阿勒泰羊生长速度与主要血液生化指标含量及尾脂Leptin基因表达关系

试验通过研究不同生长速度阿勒泰羊主要血液生化指标含量和尾脂中瘦素（Leptin）基因的表达水平,探讨阿勒泰羊生长速度与脂肪沉积之间的关系。选取300只出生时间相近的阿勒泰羊公羔,正常饲喂至6月龄,记录日增重,取平均日增重排前10%和后10%的公羔各30只,分为生长快速组（HBW）和生长慢速组（LBW）,从生长快速组随机选12只分为抑制生长组（饲喂低能量饲粮以抑制其生长,HBW-75%,n=6）和生长快速对照组（饲喂标准饲粮,HBW-100%,n=6）,生长慢速组随机选12只分为促进生长组（饲喂高能量饲粮以促进生长,LBW-125%,n=6）和生长慢速对照组（饲喂标准饲粮,LBW-100%,n=6）;预饲期7 d,正饲期30 d,试验结束后称重并采集血液,屠宰后采集尾部脂肪。检测血液TG、CK、TSH、T3、T4、S.S、GH、INS、PG、Leptin含量或活性及尾部脂肪Leptin mRNA和蛋白表达量,并观察尾部脂肪细胞形态学变化。结果显示,HBW-100%和LBW-100%组初体重与末体重均差异显著（P<0.05）,HBW-75%和HBW-100%组初体重与末体重均无显著差异（P>0.05）;LBW-100%和LBW-125%组初体重差异显著（P<0.05）,末体重无显著差异（P>0.05）。LBW-100%组的T4、S.S、Leptin、TSH、T3含量显著低于HBW-100%组（P<0.05）;LBW-125%组T3含量显著高于LBW-100%组（P<0.05）;HBW-75%组GH、PG和Leptin含量显著低于HBW-100%组（P<0.05）。LBW-125%组尾部脂肪细胞面积大于LBW-100%组,HBW-75%组小于HBW-100%组（P<0.05）。Leptin mRNA和蛋白表达量检测结果表明,HBW-100%组的Leptin mRNA表达量与LBW-100%组无显著差异（P>0.05）,Leptin蛋白表达量极显著高于LBW-100%组（P<0.01）。LBW-125%组Leptin mRNA和蛋白的表达量均显著高于LBW-100%组（P<0.05）。HBW-75%组Leptin mRNA的表达量极显著低于HBW-100%组（P<0.01）,Leptin蛋白表达量显著低于HBW-100%组（P<0.05）。综上所述,生长快速组与生长慢速组中,Leptin的表达量与体重和体脂有一定关联;在生长慢速组促进生长后体重和体脂显著增加,Leptin的表达量呈上升趋势;在生长快速组抑制生长后体重和体脂减少,Leptin的表达呈下降趋势。改变生长速度对Leptin的表达量会产生影响,从而改变机体的脂肪沉积状况。     

气肿疽梭菌CctA基因的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

研究旨在原核表达气肿疽梭菌细胞毒素A （CctA）基因,用纯化的重组蛋白建立其间接ELISA检测方法,a。利用大肠杆菌密码子的偏爱性优化CctA基因序列,克隆至原核表达载体pET-28a （+）,双酶切鉴定原核表达质粒pET28a-CctA并测序。将重组质粒转入大肠杆菌,经IPTG诱导得到高表达的重组CctA包涵体蛋白。包涵体蛋白变性后经镍（Ni）柱纯化,SDS-PAGE检测其纯化效果。以豚鼠抗气肿疽梭菌抗血清为一抗,用Western blotting方法检测重组CctA蛋白的反应原性。用棋盘滴定法建立间接ELISA检测方法,以复性后的重组CctA蛋白作为检测抗原,摸索抗原包被浓度、封闭液的种类及浓度、抗体的最适稀释度和反应条件等。选用3批气肿疽灭活疫苗免疫豚鼠后采集血清,同时用攻毒和间接ELISA两种方法验证疫苗的免疫效力。质粒双酶切结果显示,得到大小约853 bp的条带,与预期相符,且测序结果正确。SDS-PAGE结果表明,成功表达并纯化大小为35 ku的重组CctA蛋白。Western blotting结果显示,豚鼠抗气肿疽梭菌抗血清与重组CctA蛋白具有良好的反应原性。建立的间接ELISA法的最适条件为：抗原的包被浓度为0.5 μg/mL,于4 ℃包被过夜;封闭液选择10%胎牛血清,37 ℃孵育2 h;二抗的稀释度为1：8 000;室温避光显色10 min后终止反应,测定D_{450 nm}值。当P/N>4.6时,间接ELISA法检测结果与豚鼠攻毒试验结果拟合度较好。本研究成功表达CctA基因并纯化了重组CctA蛋白,建立的以重组CctA蛋白为检测抗原的间接ELISA检测方法,有望成为气肿疽灭活疫苗免疫效果验证的替代方法。     

