刺梨及其近缘种PCR实验体系的建立与优化

以刺梨及其近缘种月季为试材,进行了RAPD-PCR实验参数的确立和优化试验。结果表明,刺梨及月季25μL反应体系的最优组成为2.5μL10×反应缓冲液,2mmol/LMg2+,0.2mmol/LdNTP,1.6mg/L模板DNA,0.4μmol/L随机引物和1.2UTaqDNA多聚酶。经PCR扩增验证,此反应体系亦适宜于刺梨的部分近缘种,可有效用于RAPD分析;通过将退火温度提高至50℃或采用“Touchdown”扩增程序,并在50μL反应体系中适当增加特异引物对浓度(1.0μmol/L),模板DNA(4.0mg/L)和TaqDNA多聚酶(3.0U/管)的使用量,建立起适合于刺梨特异DNA片段检测及回收的特异PCR扩增实验体系,为刺梨的分子克隆奠定了技术基础。     

萝卜离体再生的影响因素

对影响萝卜离体再生的因素进行了研究,结果表明,不同基困型材料均以带柄子叶的再生频率最高;不同基因型材料所需的最适激素浓度和配比不同,在一定范围内提高6-BA浓度可促进不定芽的分化;苯基脲类细胞分裂素TDZ与嘌呤型细胞分裂素6-BA和KT相比,对促进萝卜不定芽分化的效果更好;AgNO_3可显著提高不定芽再生频率;NAA诱导生根的效果优于IAA。     

菜豆萎蔫病菌的血清检测鉴定技术研究

本研究对我国一类检疫性有害生物菜豆萎蔫病菌（Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｃｕｍｆａ－ｃｉｅｎｓｐｖ．ｆｌａｃｕｍｆａｃｉｅｎｓ，Ｃｆ）进行血清检测鉴定技术的研究。试验中制备了抗Ｃｆ的血清，应用抗００２０，０２３７，０２３８菌株的抗血清及其ＦＩＴＣ标记的抗体进行间接和直接免疫荧光染色试验（ＩＦ／ＩＦ）。通过对１９个Ｃｆ菌株和其它６个属１４个种的植物病原细菌２０个菌株的测定，结果发现约５０％的Ｃｆ菌株为强阳性反应，且与Ｃｆ种下致病变种也有强阳性交叉反应。由于单个血清检测易产生假阴性反应，故将三种血清１∶１∶１混合后进行ＩＦ试验，结果表明与所有的Ｃｆ菌株反应，且与Ｒｆａ和Ｃｍｔ有弱阳性反应。对含１０４～１０７ｃｆｕ／ｍｌ细菌及３０ｇ种子含１粒人工接种种子的种子抽提液均能检测到典型的阳性细胞，血清检测的灵敏度为４．５×１０４ｃｆｕ／ｍｌ，可用于种子的检测。本研究还进行了初步的免疫荧光菌落染色（ＩＦＣ）试验     

起始肥料对一品红生长的影响

 研究了生长介质中起始肥料对一品红生长的影响和一品红不同部位矿质养分含量。结果表明： 速效肥比缓效肥更有利于一品红生长并提高品质，速效肥中供试的两种NO₃^--N与NH₄⁺-N比例对一品红生长影响不大。绿色叶片矿质养分含量，除Fe和Mn较高外，与国外推荐的养分诊断指标相一致，说明目前国外推荐的一品红养分诊断部位适合于绿色叶片。     

检测砂梨潜隐病毒的IC-RT-PCR和TC-RT-PCR的研究

以砂梨为试材,在生物学和血清学检测的基础上,采用免疫捕作RT-PCR穴IC-RT-PCR雪和试管捕作RT-PCR穴TC-RT-PCR雪技术,对苹果褪绿叶斑病毒(Applechloroticleafspotvirus,ACLSV)和苹果茎沟病毒(Applestemgroovingvirus,ASGV)进行了检测分析。结果表明,TC/IC-RT-PCR均能有效检测梨粗提液中的ACLSV和ASGV,分别获得了大小约358bp和499bp的目标扩增片段;但IC-RT-PCR检测ACLSV的效果受到病毒分离株间血清学关系影响。与传统的RT-PCR相比,IC/TC-RT-PCR不仅灵敏度更高,而且不需提取总RNA,可以简化操作程序和减少苯酚、氯仿类有机试剂对人体的伤害和对环境的污染,适合于大量梨样品的病毒快速灵敏检测。     

