串联表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5表位蛋白间接ELISA方法的建立

利用猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）GP5抗原表位串联表达重组蛋白作为包被抗原,建立检测PPRSV抗体的间接ELISA方法。重组蛋白最佳包被浓度为7.5 μg/mL,最佳封闭液为5%脱脂奶粉,37 ℃封闭2 h;血清最适稀释度为1∶100,37 ℃作用2 h;兔抗猪IgG/辣根酶（HRP）（1∶3000）,37 ℃作用2 h;37 ℃避光显色15 min读取D_{450 nm}值。结果经统计学分析得出,S/P值≥0.254为阳性,S/P值≤0.212为阴性。所建立的ELISA方法检测其他5种猪常见病原阳性血清,其D_{450 nm}值均小于0.212。利用建立的ELISA方法对临床免疫勃林格殷格翰猪繁殖与呼吸综合征活疫苗4周后的猪血清70份进行检测,其D_{450 nm}值均大于0.85,表明本研究建立的重组GP5表位蛋白间接ELISA方法可用于临床样品的监测。     

猪链球菌2型四川分离株猪体回归试验

选用35~38日龄的健康断奶仔猪21头,分3组,用2005四川分离株SSsc0501分别经静脉、肌肉注射和口服3种途径感染,进行猪体回归试验。肌肉注射组(含菌0.6×108个/mL)16 h开始出现症状,至36 h全部死亡,发病率、病死率均为100%;静脉注射组(含菌0.2×108个/mL)25 h开始出现症状,48 h内全部死亡,发病率和病死率均为100%;口服攻毒组(含菌2×108个/mL)90 h后开始有发病症状,第9天有1头死亡,发病率75%,病死率33%。从感染病死猪的肝脏、脾脏、肾脏、心血、大脑、脑脊液、淋巴结、肺脏和关节液中均分离到链球菌,经鉴定为试验攻毒的目的菌,表明猪体能够很好地用于猪链球菌2型动物感染模型,同时说明该菌侵害器官广泛,为进一步探讨该病的综合防制提供了重要技术依据。     

云南省昆明市动物园大肠杆菌分离株毒力基因分布特征

为研究云南省昆明市动物园动物体内大肠杆菌(E.coli)分离株毒力基因的分布特征,从圆通山动物园37个动物种群粪便中分离出37株E.coli,采用生化鉴定方法鉴定大肠杆菌,PCR方法检测19种毒力基因。鉴定结果表明:37株E.coli中,ompA、iroN、fimC、aatA、vat 5种毒力基因携带率分别为100%、95.49%、83.78%、70.27%、51.35%,ibeA、neuC、iutA、traT、stx 5种毒力基因携带率为0,其他9种毒力基因携带率均低于40.00%;分离菌株普遍携带8种以下毒力基因,同时携带10种以上毒力基因的概率为8.10%;分离株强毒力岛基因携带率较高,分布较为普遍。结果表明,昆明市圆通山动物园内流行的大肠杆菌以致病性大肠杆菌为主,不同种类动物体内大肠杆菌的毒力基因携带率存在较大差异,其原因可能与动物的饲养环境以及动物自身的适应能力和抵抗力有关。因此,对于动物园内具有较高大肠杆菌致病风险的动物,要采取相应防治措施,防止大肠杆菌病发生与流行。     