肉牛冻精细管无伤害制作技术

本文对日本和牛冻精细管生产过程中的种公牛饲养管理、采精管理、稀释液的配方及其配制过程,稀释过程,冷冻过程进行了详细描述。这项技术使细管冻精的平均活力由的0.3提高到0.4以上,大幅提高了冻精生产质量。     

添加尿素和糖蜜对甘蔗尾打捆青贮品质的影响

试验采用单因子设计研究不同水平的尿素、糖蜜及糖蜜与尿素混合处理对甘蔗尾打捆青贮品质的影响。试验共分5组,其中1组为对照组,甘蔗尾经揉搓后直接青贮,2~5组为试验组分别添加0.6%尿素、1.0%的尿素、5%糖蜜和0.6%尿素+5%糖蜜,每个处理3个重复,青贮期90 d。试验结果表明,添加0.6%、1%的尿素及0.6%尿素+5%糖蜜均能显著提高青贮饲料的粗蛋白质含量（P<0.05）,但3个组间差异不显著（P>0.05）;单独加尿素的两组青贮料pH较对照组和其它试验组高,外观品质有所下降;添加5%的糖蜜和0.6%尿素+5%糖蜜均能显著降低青贮料的粗纤维含量,增加可溶性糖的含量,青贮料的pH及外观品质较好;综合营养成分和外观品质, 甘蔗尾用尿素与糖蜜混合处理其青贮料的品质最好。     

日粮中精料和牧草比例对舍饲山羊增重的影响

报道了在四川省洪雅县进行的一项山羊舍饲试验。试验分3个阶段、4个分组,每组8只5月龄的波尔×成都麻羊杂交公羔(去势),按不同精料与牧草配比饲喂。在舍饲条件下,无论以哪种牧草为基础日粮,随着补饲精料比例的增加,总的干物质采食量相应增加,而牧草采食量有所下降。以牛鞭草为基础日粮时,如果不补饲精料,山羊日增重很低,补饲精料可明显提高日增重。在牛鞭草日粮的基础上增加苜蓿干草,最初阶段因试验羊不太适应,导致日增重降低,但是经过约2周的适应之后,山羊日增重显著提高,但苜蓿干草成本较高,用于饲养山羊并不划算。以多花黑麦草为基础日粮时,山羊增重效果最好,依补饲精料比例的不同(12%~43%),山羊日增重130~189g,10月龄时的胴体重为17.56~25.23 kg。以黑麦草为基础日粮结合补饲精料虽可以提高山羊日增重,但增加精料导致成本过高,净收入降低。综合比较,在黑麦草基础上添加10%精料(干物质基础)的配比最好,每只羊每日可通过增重获得0.64元净收入。     

六味地黄丸加味对免疫低下小鼠免疫功能的影响

为探讨六味地黄丸加减复方对小鼠免疫功能的影响,应用可的松制作小鼠的免疫抑制模型,然后灌服高、低剂量的六味地黄丸加减复方浸提液,测定小鼠的体重、胸腺和脾重量,耳廓肿胀度以及吞噬细胞的吞噬作用。结果表明：高剂量的中药复方粉剂可使免疫功能低下小鼠的体重、胸腺和脾脏重量显著增加,耳廓肿胀度显著增加,具有显著促进吞噬细胞的吞噬作用;但小剂量组作用不明显。高剂量六味地黄丸加减复方可增强机体的免疫功能。     