微白黄链霉菌对红豆草壳二孢的拮抗效果评价

红豆草壳二孢叶斑黑茎病(Ascochyta onobrychidis)是红豆草(Onobrychis viciaefolia)最重要的病害之一,在分离此病菌的同时得到一种对此病菌具有较强抑制作用的微生物,为评价此拮抗菌的开发利用前景,本研究采用形态学、分子生物学和生物化学方法鉴定了其分类地位,并测定了其对红豆草壳二孢的抑菌效果。通过构建系统发育树并结合其形态特征和生理生化特性,将该拮抗菌鉴定为微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavu),在高氏一号培养基上菌落为黄白色,可产生黄白色水溶性色素,孢子丝钩状,顶端螺旋形;在平板对峙试验中该菌的菌落对红豆草壳二孢菌落的相对抑制率达74.33%,同时该菌发酵液对红豆草壳二孢菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别为80.95%和93.87%。该菌具有生物防治红豆草壳二孢的开发和利用价值。     

温度和水分对赖草种子萌发的影响

利用聚乙二醇(PEG)试剂室内模拟不同干旱(0、-0.10、-0.20、-0.40、-0.80、-1.60 MPa)和温度(10、15、20、25、30℃)环境条件,对西藏班戈县野生型赖草(Leymus secalinus)种子萌发特性进行研究。结果表明,赖草种子在恒温10~30℃和变温10~30℃均能萌发.恒温25℃处理下,种子萌发达到了最佳响应;恒温15℃和变温20/30℃处理对赖草种子发芽率具有显著影响(P0.05),而恒温10和30℃对赖草种子发芽率具有极显著影响(P0.05);随着PEG渗透势的增加,赖草种子发芽率、发芽指数、活力指数和胚芽长均出现了不同程度的下降现象,而胚根则表现为先升后降的变化现象。25℃和蒸馏水处理下,野生赖草种子萌发效果最佳;而在25℃和-0.10~0 MPa渗透势处理下,赖草种子胚根优于胚芽生长。     

湖南省推进兽医社会化服务发展的探索与实践

湖南省主动适应兽医工作新形势,积极推进兽医社会化服务发展,创新服务体制机制,扎实稳妥开展兽医社会化服务试点。本文总结了湖南省推进兽医社会化服务发展取得的成效,包括防疫效果提升、人员待遇提高、职能定位明确,发展空间拓宽等,分析了改革试点中存在的社会化服务组织发展困难、财政投入不足、监管体系能力薄弱等问题,提出了加强统筹协调、注重组织培育、加强财政保障、强化绩效评估等发展建议,为全面推进兽医社会化服务提供了借鉴。     

内蒙古羊屠宰场致泻性大肠杆菌和沙门氏菌污染状况分析

为了解内蒙古地区羊屠宰场各屠宰环节致泻性大肠杆菌和沙门氏菌的携带情况,评估是否存在污染风险,选取不同规模屠宰场,用棉拭子法分别采集不同屠宰环节样品349份,36 h内进行试验;应用PCR方法分离鉴定病原菌,对鉴定为致泻性大肠杆菌的分离株进行16S r DNA测序并构建系统发育树。结果显示:从刚宰杀的羊胴体表面和环境中共分离到致泻性大肠杆菌12株,其中11株携带毒力基因elt,1株携带毒力基因eae和elt;大中型屠宰场(1.21%)的致泻性大肠杆菌阳性率低于小型屠宰场(5.43%),不同规模屠宰场的预冷间均未检出致泻性大肠杆菌和沙门氏菌;从屠宰环境中分离出1株携带inv A基因的沙门氏菌,阳性率为0.29%;经高压冲洗和排酸预冷等屠宰工艺后,在羊胴体表面均未发现致泻性大肠杆菌和沙门氏菌。     

动物诊疗机构X光机使用监管问题分析

随着动物诊疗技术的发展,动物诊疗机构普遍安装使用了X光机。本文通过对《动物诊疗机构管理办法》《放射性同位素与射线装置安全和防护条例》等法规的梳理,探讨了当前动物卫生监督物诊疗机构对动物诊断机构使用X光机的监管内容,包括动物诊疗机构是否从事动物颅腔、胸腔和腹腔手术,是否使用X光机,以及对违法行为的处置。