多种动物血清中生物活性LH/CG的放射受体测定法(RRA)

利用绵羊卵巢黄体细胞膜作为 LH / CG受体来源 ,以放射性12 5 I- h CG作为示踪标记配体 ,以高纯度的h CG为标准品建立标准曲线 ,建立了一种有效的 LH- RRA测定方法。它能够直接检测多种动物血清中与受体结合的具有生物活性的 LH的动态变化。该法测定程序简单 ,在 2 h内完成并获得可重复性结果。测定方法的灵敏度为 0 .3ng/管 ,批内和批间误差分别为 ( 3.4 1± 3.14 ) %和 ( 8.70± 7.93) %。动物 (牛、兔、猪 )垂体液中 LH含量反应曲线和 h CG标准曲线平行良好。牛、羊、猪、兔、鼠和仓鼠血清中 LH的剂量反应曲线和h CG标准曲线的平行性表明 ,该 LH- RRA可以用来检测不同动物血清中的具有生物活性的 LH变化。回收试验表明 ,在该测定方法中加入 3、10、30 ng h CG时的回收率分别为 ( 10 0 .59± 5.55) %、( 99.55± 9.86 ) %、( 10 4 .2 8± 7.4 5) %,说明测定结果的正确性。该 LH - RRA的测定结果反映了动物正常的生理状态。本试验垂体中有活性的 LH水平远远高于外周循环中的水平 ,雌、雄动物循环血液中的 LH含量不一致。     

重组白介素-2增强口蹄疫病毒多表位疫苗免疫效果研究

通过研究重组白细胞介素-2（IL-2）对口蹄疫病毒（FMDV）多表位疫苗免疫效果的增强作用,为IL-2作为 FMDV 表位疫苗佐剂应用提供实验依据。6周龄雌性 Balb／c 小鼠,分为4组,第1组联合免疫表达猪 IL-2的重组腺病毒（rAd5poIL-2）和串联表达 FMDV 多表位基因的重组腺病毒（rAd5EGS）,第2、3和4组分别注射 rAd5EGS、灭活疫苗和 PBS,间隔2周免疫1次,共免疫3次。首免后每周采血分离小鼠血清,通过 ELISA 检测血清中特异性 IgG;首免后6周检测血清中抗体亚型 IgG1、IgG2a 及细胞因子 IL-4和 IFN-γ的表达水平,同时分离脾细胞,MTT 法检测淋巴细胞增殖指数。结果显示,联合免疫 rAd5poIL-2和rAd5EGS 既能增强 rAd5EGS 诱导小鼠特异性 IgG、IgG1和 IgG2a 的分泌,又能增强其诱导淋巴细胞增殖能力,且免疫效果强于灭活疫苗;细胞因子检测结果显示,联合免疫 rAd5poIL-2后能增强 rAd5EGS 诱导小鼠 IL-4和 IFN-γ的分泌,且其诱导 IL-4和 IFN-γ分泌能力也强于灭活疫苗。说明重组 IL-2能有效增强FMDV 多表位疫苗诱导抗体分泌能力和细胞免疫应答,rAd5poIL-2有望作为 FMDV 表位疫苗的候选佐剂。     

牛消化道Ⅰ型肽载体克隆测序及编码蛋白结构分析

从牛瓣胃上皮提取RNA,根据已知的人、鼠、兔、羊PepT1序列设计引物,PCR扩增目的片段cDNA,扩增产物经纯化、克隆后测序.克隆测序片段为1566 bp(DQ309694),与其它动物已知PepT1序列比对,发现该片段位于第3～10跨膜结构域之间.牛测定序列与人、鼠、兔、羊、狗、鸡和猪PepT1相应片段核苷酸序列同源性分别为82.89%、80.14%、78.93%、96.04%、83.08%、63.90%和85.66%,相应片段氨基酸序列同源性分别为81.45%,79.62%、76.25%、94.06%、81.49%、61.41%和83.56%.对8种动物(牛、人、鼠、兔、羊、狗、鸡、猪)测序片段内氨基酸序列同源性分析表明,PepT1是高度保守的蛋白,其中跨膜结构域的氨基酸序列保守性高于膜外环.8种动物PepTl测序片段内各跨膜结构域的氨基酸序列同源性均在90%以上,第3、4、 5 6、7,8,9和10跨膜结构域的氨基酸序列同源性分别为90.97%、91.07%、97.62%、93.45%、94.05%、91.67%、91.45%和95.83%.8种动物测序片段内膜外环的氨基酸序列同源性在70%～99%之间,以第4-5跨膜结构域之间膜外环的同源性最高,9-10跨膜结构域之间膜外环的同源性最低,3-4、4-5、5-6,6-7、7-8、8-9、9-10跨膜结构域之间膜外环的氨基酸序列同源性分别为77.63%、98.86%、86.72%、90.13%、91.25%、88.33%和71.74%.9-10结构域之间是1个位于细胞外的大膜外环,可能对底物的识别有重要作用,牛在此区域与鸡相同区域的氨基酸序列同源性仅为29.3%,与大鼠,狗、人、兔、猪和羊相应序列的同源性依次为65.17%、71.64%、67.16%、60.20%、73.13%和88.56%.对测序BPepT1片段编码蛋白的糖基化和磷酸化位点分析表明,测序片段编码蛋白共有6个N-糖基化位点和3个蛋白激酶C依赖性(PKC)磷酸化位点.     

