Evaluation of Therapeutic Effect of Porcine β-defensin-2 on Streptococcus suis Infection

Defensin is a small cationic peptide widely distributed in animals and plants. It is an important component of the innate immune defense system of mammals. It has a broad spectrum of antibacterial, antiviral and antifungal activities. Porcine β-defensin-2 (PBD-2) is one of the natural defensins expressed in pigs and has good antibacterial activity in vitro. The purpose of this study is to evaluate the therapeutic effect of PBD-2 in the treatment of Streptococcus suis infection in animals and to provide more insights for evaluating the value of PBD-2 as a therapeutic drug. Firstly, the bactericidal activity of PBD-2 against S. suis clinical isolate SC-19 was measured in vitro, and the cytotoxicity of PBD-2 was tested on mouse-derived macrophages (RAW264.7). Subsequently, C57 female mice aged 4-6 weeks and weighing between 18-22 g infected with S. suis SC-19 were treated with PBD-2 or PBS (n ≥ 6). The survival rate of mice, and the bacteria loads, inflammatory cytokine levels, and pathological changes of tissues were determined. The results showed that PBD-2 (25-200 μg·mL^-1) could significantly inhibit the growth of S. suis SC-19 in a concentration-dependent manner (P<0.05). At the same time, PBD-2 had no significant toxic effect on RAW cells (P>0.05). The in vivo study revealed that PBD-2 treatment could effectively reduce the mortality of mice infected with S. suis SC-19. At the same time, PBD-2 treatment significantly reduced bacteria loads in brain, lung, spleen and blood of mice, and decreased the levels of inflammatory cytokines IL-6, IL-12 and TNF-α in mouse sera (P<0.05). At the same time, PBD-2 treatment also significantly alleviated the degree of pathological damages in lung and spleen tissues of mice infected with bacteria (P<0.05). These results indicate that PBD-2 confers great resilience to S. suis in vitro without significant cytotoxicity, while it also exhibits a therapeutic effect on S. suis infection in mice, suggesting that the use of PBD-2 as a therapeutic drug and substitutes for antibiotics is of an excellent prospect.     

有机生产模式下牧草粘虫防治方法的初步研究

为探索牧草有机生产模式下的粘虫(Mythimna separata Walker)防治,对有机牧草种植区和非有机牧草种植区的5种牧草,通过生物农药BT、农业防治即时刈割利用牧草和化学合成农药溴氰菊酯、辛硫磷处理,进行草地上的粘虫防治试验。结果表明:生物农药BT防效与常规农药校正防效无显著差异,校正防效达到91.67%～98.59%;其次为即时刈割利用牧草,校正防效达到52.78%～81.35%,该法与有机生产理念高度吻合,可作为有机牧草生产中首选的防治方法之一。     

奶牛乳质性状相关基因及其单核苷酸多态性的研究进展

乳质性状为奶牛重要的经济性状,主要包括乳蛋白量、乳蛋白率、乳脂量和乳脂率等。乳质性状改良是当今遗传育种界的研究热点之一,利用候选基因策略寻找影响乳质性状的功能基因或功能性单核苷酸多态,并将其应用于奶牛乳质性状的分子育种实践已经成为后基因组时代的发展趋势。目前针对乳质性状的功能基因或功能性单核苷酸多态已经开展了大量的研究工作,作者就参与泌乳调控的乳质相关基因、脂肪合成与次生物质代谢通路,以及其他一些与乳质性状相关基因及功能性单核苷酸的研究现状进行简要综述。     

脉冲场凝胶电泳在沙门氏菌流行病学中的应用

脉冲场凝胶电泳是20世纪80年代发展起来的一种可用于分离10 kb至10 Mb分子质量DNA的新型凝胶电泳技术,已广泛应用于细菌分子分型、种群特异性鉴定及遗传分析等方面。文章介绍了脉冲场凝胶电泳的技术、应用状况及目前沙门氏菌的分型现状,并阐述了该技术在沙门氏菌流行病学研究方面的应用及发展前景。     

我国肉牛的竞争力分析与财政支持政策

本文介绍了我国肉牛生产现状、国际和国内牛肉市场与我国肉牛出口和进口情况,分析了制约我国肉牛竞争力的因素,提出了在国际市场增加肉牛竞争力的财政支持政策。     

胰腺干细胞的研究进展

概述了胰腺干细胞的分布、胰腺的发生、胰腺干细胞的相关标记物以及胰腺干细胞的体外分离培养、增殖、分化等领域的研究进展，并对胰腺干细胞的生物学特征、体外分离培养时遇到的困难等进行了探讨，针对所遇到的困难提出了一些改进意见。     

