牛传染性鼻气管炎病毒gD基因截短表达及其抗血清制备

gD糖蛋白是IBRV感染细胞的主要分子,在病毒吸附和侵入宿主细胞中发挥着重要作用。利用IBRV基因组DNA为模板,经生物学软件DNAstar分析主要抗原区,PCR扩增gD基因786bp片段,定向连接到pET32a(+)表达载体中,筛选阳性克隆转化BL21(DE3)表达菌中,IPTG诱导表达部分可溶的重组蛋白。Ni-NTA非变性纯化系统纯化蛋白,纯化的蛋白免疫新西兰兔制备抗血清,利用间接ELISA法检测抗血清效价为1∶6400;同时以该血清进行血清中和病毒实验,中和指数为1∶640,显示该抗血清具有良好的抗病毒能力,为进一步开发牛传染性鼻气管炎(IBR)的诊断检测试剂和疫苗奠定了重要基础。     

磷胁迫下蔗糖对水稻苗期根适应性和磷酸转运蛋白基因表达的影响

磷是植物生长和发育中最重要的必须元素之一。尽管土壤中磷资源很丰富,但大部分磷是以植物不能吸收利用的固定态和有机态存在,特别是以酸性土壤为主的南方稻田,水稻缺磷现象非常严重。理解和掌握水稻对低磷的适应机制有助于利用分子手段培育磷高效利用水稻品种。为阐明蔗糖提高水稻耐低磷的机制,本研究对水稻幼苗进行不同磷、糖处理,分析水稻幼苗在不同磷糖配比培养基中的根系结构、无机磷、酸性磷酸酶活性的变化,并利用定量RT-PCR技术分析水稻磷酸转运蛋白基因(OsPT)和酸性磷酸酶基因(OsSAP1)的表达。试验设2个磷浓度:无磷和85 mg·L?1KH2PO4,2个蔗糖浓度:无糖和3%蔗糖,正交设计。结果表明,在低磷胁迫时添加蔗糖,能使水稻幼苗的根总长度、总根数、根冠比显著增加,根分泌的酸性磷酸酶活性降低,但水稻体内的磷酸转运酶活性提高。11个与磷具有高度亲和力的磷酸转运酶的表达发生了改变,其中根优势表达的4个基因OsPT2、OsPT3、OsPT4、OsPT6对磷、糖的影响最为敏感,暗示了蔗糖是通过调节磷转运蛋白维持磷的吸收和平衡。增加根系的蔗糖分配能够提高水稻幼苗对磷胁迫的耐受性。     

不同植被恢复模式下呼伦贝尔沙地土壤反硝化细菌nirK基因组成结构和多样性研究

本研究选取呼伦贝尔沙地5种植被恢复模式(单播冰草、单播羊柴、单播柠条、冰草+柠条和冰草+柠条+羊柴+披碱草)为研究对象,以完全退化的沙地为对照,采用分子生物学技术分析了土壤反硝化细菌nirK基因组成结构和多样性,并探讨了与土壤理化因子的相关性。结果表明,土壤反硝化细菌nirK基因组成存在明显差异。单播羊柴模式土壤反硝化细菌nirK基因多样性指数最高,其次为单播冰草和单播柠条,而两种混播模式最低,这5种植被恢复模式均显著高于对照裸地。序列和系统发育分析结果表明,所获得的nirK基因片段与NCBI数据库中的nirK基因的相似度在81%99%之间,分别归属于苍白杆菌属、根瘤菌属及不可培养的细菌,其中与不可培养细菌相关的片段占到总数的50%以上。典范对应和相关分析结果表明,速效磷、pH、全氮、全磷和含水量对反硝化细菌的影响均达到显著水平,且5种理化因子间均具有极显著相关性,说明这5种理化因子相互关联,共同对反硝化细菌nirK基因组成变化起到决定作用。     

血粉膨化机的设计

禽畜血液富含粗蛋白，目前常用的加工方法如喷雾干燥法，发酵法等存在产品消化率低，投资较大等问题，膨化处理能提高蛋白消化率。但血粉比淀粉类原料难膨化，存在着设计上的特殊性。本文在理论分析及试验结果的基础上，对膨化机的特殊结构及尺寸设计进行了分析。实际应用表明该设计基本解决了技术及工艺问题。     

凉山烟区土壤养分分析及施肥对策

对凉山不同烟区植烟土壤养分含量进行了综合评价分析,明确了土壤养分含量与土壤有机质和pH值的相关关系。结果表明:(1)凉山烟区土壤有机质含量中等偏丰富;氮含量中等偏低;北部烟区磷含量中等,南部烟区磷含量中等偏低;北部烟区钾含量偏低,南部烟区钾含量中等偏丰富;氯、硼含量偏低;铜、锌、铁、锰含量呈中等偏丰富水平;北部烟区钙含量中等偏低,南部烟区钙含量丰富;北部烟区镁含量中等偏低,南部烟区镁含量中等偏丰富;北部烟区阳离子交换量偏低,南部烟区阳离子交换量中等;北部烟区土壤偏酸性,南部烟区各约有1/3的土壤偏酸性和偏碱性。(2)氯、钙、镁、锰与有机质含量呈负相关关系,其余养分含量与有机质呈正相关关系;钙、镁与土壤pH值呈正相关关系,其余养分含量与土壤pH值呈负相关关系。并针对该烟区植烟土壤养分状况提出施肥建议。     

