鸡贫血病病毒套式PCR检测方法的建立及应用

鸡贫血病病毒不仅引起鸡的传染性贫血 ,而且也是引起鸡免疫抑制病的主要病原。本研究首次在国内建立了鸡贫血病病毒的套式PCR检测方法。试验证明此方法具有高度的特异性和敏感性 ,以鸡马立克氏病毒、鸡网状内皮组织增生病毒、鸡传染性法氏囊病毒、正常MDCC_MSB1细胞DNA作为模板扩增时均未出现可见带 ,在检测鸡的各种组织病料时均未出现假阳性结果 ,该法比一次性PCR的敏感性高约 1 0 0 0倍 ,能检测到约一个拷贝的鸡贫血病病毒DNA ,而一次性PCR只能检测到3.6× 1 0 3 个拷贝。此方法已成功地应用于临床试验。对于鸡贫血病毒的许多鸡胚分离物和细胞分离物 ,一次性PCR不能扩增出可见电泳条带 ,而套式PCR都能扩增出特异的DNA片段 ,从而说明 ,套式PCR的敏感性大大高于一次性PCR ,可消除一次性PCR产生的假阴性结果     

13种蒲公英属植物核型似近系数聚类分析

为探究蒲公英属植物亲缘关系,本研究对13种蒲公英属（Taraxacum. F. H. Wigg.）植物进行了核型似近系数聚类分析,并计算了物种间遗传距离。结果表明：当核型似近系数接近0.6960时,13种蒲公英可以聚为4大类群;当核型似近系数接近0.4641时,13种蒲公英共属一类。异苞蒲公英与狭戟片蒲公英的亲缘关系最近,其似近系数最大,为0.9969,核型进化距离最小,为0.0031;多裂蒲公英和亚洲蒲公英的亲缘关系最远,似近系数为0.3343,核型进化距离为1.0959。本研究结果为蒲公英属植物的亲缘关系辨析、种质鉴定及物种进化分析提供依据。     

犬黄体功能调控机制研究进展

犬黄体具有异于其他家畜的生理结构和功能表现,其中最特别的是犬缺乏急性黄体溶解机制。犬黄体发生过程受催乳素、促黄体素和前列腺素E₂的复杂调控,溶解退化过程则对其他家畜主要的溶黄体激素--前列腺素F_2α不敏感。而黄体的存留对母犬的生殖活动却具有重要的意义,其自分泌或旁分泌的类固醇激素也在妊娠调控和发情周期的更迭中发挥重要作用。犬黄体的退化机制尚未明确,但国外已有包括被动退化在内的诸多假说。此外,黄体是为数不多具有完整生命周期的功能性组织（或器官）,其发生过程、功能实现和衰老溶解都在周而复始地进行,这对炎症反应、癌症发生和细胞凋亡等研究都具有重要的参考价值。作者综述了犬黄体的发生和退化过程中调控机制的研究进展,旨在为进一步深入研究犬黄体发生和退化的分子机制提供研究背景和理论依据。     

东祁连山高寒草地生态系统N、P养分含量研究

对东祁连山高寒草地生态系统N、P养分在土壤和植被中含量分布规律进行了研究。结果表明（1）在东祁连山高寒草地生态系统中,两种养分的总含量分布规律为沼泽草地型（ZZ）嵩草草地型（SC）〉珠芽蓼-嵩草草地型（Z＋S）〉禾草草地型（HC）,两种养分储量分别为N497．04kg／hm^2,P31．71kg／hm^2;生物量与养分储量分布规律一致;（2）东祁连山高寒草地±0～20cm土壤中,N、P储量分别为43．03t／hm^2和2．72t／hm^2;（3）在东祁连山高寒草地生态系统中,土壤养分库是东祁连山高寒草地生态系统的主要养分储存库。     

饲粮结构对山羊消化系统尿素转运蛋白-B表达的影响

本试验旨在研究饲粮结构对山羊消化系统尿素转运蛋白-B(UT-B)表达的影响。选用18只装有永久性瘤胃瘘管的内蒙古白绒山羊半同胞羯羊,随机分为6组(每组3个重复,每个重复1只羊),45d后每组随机屠宰1只山羊,采用蛋白质印迹分析所采集的样品中UT-B的表达情况,并对34ku UT-B进行相对定量分析。结果表明:所有样品表达的UT-B处于30～55ku且均含有34ku的UT-B;饲粮高蛋白质水平可提高前胃(瘤胃、网胃和瓣胃)、回肠、盲肠盲囊和肾脏中34ku UT-B的表达;玉米膨化加工减少了34ku UT-B在回肠和肝脏的表达;各组织中34ku UT-B分布由高到低依次为肝脏、皱胃、网胃、瘤胃背囊、瘤胃腹囊、腮腺、瓣胃、十二直肠、盲肠、盲肠盲囊、回肠和肾脏。由此可知,通过改变饲粮结构可以调控山羊消化系统各组织中UT-B的表达,为进一步研究尿素循环和机体氮代谢提供依据。     