粪肠球菌替代抗生素对断奶仔猪生长性能、腹泻率、血液生化指标和免疫器官的影响

本试验在断奶仔猪饲粮中添加不同水平的粪肠球菌,研究其替代抗生素对断奶仔猪生长性能、腹泻指数和腹泻率、血液生化指标以及免疫器官的影响。选取120头(28±2)日龄平均体重为(7.60±0.81)kg的"杜×长×大"断奶仔猪,随机分为5组,每组6个重复(公母各占1/2),每个重复4头,每个重复为1圈。对照组饲喂基础饲粮,抗生素组在基础饲粮中添加100mg/kg硫酸黏菌素和400 mg/kg杆菌肽锌,3个粪肠球菌组分别在基础饲粮中添加40、200和1 000 mg/kg粪肠球菌,试验期31 d。试验结果显示:1)在1~14 d,饲粮中添加抗生素和粪肠球菌对断奶仔猪的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)以及料重比(F/G)无显著影响(P0.05)。在15~31 d,与对照组和抗生素组相比,200和1 000 mg/kg组可极显著提高ADFI和ADG(P0.01)。在1~31 d,与对照组相比,200和1 000 mg/kg组的ADFI均极显著提高(P0.01),而ADG分别显著和极显著增加(P0.05和P0.01);与抗生素组相比,1 000 mg/kg组可极显著提高ADFI(P0.01),而200和1 000 mg/kg组的ADG分别显著和极显著增加(P0.05和P0.01)。2)在1~14 d,与对照组相比,40 mg/kg组的腹泻指数和腹泻率显著降低(P0.05)。在15~31 d和1~31 d,与对照组和抗生素组相比,40和1 000 mg/kg组均可在一定程度上降低腹泻率(P0.05)。3)与对照组相比,粪肠球菌可以显著提高血液中总蛋白含量(P0.05),其中200和1 000 mg/kg组达到极显著水平(P0.01),且这2组分别可以显著和极显著提高球蛋白含量(P0.05和P0.01)。与抗生素组相比,200和1 000 mg/kg组可以显著提高总蛋白含量(P0.05)。与对照组相比,抗生素组和1 000 mg/kg组的白球比显著降低(P0.05),另外,抗生素组血液中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性显著降低(P0.05),200 mg/kg组的谷丙转氨酶活性显著降低(P0.05)。4)与对照组相比,1 000 mg/kg组的肝脏重量和脾脏指数有一定程度的提高(P0.05),与抗生素组相比,200和1 000 mg/kg组可显著提高肝脏重量(P0.05)。结果表明,饲粮中添加粪肠球菌可改善断奶仔猪的生长性能(饲喂15~31 d),降低腹泻率,提高仔猪免疫力,其中添加量为1 000 mg/kg时效果最好。     

Pathogenicity in quails and mice of H5N1 highly pathogenic avian influenza viruses isolated from ducks

In our study, the pathogenicity of H5N1 influenza A viruses circulating in waterfowls in Southern China was investigated. Three H5N1 highly pathogenic avian influenza (HPAI) viruses isolated from ducks, A/Duck/Guangdong/383/2008(DK383), A/Duck/Guangdong/378/2008(DK378) and A/Duck/Guangdong/212/2004(DK212) were inoculated at 10(6) fifty-percent egg infectious doses (EID(50)) into ducks, quails and mice and showed varying levels of pathogenicity. In ducks, the mortality rates ranged from 0 to 60% and the mean death time (MDT) was 0-6.7 days post-inoculation (DPI). While the viruses were highly pathogenic in quails, resulting in 83.3-100% mortality and the MDT of 2.3-3 DPI, they were completely lethal in mice (100% mortality). The viruses replicated in many organs of ducks and quails and were found in the brain, and kidney, lung and spleen of the mice. Phylogenetic analysis revealed that DK383 and DK378 viruses of clade 2.3.2 belonged to genotype 11, while DK212 virus of clade 9 was genotype 3. Our study illustrated H5N1 influenza viruses within Clade 2.3.2 and 9 from duck in Southern China had very highly pathogenicity to Japanese quails and BALB/c mice, but viruses within Clade 2.3.2 had more highly lethality than those of clade 9 to Muscovy ducks. Therefore, they had posed a continued challenge for disease control and public health.     

饲喂IgG对仔猪血液生化指标和生产性能的影响

试验分两批选用 12 0 ,6 0头大白仔猪 ,出生 2 4h之内饲喂不同剂量的免疫球蛋白制剂 0 ,4 80 ,96 0mg ,均吮食初乳。于仔猪 5 ,10 ,15日龄前腔静脉采血 ,测定血清总蛋白、血清IgG、血清碱性磷酸酶和血红蛋白含量 ,并测定仔猪断奶时增重 ,哺乳前、后期平均日增重。结果表明 :饲喂不同水平的IgG ,仔猪 5 ,10日龄血清总蛋白、血清碱性磷酸酶活性和血红蛋白含量均显著高于对照组 (P <0 0 5 )。饲喂高水平IgG(96 0mg)的仔猪 ,5日龄血清IgG水平显著高于对照组 (P <0 0 5 )。哺乳前期 (0～ 15日龄 )各处理组仔猪平均日增重显著高对照组 (P <0 0 5 ) ,断奶时增重也显著高于对照组 (P <0 0 5 )。     

