Effects of Rho kinase on p-Smad1 nuclear translocation in rat pulmonary artery smooth muscle cells

AIM: To explore the mechanism of bone morphogenetic protein (BMP) and Rho kinase signal pathways on the proliferation of pulmonary artery smooth muscle cells. METHODS: Pulmonary smooth muscle cells were isolated from the rat distal pulmonary artery and cultured. BMP and Rho kinase pathways were activated by BMP-2 and platelet-derived growth factor BB(PDGF-BB),respectively. Rho kinase inhibitor Y-27632 and MEK inhibitor U0126 were also used. Immunofluorescent staining was applied to observe p-Smad1 distribution across the nucleus, and the cells with positive p-Smad1 nuclear accumulation were counted and the nuclear translocation rate was calculated. The total p-Smad1 and its distribution across the nucleus were quantitatively determined by Western blotting. The cell proliferation was analyzed by CCK-8 assay. RESULTS: Exposure to BMP-2 significantly increased both the total amount of p-Smad1 and its nuclear accumulation in pulmonary smooth muscle cells. Pretreatment with PDGF-BB significantly decreased the nuclear accumulation of p-Smad1 induced by BMP-2 without decrease of total p-Smad1. However, pretreatment with Y-27632 or U0126 reversed the inhibitory effect of PDGF-BB on p-Smad1 nuclear accumulation. BMP-2 significantly inhibited the cell proliferation, but PDGF-BB blocked the effect of BMP-2 and significantly increased the cell proliferation. After pretreated with Y-27632 or U0126, the PDGF-BB-activated cell proliferation was suppressed.CONCLUSION: PDGF-BB-activated Rho kinase inhibits BMP-2-induced p-Smad1 nuclear translocation via MEK/ERK1/2, and increases pulmonary artery smooth muscle cell proliferation.     

不同砧木对嫁接黄瓜蜡粉形成及硅吸收分配的影响

 为探讨嫁接影响黄瓜果实表面蜡粉形成的机制,选择对嫁接黄瓜果实表面蜡粉形成具有明显不同影响的砧木品种,研究了嫁接黄瓜的植株生长和硅吸收分配特性,结果表明：少蜡粉砧木嫁接黄瓜,结果期株高、叶片数和前期产量低于多蜡粉砧木和中蜡粉砧木嫁接的黄瓜,但显著高于自根黄瓜;黄瓜叶片中硅含量显著高于茎和根系;少蜡粉砧木嫁接黄瓜叶片和茎中硅含量低于中蜡粉、多蜡粉砧木嫁接黄瓜和自根黄瓜;根系中硅含量以‘云南黑籽南瓜’嫁接的黄瓜最高;黄瓜果实发育过程中果实中硅含量呈先升高后降低的变化趋势,位于果实同节位的叶片中硅含量逐渐减少;少蜡粉砧木嫁接黄瓜果实中硅含量明显低于多蜡粉砧木、中蜡粉砧木嫁接黄瓜和自根黄瓜。不同砧木影响嫁接黄瓜果实表面蜡粉形成可能与硅的吸收分配特性有关。     

提取方法对葡萄柚精油性质与组成的影响

葡萄柚精油是柑橘精油的重要类别,具有清新、浓郁的特征果香,是一种广受欢迎的天然香精。为了研究提取方法对葡萄柚精油表观特征、物理性质及化学组成的影响,文章分别以蒸馏法和冷榨法制备葡萄柚精油,采用气质联用(GC-MS)分析其化学组成。结果表明蒸馏法的精油得率远高于冷榨法,但冷榨法所得精油的色泽和气味更接近天然葡萄柚,折光率和相对密度也更高;蒸馏法所得精油含有39种可检测化合物,其中含氧化合物18种,相对含量为14.11%,而冷榨法所得精油含37种可检测化合物,16种为氧化物,相对含量达17.18%,尤其是芳樟醇、葵醛、柠檬醛等特征香气成分的含量明显高于前者,表明冷榨法比蒸馏法更适宜制备高品质葡萄柚精油。     

玉米苗期抗旱性杂种优势表现研究

以43个玉米杂交组合及其相应亲本为材料,利用20%PEG-6000溶液在苗期模拟干旱胁迫,研究玉米苗期抗旱性的杂种优势表现,并探讨与亲本间的相关性。结果表明,12个组合存在正向超亲优势,18个组合具有正向中亲优势;以中单808作为对照,13个组合表现为正向对照优势。玉米杂交组合苗期抗旱性和对照优势与母本、父本、高值亲本、低值亲本及亲本均值间的相关性一致,均未到达显著水平,表明玉米杂交组合苗期抗旱性和对照优势与亲本间无明显的相关性,在育种实践中,不能根据亲本抗旱性来预测杂交种的抗旱性。     