微量元素硒的类胰岛素作用研究进展

近年来随着硒与糖尿病关系研究的不断深入,人们发现硒在促进细胞对葡萄糖的摄入、糖代谢以及信号传导等方面都具有类胰岛素作用,但其有效剂量接近于毒性剂量,故出于安全性的考虑并不适用于人体。作者在对硒的类胰岛素作用研究进行综述的基础上,深入探讨了硒在糖代谢中的调控机制,为利用硒调控畜禽应激状态下的糖代谢紊乱提供参考。     

鸭IFIT5基因(544G>A)多态性与部分免疫指标的关联分析

探索IFIT5基因作为抗性性状的候选标记的可能性,为家禽抗病育种提供一些参考依据。以樱桃谷北京鸭、苏牧麻鸭(樱桃谷鸭×金定鸭)、金定鸭、白羽番鸭为试验材料,利用DNA直接测序技术扫描IFIT5基因单核苷酸多态性(SNP),并分析其与部分免疫指标的关联性。结果表明:仅在IFIT5基因外显子2上检测到一个错义突变(G544A),产生2种等位基因,2种基因型(GG、GA),未发现有AA基因型。经χ2检验,4个鸭群体只有金定鸭和苏牧麻鸭处于Hardy-Weinberg平衡状态。关联分析结果显示:樱桃谷鸭体内H5含量GG型显著高于GA型(P0.05),而Ig M含量GG型显著低于GA型(P0.05),其余免疫指标均无显著差异(P0.05);苏牧麻鸭体内H5含量GG型极显著高于GA型(P0.01),其余免疫指标均无显著差异(P0.05);金定鸭不同基因型各免疫指标均无显著差异(P0.05)。白羽番鸭在+544位点均为GG纯合基因型。由此可以看出,IFIT5(544GA)可作为樱桃谷鸭体内H5含量的候选分子标记。     

达乌尔黄鼠线粒体Cyt b基因序列特征及其系统进化分析

在甘肃省天祝藏族自治县采集12只达乌尔黄鼠(Spermophilus dauricus),PCR产物直接测序获得Cyt b基因1140bp序列,采用Clustal X 1.84、MEGA 6.0、Dna SP 5.0等生物信息学软件进行了序列特征和系统地位分析。结果显示,达乌尔黄鼠Cyt b基因含116个多态信息位点,群体中多态位点类型有转换、颠换,Cyt b基因T,C,A,G碱基含量分别为33.7%,25.9%,27.6%,12.9%。基于Kimura双参数的遗传距离显示,属内种间大黄鼠(Spermophilus major)与新疆黄鼠(Spermophilus fulvus)间遗传距离最小(0.034),高加索黄鼠(Spermophilus musicus)与达乌尔黄鼠最大(0.172),达乌尔黄鼠群体内遗传距离为0.140,种群分化较大,基于NJ法构建的系统进化树符合传统分类标准,研究为达乌尔黄鼠Cyt b基因标记的种群遗传学应用提供了参考。     

草食畜牧业在桂西北喀斯特环境移民地区的作用--以环江毛南族自治县为例

本文以环江毛南族自治县为例介绍了桂西北喀斯特山区生态与经济状况,阐明在喀斯特移民地区发展草食畜牧业对改善生态环境与解决贫穷问题的重要性,分析了当前发展草食畜牧业存在的问题,并提出解决方案。     

春秋兼用家蚕品种“渝蚕1号”的育成

采用杂交育种和系统选择的方法,育成优良家蚕新品种中4、C106、日5,并与引进品种皓月组配成中4.C106×皓月.日5(渝蚕1号)的四元杂交组合。经四川省蚕品种审定的实验室鉴定和农村鉴定,该品种表现出强健、好养、发育整齐、茧丝质优良等特点,全茧量2.45 g、茧层率23.27%、解舒率75.22%,主要经济指标超过对照种。该品种已通过四川省家蚕品种审定,并在生产上试繁推广。     

小尾寒羊科研与生产概况及前景展望

本文从小尾寒羊的生长性能、繁殖率、肉用品质,营养需要量及杂交利用等方面,回顾了自上世纪90年代后的研究进展与生产现状,浅析了小尾寒羊的发展前景。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒SDZP P126株GP2基因序列分析及其对病毒增殖的影响

旨在研究1株连续传代的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) SDZP P126 GP2基因的变异情况,以及GP2对病毒增殖的影响。构建GP2基因全长真核载体pEGFP-N1-GP2,利用生物学软件对GP2基因进行核苷酸和氨基酸的同源性分析,并将重组质粒pEGFP-N1-GP2转染到Marc-145细胞上,接毒后检测对病毒增殖的影响。通过GP2基因核苷酸和氨基酸的同源性分析,发现9个碱基的突变,这9个碱基的突变导致了5个氨基酸的突变。其中氨基酸序列中的第10位由亮氨酸突变为苯丙氨酸,这一突变在多株致弱毒株中存在,在Marc-145细胞转染重组质粒pEGFP-N1-GP2对病毒的增殖无显著影响。初步推断SDZP P126 GP2基因的突变对病毒在Marc-145细胞上增殖没有影响。