行业媒体的"特别贡献"纪念中国饲料工业协会成立20周年

改革开放以来,我国的饲料工业发展之快、之好,举世惊叹。在纪念中国饲料工业协会成立20周年的时候,人们自然不会忘记行业协会为促进饲料工业发展所做的重大贡献。在讲到中国饲料工业协会的贡献时,人们也自然不会忘记她的媒体立下的汗马功劳,不会忘记行业媒体所做的特别贡献。所     

盐水灌溉对不同暖季型草坪草蒸散量的影响

草坪蒸散量是指导草坪合理灌溉的重要指标。以7属11种共13份暖季型草坪草品种（种源）为材料,采用盆栽结合盐水（20 g· L^-1 NaCl）灌溉的方法,研究盐胁迫对其蒸散量的影响及与抗盐性的关系。结果表明：对照和盐胁迫条件下,草种间蒸散量均有显著差异。对照条件下,草种间的日均蒸散量变异系数为22.28%,日均蒸散量最高为‘Pan1’巴哈雀稗（Paspalum notatum）（5.71 mm·d^-1）,最低为‘南京’狗牙根（Cynodon dactylon）（2.77 mm·d^-1）。盐水灌溉条件下,草种间的日均蒸散量变异系数为36.05%,明显高于对照,不同草种的日均蒸散量排序为：‘Diamond’沟叶结缕草（Zoysia materlla）（3.87 mm·d^-1）>‘S004’钝叶草（Stenotaphrum secundatum）（2.90 mm·d^-1）>‘兰引3号’结缕草（Zoysia japonica）（2.34 mm·d^-1）>‘Z080’结缕草（2.25 mm·d^-1）>‘Adalayd’海雀稗（P.varginatum）（2.20 mm·d^-1）>‘P011’双穗雀稗（P.distichum）（2.17 mm·d^-1）>‘南京’狗牙根（2.10 mm·d^-1）>‘Tifway’杂交狗牙根（2.00 mm·d^-1）>‘Pan1’巴哈雀稗（1.90 mm·d^-1）>‘B003’野牛草（Buchloe dactyloides）（1.84 mm·d^-1）>‘H001’牛鞭草（Hemarthria sibirica）（1.61 mm·d^-1）>‘E126’假俭草（Eremochloa ophiuroides）（1.57 mm·d^-1）>‘TifBliar’假俭草（1.50 mm·d^-1）。除‘Diamond’沟叶结缕草外,盐水灌溉下参试草种的蒸散量均有一定程度的降低,降幅从15.29%（‘S004’钝叶草）到66.74%（‘Pan1’巴哈雀稗）。相关性分析表明,盐处理下草坪草的蒸散量与草种的抗盐性成正相关。     

表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因的重组鸭瘟病毒的构建

利用PCR技术扩增出鸭瘟病毒(DPV)生长非必需区的TK基因(约2.5kb),将其克隆入pUC19载体获得载体puDTK。根据已知载体pcDNA-LacZ的序列设计了一对引物,PCR扩增出pcDNA-LacZ上含CMV启动子、多克隆位点、SV40及LacZ的完整的基因表达盒插入puDTK的TK上,获得质粒puDTCL。根据Genbank已发表的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因序列,设计引物从T-HA质粒上扩增出HA基因,克隆到puDTCL的表达盒的多克隆位点NheI与ApaI之间,成功构建含LacZ及HA基因的转移载体质粒puDTCL-HA。将这载体质粒与DPV34F2疫苗毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经蓝斑克隆筛选和纯化,获得了遗传性状稳定的表达HA基因的重组鸭瘟病毒。     

屠宰环节检疫检验印章印油使用现状及问题分析

本文调研并整理了屠宰环节现行有效的检疫检验印章种类及印油的使用情况,分析了实际应用中存在的问题和潜在风险,并就进一步规范屠宰环节检疫检验印章及印油的使用和管理提出了建议。