IBRV重组gD蛋白的真核表达与间接ELISA检测方法的建立

通过优化牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）gD基因序列为Sf9细胞偏好密码子,转座形成穿梭载体,将质粒瞬时转染Sf9昆虫细胞,利用昆虫杆状病毒表达系统表达纯化重组IBRV gD蛋白;以制备的重组IBRV gD蛋白为包被抗原,建立检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法,并通过比对检测已知血清中和抗体效价的牛血清,验证所建立的间接ELISA方法的敏感性、特异性与重复性等指标。结果显示：本研究建立的间接ELISA方法对相关的牛病毒血清抗体无交叉反应,敏感性可达1:512,组内和组间变异系数均低于10%;使用建立的间接ELISA检测方法结合血清中和试验,对480份临床血清样品进行检测,发现两者敏感性符合率为98.18%,特异性符合率为93.33%,总符合率为96.67%。结果表明,本研究建立的检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可开发为临床适应的检测试剂盒。     

不同封育年限对宁夏荒漠草原土壤粒径及碳氮储量的影响

封育禁牧的时间效应已经成为科学和政府决策关注的焦点,研究以宁夏盐池县典型荒漠草原围封6、10、15年样地的围栏内外2种主要土壤类型——灰钙土和风沙土为研究对象,基于样线调查法及方差分析法,探究不同封育年限对荒漠草原颗粒组成及土壤碳氮储量的影响。结果表明:1)封育会导致灰钙土及风沙土土壤细颗粒含量增加,灰钙土封育6年样地土壤细颗粒较围栏外增加量最明显,后随封育年限的增加而呈现增幅减少的趋势;风沙土封育15年样地围栏内土壤细颗粒增加量高于封育6年样地。2)灰钙土及风沙土封育6年样地均表现为围栏内土壤碳氮(有机碳、全碳、全氮)含量高于围栏外,而围封10年及15年样地围栏内外土壤碳氮含量没有明显差异。3)灰钙土围封6年样地围栏内土壤碳氮比高于围栏外,而围封10年及15年样地无此规律,围封不会影响风沙土土壤碳氮比。围封可以有效使土壤颗粒细化,但不同土质对封育年限的响应有所差异,人工封育的最佳时间尺度应根据草原退化程度和草原不同土壤条件而定。     

2018年中国部分地区猪瘟病毒2.1d亚型新流行株的基因组特征分析

为了解中国猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）的分子流行病学及遗传变异情况,本研究应用RT-PCR方法对2018年采集自河南、河北、山东、黑龙江和辽宁5个省份的350份疑似CSFV感染的病料进行E2和NS5B基因扩增,并对PCR产物进行测序和序列分析。结果显示,350份样品中21份为CSFV阳性,共获得14株CSFV的E2基因序列和7株CSFV的部分NS5B基因序列。E2全基因、NS5B部分基因序列分析表明,21份阳性样品均属于近年来在中国流行的CSFV 2.1d亚型,且新发现的2.1d亚型CSFV与中国较早2.1d亚型CSFV毒株间同源性差异不大,新发现的2.1d亚型CSFV分离株在E2基因的6个氨基酸（R³¹、S³⁴、W¹⁸²、K²⁰⁵、K³⁰³、A³³¹）上具有相同的分子特征,E2蛋白中15个位点上的半胱氨酸均未发生变异。韩国2.1d亚型CSFV在E2蛋白上具有3个独特的氨基酸（N⁹⁷、K¹⁵⁹、R²⁰⁵）特征,并且发现了韩国毒株YC11WB可能作为2.1b和2.1d亚型CSFV过渡毒株的证据,流行于中国和韩国的2.1d亚型CSFV可能分别来自于本国早期2.1b亚型CSFV的衍化。本研究证实,2018年中国及周边国家CSFV较为活跃,且流行毒株依然以2.1d亚型为主,为中国科学防控CSFV提供了依据。