仔猪日粮中的适宜添加量。     

化学预处理对稻草硅化程度的影响及其对瘤胃降解率的改善效果

本试验结合化学分析与电镜技术,探讨了氨化与碱化处理对稻草硅化程度的影响,分析了稻草硅化程度与降解率的相关性。化学分析显示,碱化或氨化处理稻草的总硅含量随氢氧化钠或碳酸氢铵处理剂量的增加而线性下降(P<0.01);可溶性硅含量随碳酸氢铵处理剂量的增加变化不显著(P>0.05),但随氢氧化钠处理剂量增加线性下降(P<0.01);总硅与稻草干物质降解率间存在极显著负相关(r=-0.560,P<0.01)。电镜观察发现,氢氧化钠处理的稻草茎表皮根毛皱缩、乳突和瘤状结构部分溶解,碳酸氢铵处理的稻草茎外表皮层部分脱落;氢氧化钠处理的稻草茎表皮有明显的降解优势,碳酸氢铵处理的稻草茎表皮瘤胃降解72h后仍保持完整的乳突和瘤状结构。上述结果表明,氨化和碱化处理可以在一定程度上降低稻草的硅化程度,借此提高稻草的降解率,但两者降低稻草硅化的程度与方式不同。氨化处理通过使稻草表皮层部分脱落,降低稻草总硅含量,但借此提高稻草降解率的作用较弱;碱化处理可使稻草表皮硅酸盐部分溶解,从而使稻草总硅含量、可溶性硅含量下降,加速稻草降解。     

大豆凝集素对小肠上皮细胞和红细胞凝集能力的研究

本文旨在测定纯化的大豆凝集素对兔和鸡小肠上皮细胞和红细胞的凝集活性。测定大豆凝集素对红细胞的凝集能力时,采用2%兔红细胞悬液,测定了使兔红细胞50%凝集的蛋白质浓度。测定对兔小肠上皮细胞的凝集能力时,采用荧光标记SBA与新鲜小肠上皮细胞结合后,观察荧光显微镜下荧光结合细胞比例的方法定量。经血凝试验结果表明,使兔红细胞50%凝集的SBA蛋白质浓度为2.50~3.69μg/mL,而SBA对鸡的红细胞没有凝集作用。SBA对兔小肠上皮细胞有结合能力,结合率为30%左右。试验结果说明大豆凝集素的血凝活性具种属特异性,用SBA与小肠上皮细胞的结合率作为评价其抗营养活性的指标具一定可行性。     

日粮中添加不同形式三价铬对肥育猪组织铬沉积的影响

本项目旨在研究不同形式三价铬对肥育猪组织铬沉积的影响.选用96头体重约65 kg的杜长大三元杂交猪,按体重相近、公母各1/2的原则随机分成4组,每组3个重复,每个重复8头猪.试验猪第Ⅰ组设为对照,饲喂基础饲粮,其余3组为试验组,分别于基础日粮中添加含200 ug/kg铬的氯化铬、吡啶羧酸铬、纳米铬.试验猪随意采食,自由饮水,试验为期40 d.饲养试验结束后,从每组中选择体重相近的8头猪进行屠宰和样品采集分析.结果表明,饲粮中添加200 ug/kg三价纳米铬显著提高了肥育猪日增重和饲料转化率(P<0.05),全血、背最长肌、心脏、肝脏、肾脏、空肠和回肠中铬沉积量显著提高(P<0.05).饲粮中添加铬显著增加了粪便中铬的排泄量(P<0.05),纳米铬和吡啶羧酸铬组尿铬含量显著上升(P<0.05).由研究结果得出,纳米粒径化可以显著提高铬在肥育猪组织器官中的沉积,纳米铬相比常规氯化铬和吡啶羧酸铬具有更高的吸收率.     

玉米-豆粕日粮添加溶菌酶对肉仔鸡生长性能、代谢及免疫指标的影响

本文研究了溶菌酶对肉仔鸡生长性能及免疫指标的影响.采用单因子试验设计,选用体重相近1日龄从肉仔鸡320羽,随机分成5组,每组64羽,4个重复,每个重复16羽(公母各1/2).以玉米-豆粕配制基础日粮,Ⅰ为对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ分别饲喂基础日粮加不同剂量(添加量分别为0.3、0.4、0.5和0.6 g/kg)的溶菌酶,试验期42 d.结果表明:添加溶菌酶可降低肉仔鸡采食量、料重比,提高日增重.Ⅳ组与Ⅰ组相比,全期(0～6周)Ⅳ组日增重显著提高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05);提高了肉仔鸡免疫指标,前期(0～3周)及后期(4～6周),Ⅳ组的胸腺相对重量较Ⅰ组显著增加(P<0.05);Ⅳ组和Ⅴ组的法氏囊相对重量较Ⅰ组显著增加(P<0.05);21日龄时,Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组的血清总蛋白含量较Ⅰ组均显著提高(P<0.05);42日龄时,Ⅳ组和Ⅴ组的血清球蛋白含量、血清抗体IgG的含量较Ⅰ组显著提高(P<0.05).结果提示:饲料中添加适量溶菌酶后,肉仔鸡能量、养分表观代谢率和免疫指标均有提高的趋势.     

日粮添加LA和DHA对乳脂脂肪酸含量及比值的影响

本试验选用带有永久性瘤胃、十二指肠和回肠瘘管的泌乳荷斯坦奶牛4头,采用4×4拉丁方试验设计,研究日粮添加亚油酸(LA)和二十二碳六烯酸(DHA)对乳常规组成、消化道各段食糜pH以及乳脂脂肪酸构成的影响.试验结果表明:添加LA和DHA不影响乳蛋白和乳糖含量(P>0.05),而添加DHA有显著降低乳脂含量的趋势(P>0.05);日粮共同添加LA与DHA能提高十二指肠前消化道的pH,但差异不显著(P>0.05),而单独添加DHA显著降低了回肠的pH(P<0.05);日粮单独添加DHA增加乳脂中C23:0脂肪酸的含量,但并不降低乳脂中总饱和脂肪酸量.与对照组相比,LA与DHA共同添加使乳脂中总多不饱和脂肪酸增加了100%(P<0.05).LA与DHA共同添加使乳脂中饱和脂肪酸/不饱和脂肪酸由3.18降低至1.24(P<0.05).添加DFIA使乳脂中总单不饱和脂肪酸/多不饱和脂肪酸由5.94降低至3.00(P<0.05).上述研究结果表明,日粮添加LA和DHA可改变乳脂中脂肪酸的组成和比例,有利于人体健康,但DHA使产奶量有一定程度的降低.