种植水稻和长期施用无机肥对红壤氨氧化细菌多样性和硝化作用的影响

以中国科学院红壤生态试验站发育于第四纪红黏土的植稻红壤为研究对象,研究了长期种植水稻和施用无机肥对土壤β-变形杆菌纲中氨氧化细菌多样性和硝化作用的影响。原始红壤改种水稻13年后,氨氧化细菌16SrDNA的DGGE条带数量增加,条带谱与原始红壤的差异较大,相似性为61%,说明种植水稻后土壤氨氧化细菌群落结构发生了变化。PCR-DGGE方法研究结果也显示,长期施用无机氮肥的处理(NP、NPK和NK),DGGE带谱相似性较高,达到73%,硝化率和硝化势均高于未施用氮肥的处理。逐步回归分析显示硝化率和硝化势均随着土壤脲酶活性的提高而显著增加。推测尿素可提高土壤水解氮含量,使土壤脲酶活性提高,促进硝化细菌的生长,进而提高硝化率和硝化势。     

桃分子连锁图谱的构建

为建立桃的高质量遗传图谱,进一步研究桃的遗传标记,获得与桃农艺性状紧密连锁的分子标记以及更多更可靠的数量性状标记(QTLs)打下基础并提供保障,以油桃品种秦光2号和曙光的91株正交F1代为试材,用Join-Map3.0软件的CP作图模型构建了桃的AFLP分子标记遗传连锁图谱。该图谱覆盖桃基因组1034cM,共计122个AFLP标记和2个质量性状标记(核黏离性状Ff和果肉颜色性状Yy)定位于11个连锁群上,连锁群的平均长度为94cM,每个连锁群包含2～23个标记,标记间平均距离为8.34cM。     

桦褐孔菌发酵液提取物小鼠体内抗H_(22)肝癌的作用

为确定桦褐孔菌发酵液提取物的毒性级别,研究对H22肝癌小鼠的抗肿瘤及免疫调节作用。依据2004年实施的《急性毒性试验国家标准》进行急性毒性研究和级别鉴定,同时建立H22肝癌的荷瘤小鼠模型进行小鼠体内抗肿瘤的研究,并采用MTT法检测荷瘤小鼠自然杀伤细胞活性(NK)及T淋巴细胞增殖情况。结果表明,桦褐孔菌发酵液提取物(IOFE)的LD50为15.02 g·kg-115 g·kg-1,属无毒级别。与阴性对照和阳性对照比,体重、采食量均稳定增长,抑瘤率为44.25%,可显著提高NK细胞活性67.13%(p0.01),但对T淋巴细胞增殖率效果不明显。桦褐孔菌发酵液提取物具有较好的抗肿瘤作用,且毒性极低,抗肿瘤作用可能是通过提高机体免疫活性尤其是NK细胞的杀伤活性实现的。     

基于趋势面模拟的城市用水量分析及预测

以山西省某市1999-2009年城市用水量为因变量,该市城镇化水平和GDP为自变量,建立了城市用水量变化趋势面模型,比较了不同阶次趋势面模型的拟合程度,并绘制了趋势面和残差等值线图.经分析得出,该市城市用水量与城镇化水平、经济状况等因素密切相关,并可通过预测将来某年的城镇化水平和GDP,进而预测所研究年份的城市用水量.     

不同硼水平对烤烟干物质累积和氮磷钾吸收的影响

研究了不同硼浓度下烤烟干物质累积和氮磷钾养分的吸收特点。结果表明,不同硼浓度下烤烟干物质累积和氮磷钾吸收动态均可用Logistic方程描述。硼浓度为0～2.00 mg/L时,各处理烤烟的干物质累积量及氮磷钾吸收量均随着硼浓度的增加而逐渐增加;硼浓度为200～400 mg/L时,各处理烤烟的干物质累积量和氮磷钾吸收量则随着硼浓度的增加而逐渐减少。就烤烟氮磷钾最大累积速率而言,各施硼水平下最大养分累积速率均以钾素最高,氮素其次,磷素的累积速率最低,且硼浓度为0.25～2.00 mg/L的各处理烤烟干物质和氮磷钾养分最大累积速率均高于其他3个处理。就烤烟氮磷钾最大累积速率出现的时间而言,3种元素各不一致,基本表现为硼浓度为0.25～2.00 mg/L各处理烤烟干物质和氮磷钾养分最大累积速率出现时间均晚于其他3个处理。