草鱼呼肠孤病毒生长特性研究

以草鱼呼肠孤病毒(GCRV)873毒株为试验材料,建立了GCRV荧光定量PCR检测方法;用GCRV873株感染CIK细胞及草鱼,通过对病毒RNA复制水平、子代病毒含量以及细胞病变等情况进行监测,研究其在CIK细胞及草鱼体内的生长特性。在CIK细胞中,GCRV感染后12 h即可检测到子代病毒,36 h时,所有细胞被感染;72 h时,病毒滴度达到最高,为10~(6.75) TCID_(50)/mL。在草鱼的肝、脾、肾中,均能检测到GCRV RNA,其中肾脏中含量最高,其次是肝脏,脾脏中最少。本试验为研究GCRV致病机理及制备细胞灭活疫苗奠定了试验基础。     

6种人兽共患病病原核酸液相芯片检测体系的建立

本研究通过设计、合成特异性引物和探针并对其进行修饰,将探针和特定荧光编码微球共价交联后,利用Luminex检测仪读取荧光信号,从而建立了针对布鲁氏菌、沙门氏菌、弓形虫,狂犬病病毒、巴氏通体、弯曲杆菌等6种病原的液相芯片检测方法。数据显示,本研究建立的液相芯片检测体系具有良好的特异性,检测灵敏度达50拷贝数,能同时检测6种重要人兽共患病病原,对于这6种人兽共患病的快速筛查和控制提供了技术支撑。     

浙江南部近海小黄鱼肌肉脂肪酸组成及食源指示分析

小黄鱼（Larimichthys polyactis）是我国近海重要的经济和优势鱼种,在食物网结构中起承上启下的关键作用。利用气相色谱质谱联用仪测定了浙江南部近海小黄鱼的肌肉脂肪酸含量并分析其组成变化特点,基于特征脂肪酸的食源指示功能开展小黄鱼的食性分析。结果表明：小黄鱼肌肉中共检测出30种脂肪酸,主要脂肪酸包括C16∶0、C17∶0、C18∶1n9c、C18∶3n3、C16∶1n7、C20∶1、C20∶4n6、C20∶5n3（EPA）和C22∶6n3（DHA）等,其中C16∶0含量最高（23.12%）,其次为C18∶1n9c（16.67%）、C16∶1n7（11.45%）和C22∶6n3（11.40%）;肌肉中不饱和脂肪酸（UFA）平均含量达到60.20%,显著高于饱和脂肪酸（SFA）的含量（39.80%）,DHA和EPA在机体中含量占比达15.54%,体现出小黄鱼肌肉具有较高营养价值;双因素方差分析显示饱和脂肪酸含量在体长组间存在显著差异,含量随着体长的增大而减小,而单不饱和脂肪酸（MUFA）含量存在显著的季节性差异;绝大多数特征脂肪酸在各季节的体长组间无显著差异,而120~139 mm体长组和>180 mm体长组的C16∶1n7、C20∶1和C18∶1n9c在冬季的含量显著小于其他季节;基于脂肪酸食源指示功能,小黄鱼属于浮游、底栖与游泳动物混合食性的鱼类,初始碳源包括浮游硅藻类、甲藻类和底栖生物等。本研究利用了特征脂肪酸稳定指示食物来源的特点,进一步补充和验证文献资料中小黄鱼的胃含物分析结果,为小黄鱼的摄食生态学研究提供重要参考。     

家蚕Ras3基因全长cDNA克隆及在感染BmNPV家蚕组织中的表达谱分析

Ras(rat sarcoma viral oncogene homolog)蛋白是GTPase超家族成员之一,该蛋白质可以将细胞外信号传导到不同的细胞,从而调控细胞的吞噬作用、凋亡、抗微生物侵染的酶防御系统等生理过程。运用RACE技术,从家蚕中肠中克隆出一个新的BmRas3基因,该基因cDNA全长987 bp,包含5′UTR(153 bp)、3′UTR(279 bp)和一个编码184个氨基酸残基的ORF(555 bp)。BmRas3具有小G蛋白的典型特征,其氨基酸序列中含有3个GTP/GDP结合结构域,1个效应子结合结构域以及1个烯丙基化的CAAX基序。多重比对发现BmRas3与海波斯莫科马属蛾(Hyposmocoma kahamanoa)Rap1、斜纹夜蛾(Spodoptera litura)Rap-1b、烟草天蛾(Manduca sexta)Rap1的序列相似性较高,系统进化分析也显示BmRas3与这些蛋白质的亲缘关系最近。BmRas3在食桑期的表达量高于眠期;在感染BmNPV的家蚕中肠和脂肪体中,BmRas3的表达量有不同程度提高,且与正常对照相比差异显著,暗示BmRas3可能...     

