Expression and function of circular RNA_0000231 in non-small-cell lung cancer

AIM: To investigate the expression and function of circular RNA_0000231 (circ_0000231) in non-small-cell lung cancer (NSCLC). METHODS: RT-qPCR was used to detect the expression of circ_0000231 in the NSCLC tissues and cell lines. circ_0000231 small interfering RNA (si-circ_0000231) or negative control siRNA of circ_0000231 (NC) was transfected into the NSCLC cells. The proliferation and apoptosis of the NSCLC cells were detected by CCK-8 assay, colony formation assay and flow cytometry, respectively. The expression of cyclin D1 (CCND1) and anti-apoptotic protein Bcl-2 were determined by RT-qPCR and Western blot. RESULTS: The expression of circ_0000231 in the NSCLC tissues and cell lines was significantly up-regulated compared with precancerous tissues and lung epithelial cells BEAS-2B (P<0.05). After transfection of NSCLC cells with si-circ_0000231, the cell viability, colony formation numbers were significantly decreased, and the apoptotic rate in si-circ_0000231 group was significantly increased as compared with NC group (P<0.01). In addition, the results of RT-qPCR and Western blot showed that transfection of si-circ_0000231 inhibited the expression of CCND1 and Bcl-2 (P<0.01). CONCLUSION: The expression of circ_0000231 is significantly increased in the NSCLC tissues and cells. Knock-down of circ_0000231 expression significantly inhibits the proliferation of NSCLC cells.     

海口市林分碳密度与景观格局指数耦合研究

为了解森林景观的空间组成、分布等特征对林分碳密度的影响,并以此为海口市优化林分结构,保护林地资源等方面提供参考。以海口市2015年森林资源二类调查数据为基础,运用arcgis、fragstats、spss等软件量化林分碳密度与景观格局指数并以此构建耦合协调度模型,来反映林分碳密度与森林景观格局的关系。研究发现,海口市热带林面积比重较大,且人为经营活动较强,导致其景观破碎化程度较高;林分碳密度与森林景观格局指数之间具有一定的相关性,且是相互促进的关系,当某一林分类型的空间配置较好,分布较聚集,不被其他地类分割时,其碳密度往往也较高。通过对海口市林分碳密度和森林景观格局指数的耦合研究,发现其林分碳密度与森林景观格局指数耦合协调度状况总体上并不良好,需要进行调整和改善。     

侵染广东连州葫芦的黄瓜绿斑驳花叶病毒的分子特征 及致病性分析

【目的】黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是侵染瓜类作物的主要病毒之一,对瓜类产业造成巨大的危害。本研究旨在探明侵染广东省连州市葫芦的CGMMV分离物(CGMMV-GDLZ)分子特征及其在系统进化中的地位,并测定其对黄瓜、葫芦和西瓜的致病性,为CGMMV的防控提供理论依据。【方法】从广东省连州市葫芦种植基地采集2个疑似CGMMV侵染的病样以及1个无症状样品,提取总RNA,根据CGMMV参考序列（GenBank登录号：KX883801）设计引物进行RT-PCR检测,引物序列为F：CCACGAGTTGTTTCCTAATGCTG/R：TTTGCTAGGCGTGATCGGATTGT,退火温度53℃,扩增长度890 bp。将CGMMV全长序列分为前后两段,前半段1—3 511 nt,扩增引物序列为F：AAGTTCATTTCATTTGGAGAGGGTTTTAATTTTTATAA TTAAACAAA/R：AGTTCTGCATTAATTGCTATTTGGTAGGCACAGTGGTAG;后半段3 301—6 423 nt,扩增引物序列为F：GTGCGTGCTACCCCGACTCCAATAGGTTTGATTGCCCGTG/R：GGTGGAGATGCCATGCCGACCCTGGGCCCCTACCCGGGGAAAGG。将前后两段PCR产物通过同源重组的方法克隆到pCB301双元载体上,测序得到CGMMV-GDLZ分离物全长序列。利用CGMMV-GDLZ分离物全长序列在NCBI中进行Blast分析,然后通过MEGA7软件对CGMMV-GDLZ以及其他已经报道的CGMMV分离物进行系统进化树分析。将构建好的pCB301-CGMMV侵染性克隆注射接种本生烟验证其侵染性,然后再注射接种黄瓜、葫芦和西瓜的子叶,测定CGMMV-GDLZ分离物的致病性。【结果】RT-PCR结果证实,广东省连州市葫芦病样感染了CGMMV。CGMMV-GDLZ分离物全长序列为6 423 nt,编码4个蛋白,分别为129K复制酶（61—3 495 nt）、186K复制相关蛋白（61—5 007 nt）、运动蛋白MP（4 994—5 788 nt）和外壳蛋白CP（5 763—6 248 nt）。CGMMV-GDLZ核苷酸序列与CGMMV-eWT分离物（GenBank登录号：KY753928）同源性最高,为99.97%。系统进化树分析结果显示,CGMMV-GDLZ分离物与日本、韩国等东亚CGMMV分离物同属Group 1,在遗传距离上与山东、浙江和河南的CGMMV分离物最接近。pCB301-CGMMV侵染性克隆可以系统侵染本生烟,造成本生烟上部叶片出现皱缩、斑驳、凸起等症状,RT-PCR和Western blot进一步确认了侵染性克隆的侵染性。注射接种CGMMV-GDLZ分离物后15 dpi,葫芦和西瓜即可产生斑驳、花叶、突起、生长迟缓等症状,24 dpi时症状更明显。而15 dpi时,CGMMV-GDLZ分离物在黄瓜上的症状不明显,与未接种对照植株几乎没有区别;将植株从控温接种室移入网室中,30 dpi时,黄瓜植株上部叶片开始出现斑驳和花叶,40 dpi时,症状已经非常明显。RT-PCR和Western blot检测进一步确认了上述结果。【结论】侵染广东省连州市葫芦的CGMMV-GDLZ分离物与山东、浙江和河南的CGMMV分离物很可能具有相同的传染源;CGMMV-GDLZ分离物可以侵染本生烟、黄瓜、葫芦和西瓜等作物,但对这些作物的致病性存在差异。     