我国南方猪高热病的研究(Ⅰ)——大肠杆菌的分离、鉴定和致病性测定

从湖南3个高热病发病猪场11头病死猪的病料组织中均分离出了大肠杆菌,经血清学鉴定,鞭毛抗原(K88、K99、987P和F41)全为阴性反应。经过157种菌体抗原血清学检测,血清型为5、6、15、22、32和83型。药物敏感试验结果表明,分离的大肠杆菌对大多数常用药物耐药,对氟喹诺酮和头孢类药物敏感。将其中4头猪原代分离的大肠菌培养物以原倍(2×107个/mL)、104和108稀释的菌液分别感染18~22 g小白鼠,原倍菌液感染的小白鼠12/30在感染后24 h内出现死亡,而104和108稀释菌液感染的小白鼠均健活;将未经除菌的病死猪组织悬液、过滤除菌的组织悬液、大肠杆菌、过滤除菌的组织悬液及大肠杆菌分别感染30日龄左右的健康小猪,除未经除菌的组织悬液感染猪3/3发病,2/3死亡外,其余所有感染猪只出现体温升高,升幅达1~2℃,减食,精神萎靡,但没有死亡;将死亡猪再次分离到的大肠杆菌感染小白鼠和猪,小白鼠12/15出现死亡,感染猪只出现体温升高(超过1℃),没有出现死亡。结果证明:大肠杆菌在高热病的发病过程中只起协同诱发作用,引起猪发病死亡的真正原因可能是病毒感染。     

黄芪多糖对人工感染IBDV雏鸡红细胞免疫功能的影响

将由未免疫接种腔上囊病疫苗鸡的种蛋孵化而来的160只1日龄海兰白雏鸡随机分为A、B、C和D共4组。A组为对照组，B、C和D组于26日龄时按每只0．3mL的剂量用IBDV攻毒。A、B组未用黄芪多糖（APS）处理，C、D组从攻毒当日起连续胸肌注射APS6d，剂量分别为每只鸡5mg和10mg。分别在21、29、32、35、38日龄时心脏采血1～3mL，测定E—C3bRR、E—ICRR、ERER和ERIR。结果显示，雏鸡感染IBDV后可使E-C3bRR和ERER显著降低（P〈0．01）；APS处理组E-C3bRR、E-ICRR、ERER均高于A、B组（P〈0．01），其中D组最高，而ERIR则与A组相似。证实，雏鸡感染IBDV后红细胞免疫功能低下，而APS可显著提高其红细胞免疫功能。     

牛分支杆菌MPT83基因的表达及重组蛋白的纯化

从牛分支杆菌培养物中抽提总DNA，扩增了MPT83基因，并克隆入pMD-18-T Simple Vector，将测序正确的目的基因插入表达载体pET-32a（＋）中，转化BL21（DE3）宿主菌，IPTG诱导表达，用亲和层析方法对表达蛋白进行了纯化。经测序，构建的克隆质粒pMD-MPT83与Gen-Bank中的序列一致；构建的表达质粒pET-MPT83经PCR和BamHI＋HindⅢ双酶切鉴定构建正确；经SDS-PAGE分析，在约42ku处出现新的蛋白条带，4h后表达量即达到高峰；Westernblotting分析表明，融合蛋白能够被牛分支杆菌阳性血清所识别；纯化的表达蛋白经SDS-PAGE电泳，出现清晰的单一条带。表明MPT83基因原核表达载体构建成功。     

重组犬α6干扰素的酵母表达及其抗病毒活性评价

试验旨在构建犬α6干扰素毕赤酵母表达系统,并对其进行优化和筛选,以期获得高活性的重组犬α6干扰素（CaIFN-α6）。根据CaIFN-α6基因序列,按毕赤酵母菌密码子偏好性对CaIFN-α6全基因序列进行优化与合成,用Xho Ⅰ和Not Ⅰ双酶切将其连接至载体pPICZαA中,构建pPICZαA-CaIFN-α6重组表达质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。提取质粒pPICZαA-CaIFN-α6并线性化,电转入酵母感受态细胞X33中制备重组菌。采用甲醇进行诱导表达,收集上清,超滤浓缩,最终获得纯化的重组CaIFN-α6。利用BCA法测得纯化后的CaIFN-α6蛋白浓度为1.5 mg/mL,Western blotting分析表明CaIFN-α6蛋白具有良好的反应原性,SDS-PAGE显示其纯度约在95%以上,MDCK/VSV法检测其效价为2.37×10⁷ IU/mL,比活性为1.58×10⁷ IU/mg。结果表明犬α6干扰素在毕赤酵母pPICZαA表达载体系统中成功表达,且具有较高的生物活性,为后期的犬病毒病的临床预防与治疗提供了良好的支撑。