施用蝗虫微孢子对草原地上部分天敌群落多样性的影响

为明确蝗虫微孢子对蝗虫的持续控制,2015年在青海省开展了蝗虫微孢子防治草原蝗虫的试验和连续跟踪调查。结果表明,施用蝗虫微孢子前后温性和高寒草原蝗区天敌种类无明显变化,但部分天敌类群所占比例发生了变化,施用蝗虫微孢子2、3、4周后,温性草原中寄生蝇所占比例分别显著增加了330.6%、752.8%、752.8%,高寒草原中寄生蝇所占比例分别显著增加了108.1%、309.9%、310.8%,温性草原中芫菁所占比例分别显著下降了43.5%、45.5%、75.5%,高寒草原中芫菁所占比例分别显著下降了54.2%、77.2%、76.3%。施用蝗虫微孢子2、3和4周后,温性草原的Shannon指数比防治前分别显著增加了5.7%、7.0%、3.8%,Pielou指数比防治前分别显著增加了6.2%、6.2%、3.7%,Simpson指数比防治前分别显著增加了5.4%、6.8%、4.1%;施用蝗虫微孢子2周后,高寒草原的Shannon指数、Pielou指数和Simpson指数比防治前分别显著升高了4.8%、5.4%、3.8%,施用3周后,3个天敌群落多样性指数比防治前分别增加了1.8%、1.3%、2.2%,但Shannon指数和Simpson指数与防治前无显著差异,而Pielou指数比防治前显著增加,施用4周后,3个指数均与防治前无显著差异。施用蝗虫微孢子2、3和4周后,天敌群落布雷柯蒂斯距离与防治前差异显著,而重复样区间的布雷柯蒂斯距离在整个调查期无显著变化。表明蝗虫微孢子施用后对不同生态类型草原天敌群落多样性有一定的保护作用。     

荔枝害虫群落结构及其动态研究

以栽培品种ＮＣ８９为对照,通过室内饲养和组织切片,系统研究了转双基因抗虫烟草对烟夜蛾和小地老虎幼虫的抗性表现。结果表明,转双基因抗虫烟草对烟夜蛾幼虫具有稳定的杀虫作用,取食后２－３ｄ死亡,死亡率达１００％,不同龄期间表现一致;对小地老虎幼虫个有一定的杀虫作用,其抗性随龄期的增加而减弱,１龄死亡率为４８％,２龄为２８％,３龄以后死亡率为０,但对各龄幼虫的生长发育均具有明显的抑制作用。     

油菜菌核病菌的生物学特性研究

在不同温度、不同ｐＨ值的ＰＤＡ平板上培养油菜菌核病菌核和菌丝块,观察菌核萌发的最适温度和菌丝生长的最适温度、最适ｐＨ值,结果表明菌核萌发的最适温度为２４～２８℃,菌丝生长的最适温度为２０～２８℃,３５℃为菌丝的致死温度,菌丝生长的最适ｐＨ值为４.７～８.５。     

棘孢木霉菌肥对黄瓜枯萎病的防治效果及对连作黄瓜根际土壤微生物种群的影响

为明确棘孢木霉Trichoderma asperellum菌肥在防治黄瓜枯萎病的同时对连作黄瓜根际土壤微生物种群的影响,采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)和磷脂脂肪酸(phospholipid fatty acid,PLFA)分析方法分别测定了棘孢木霉菌肥对连作4年的黄瓜根际棘孢木霉菌和尖孢镰孢菌Fusarium oxysporum DNA拷贝数变化和黄瓜根际微生物种群的影响。结果表明:棘孢木霉菌肥对黄瓜幼苗期和速长期黄瓜枯萎病的防治效果分别为70.24%和76.81%,均与药剂对照的防效差异不显著。棘孢木霉菌的DNA拷贝数出现2个高峰期,即黄瓜苗期和盛果期,其DNA拷贝数分别为235 000.00 ng/μL和80 500.00 ng/μL。黄瓜速长期、盛果期、生长末期的尖孢镰孢菌DNA拷贝数分别为15.41、54.87和18.36 ng/μL,且显著低于同一时期药剂对照和清水对照。黄瓜幼苗期、速长期、开花期和盛果期根际土壤微生物丰度分别为2.24、1.98、2.52和2.12,均高于药剂对照。由此可见,棘孢木霉菌肥在防治黄瓜枯萎病的同时,还可以改善黄瓜连作土壤微生物种群结构。     

亚洲型舞毒蛾幼虫寄主选择与龄期关系初探

舞毒蛾是一种世界性的害虫,常被分为欧洲型和亚洲型2种类型,欧洲型舞毒蛾在传入美国之后造成了巨大危害。之前报道指出亚洲型舞毒蛾的寄主范围比欧洲型舞毒蛾的广,故造成的危害和损失更大,北美植物保护组织据此对中国的高风险港口实施了船舶特别检疫措施,对我国的进出口贸易产生了巨大影响。鉴于此,本实验以16种北美和中国常见的行道树种和绿化树种作为供试树种,分析了不同寄主植物对亚洲型舞毒蛾生长发育指标的影响规律。结果表明:饲喂白桦、加杨和糖槭的幼虫可以完成生活周期。饲喂杜松、女贞、大叶黄杨、红皮云杉、合欢、杂交鹅掌楸、马尾松、黑松和白皮松的幼虫在2龄以前全部死亡。虽然2龄以前幼虫饲喂北美乔松、油松和柿树后死亡率较高,但用人工饲料将幼虫饲养至4龄以后再替换饲喂以上3种植物,幼虫的死亡率则显著下降。分析表明,亚洲型舞毒蛾低龄幼虫(1、2龄)的寄主选择范围要窄于高龄幼虫(4龄以后的幼虫)。