家蚕雄蛾蛋白酶解效果的初步研究

为充分利用家蚕雄蛾蛋白资源,以交配后的家蚕雄蛾为材料,比较分析了脱脂和不脱脂处理对雄蛾蛋白提取效果的影响,同时对碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶在各自最适条件下酶解雄蚕蛾蛋白的效果进行评价。结果表明:脱脂处理有利于雄蚕蛾蛋白的提取,蛋白质的质量分数达76.84%;选用的3种蛋白酶对雄蚕蛾蛋白的酶解效果,以碱性蛋白酶最佳,酶解5 h后的酶解液中三氯乙酸可溶性氮的质量浓度为5.67 mg/mL。     

猪链球菌2型人源分离株EF单克隆抗体的制备与鉴定

为了解猪链球菌2型（SS2）菌株毒力相关因子的致病机理,建立高效的免疫学检测方法,将SS2胞外因子（EF）抗原性强的区域通过基因克隆、原核表达,经亲和层析纯化的EF蛋白免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术将免疫细鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,建立了4株分泌抗EF蛋白单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞系2G1、5H7、3H4和1F2。间接ELISA测定杂交瘤细胞培养上清的效价为1∶128～1∶512,诱生腹水的抗体效价为1∶104～1∶105。4株McAb腹水的Western blot鉴定表明McAb能特异性的识别EF。以2G1单抗腹水与和EF多克隆抗血清建立的夹心ELISA可特异地检测EF。     

用薯莨提取液对真丝织物染色增重的最佳工艺及金属离子后处理的改性效果

采用天然染料改善真丝性能有利于环保和人体健康。研究了以天然薯莨提取液为染料,应用汽蒸染色方法对真丝织物进行染色增重的最佳工艺,比较了分别用Fe3+、Cu2+、Cr6+3种金属离子进行后处理的改性效果。薯莨提取液对真丝增重的最佳工艺是:汽蒸温度110℃、湿度85%,汽蒸8次,汽蒸时间4 min,带液率180%、含固量6.28%。用Fe3+、Cu2+、Cr6+金属离子后处理的最佳质量浓度分别为12、10、10 g/L。Fe3+、Cr6+后处理的真丝织物其增重率随离子浓度的增加逐渐增大,而Cu2+后处理的真丝织物增重率在离子浓度上升到一定程度后有所降低。用Fe3+后处理的真丝织物颜色最深,呈红黑色;用Cu2+后处理的真丝织物颜色偏深,色相在红黄之间;用Cr6+后处理的真丝织物偏暗黄色。3种金属离子用于染色真丝织物的后处理,均在一定程度上提高了薯莨提取液染色增重真丝的色牢度和拒水性能,能明显提高真丝织物的紫外屏蔽性能,其中经Cr6+后处理的真丝织物拒水性能和紫外屏蔽性能最为显著。     

酸化饮水对断奶獭兔肠道形态及内脏器官发育的影响

 通过在饮水中添加不同量的复合酸,研究不同pH饮水对断奶獭兔肠道形态及内脏器官发育的影响。40只体重相近的35日龄美系白色断奶獭兔按公母各半随机分为4组,每组10只,A组为对照组,饮用自来水;B组饮水中添加0.55%复合酸,pH 5.0;C组饮水中添加0.85%复合酸,pH 4.3;D组饮水中添加3.3%复合酸,饮水pH 3.6。结果表明,与对照组相比,pH 4.3饮水能显著增加脾脏重和脾脏指数（P<0.05）;酸化饮水能提高断奶獭兔其他内脏器官重,改善内脏器官指数,但和对照组相比差异不显著（P>0.05）。酸化饮水可以改善断奶獭兔肠道形态,增加绒毛高度、降低隐窝深度,饮水酸度pH 4.3时可显著增加十二指肠绒毛高度（P<0.05）,并降低空肠肠壁厚度（P<0.05）;饮水酸度pH 3.6时可显著降低回肠肠壁厚度（P<0.05）;酸化饮水对空肠、回肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度和肠壁厚度也有一定改善,以pH 4.3饮水酸度改善最好,但差异不显著（P>0.05）。结果显示,酸化饮水可以在一定程度上改善断奶獭兔内脏器官发育和肠道形态,其中以pH 4.3改善效果最好。