NLRP3炎症复合体的体外构建

为体外构建NLRP3炎症复合体,利用PCR方法扩增目的基因NLRP3、IL-1β、ASC和Pro-Caspase-1,分别连接到相应的载体中,构建重组真核表达质粒p3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC、pEGFP-C1-IL-1β、PCI-CASP-HA,利用Lipofectamine2000试剂转染到HEK293T细胞后,采用Western blot方法验证各蛋白的表达情况;通过质粒共转染体外构建NLRP3炎症复合体,采用ELISA方法检测IL-1β生成情况。结果显示,3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC、pEGFP-C1-IL-1β、PCI-CASP-HA重组质粒均被成功构建,各蛋白于HEK293T细胞内均被成功表达;质粒共转染后ELISA检测到高水平的IL-1β生成,表明NLRP3炎症复合体体外构建成功。NLRP3炎症复合体在体外的成功构建,为进一步研究其激活机制奠定了基础。     

加热回流法和超声波法提取淫羊藿苷的试验研究

以乙醇为提取溶剂,采用加热回流法和超声波法从淫羊藿中提取淫羊藿苷,采用单因素试验考察提取次数、提取时间、料液比和乙醇体积分数对提取率的影响,并设计正交试验优化提取工艺.结果表明,优化的加热回流法为料液比1∶10(m∶V,g/mL)、提取2次、提取时间40 min、乙醇体积分数75％;优化的超声波法为乙醇体积分数60％、超声提取时间30 min、提取1次、料液比1∶6(m∶V,g/mL).     

水质对膨润土防水毯防渗效果影响研究

针对我国西北干旱寒冷盐渍化地区渠道防渗存在的问题,对拟引进使用的膨润土防水毯的膨胀性能及防渗效果进行研究,提出推广应用一种新型复合土工合成材料（膨润土防水毯）。选择3种膨润土防水毯产品。采取室内试验,分析了不同浓度及离子溶液对膨润土防水毯防渗效果的影响。试验表明溶液浓度膨润土膨胀性能影响较大．当矿化度大于5g／L时膨胀量明显减小。离子及浓度对韩国1号（两层聚丙烯薄膜防护）防渗性能影响最小,除与膨润土成分及含量有关外,两层聚丙烯薄膜防护层结构对防渗性能也有较大的影响。     

天目山常绿阔叶林群落最小取样面积与物种多样性

在浙江省天目山国家级自然保护区内,采用一次性调查方法,研究常绿阔叶林群落物种多样性。样地大小为100 m×100 m。用激光对中全站仪测定每株树木坐标。根据树木的地径和胸径,把常绿阔叶林群落种群分为幼苗、幼树、小树、中树和大树等5个大小级。采用丰富度和多样性指数进行群落物种多样性分析。根据种-面积曲线确定最小取样面积。结果表明:在1 hm2样地内,共记录到木本植物127种,其中乔木为76种,灌木51种。群落木本植物物种丰富度最高的是小树级,多达99个物种,占群落木本植物总物种数的78%。除幼树外,从幼苗到大树,物种多样性指数和优势种数呈增加趋势。要获得天目山常绿阔叶林群落80%以上的木本植物种类,最小取样面积为4 048 m2,相当于边长为64 m的正方形。这可作为群落物种多样性一次性调查样地大小的参考依据。图2表2参26     

放线菌Z139发酵条件的研究

为了进一步提高放线菌Z139菌株发酵液抑菌活性物质的产量,以放线菌Z139发酵液抑菌活性为主要指标,研究了发酵培养基中不同碳源、氮源、C/N、无机盐等营养因子,以及接种量、装液量、初始pH、发酵时间等非营养因子对Z139菌株发酵液生物活性的影响。对烟草赤星病菌和苹果腐烂病菌的抑菌测定结果表明,发酵培养基最佳碳源为玉米粉,氮源为蛋白胨,适宜C/N为4.13∶1,添加无机盐的种类为硫酸镁和氯化钠时,放线菌Z139发酵液抑菌活性较高。正交试验结果表明,发酵培养基各组分的最佳配比(质量分数)为:玉米粉1.0%,蛋白胨1.0%,硫酸镁0.06%,氯化钠0.1%。Z139菌株发酵的优化条件为:初始pH6.0~7.0,发酵时间72 h(发酵液pH 8.5),接种量体积分数6%,装液量240 mL/L。     

热应激诱发的氧化应激对羊的影响及其作用机制

热应激会破坏机体氧化系统和抗氧化系统之间的平衡,诱发机体的氧化应激。而机体抗氧化系统与免疫系统息息相关,其中核转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路是联系二者的重要途径。本文阐述了热应激如何诱导羊发生氧化应激,以及热应激诱导的氧化应激对羊肠道组织、机体免疫细胞及相关细胞因子表达分泌的影响和Nrf2信号通路的调控机制,以期系统理解热应激诱导的氧化应激对羊的影响。