非人灵长类动物体外受精与胚胎移植的研究进展

简要介绍了非人灵长类动物体外受精与胚胎移植的内容、方法和步骤,影响其体外受精的主要因素,以及对未来非人灵长类动物的研究方向。     

水质对膨润土防水毯防渗效果影响研究

针对我国西北干旱寒冷盐渍化地区渠道防渗存在的问题,对拟引进使用的膨润土防水毯的膨胀性能及防渗效果进行研究,提出推广应用一种新型复合土工合成材料（膨润土防水毯）。选择3种膨润土防水毯产品。采取室内试验,分析了不同浓度及离子溶液对膨润土防水毯防渗效果的影响。试验表明溶液浓度膨润土膨胀性能影响较大．当矿化度大于5g／L时膨胀量明显减小。离子及浓度对韩国1号（两层聚丙烯薄膜防护）防渗性能影响最小,除与膨润土成分及含量有关外,两层聚丙烯薄膜防护层结构对防渗性能也有较大的影响。     

人参组织培养的多因子正交试验研究

采用L9(34)正交设计分析比较了2.4-D,BA,NAA,KT 4种激素浓度及其组合对人参组织培养的影响。经直观分析、方差分析和多重比较进行综合评价,确定人参愈伤组织诱导的最优培养基为MS 2.4-D3 mg/L BA 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L KT 0.5 mg/L,人参愈伤组织生长的最优培养基为MS 2.4-D 3 mg/L KT 1 mg/L,人参不定芽发生的最优培养基为MS BA 1 mg/L。     

国家尺度种植业面源污染负荷估算方法研究

空间尺度上,种植业面源污染负荷估算可用分为田块尺度、流域尺度和区域尺度。国家尺度属于区域尺度范畴,是掌握整个国家种植业源污染负荷概况、检验种植业面源污染防治措施成效、预测面源污染发展趋势的重要尺度。本文综述了国家尺度上种植业面源污染负荷估算的研究方法,主要包括输出系数法、改进输出系数法、多元回归法、贝叶斯递归回归树模型、过程模型模拟法等,并利用以上方法对我国种植业面源污染负荷进行估算。其中氮素径流损失估算结果在0.30～2.40 Tg之间,氮素淋洗损失为0.36～2.03 Tg,磷素径流损失为3.5～6.37 Mg。指出了我国国家尺度种植业面源污染流失量估算方法存在以下主要问题:源头排放未区分背景排放和肥料排放,也未考虑南方一年多熟制排放差异,过程削减未充分考虑沿程消纳。为此,提出我国国家尺度种植业面源污染负荷估算方法应进一步明细各土地利用输出系数、区分背景排放和肥料排放,考虑我国熟制的区域差异、考虑田块到流域出口的沿程削减。     

新型调节剂NP-2000对水稻苗期主要生理性状的影响

用新型植物生长调节剂NP-2000原液的3种浓度100、2003、00倍液喷施水稻苗期叶片,研究了NP-2000对水稻苗期生长及生理特性的影响。结果表明,此调节剂对水稻株高分蘖数无影响,但可有效提高水稻苗期的净光合速率,低浓度的NP-2000在喷施后12 d能有效提高水稻叶片IAA、GA1、Z的含量,对ABA的含量影响不显著。此调节剂对水稻苗期的调控作用值得进一步研究。     

烤烟新品种生态适应性评价

在龙山地区对7个烤烟新品种进行了主要农艺性状、经济性状鉴定。结果表明:CY9506在产量、产值上明显高于其它几个品种;YZ9402、CY9502、CY9506上等烟比例较高,96-4上等烟比例最低;CY9506、HY-3-11、96-4内在质量较好。     

超高效液相色谱法（UPLC）快速测定水产品中17种磺胺类抗生素残留

采用超高效液相色谱(UPLC)—二极管阵列检测器(PDA),建立了水产品中17种磺胺类(SAs)抗生素残留的快速同时检测技术。样品经乙酸乙酯提取,HLB固相萃取柱净化,ACQUITY UPLCTM BEHC18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm)分离,以甲醇-0.1%乙酸为流动相,二极管阵列检测器(PDA)检测。17种磺胺在8min内实现同时分离测定,磺胺类抗生素在0.01～5μg/ml(磺胺醋酰、磺胺嘧啶和磺胺二甲异嘧啶为0.01～2μg/ml)范围内线性关系良好(r≥0.9998)。方法的检出限(S/N=3)为2.0～5.0μg/kg,17种磺胺在添加水平分别为10、40μg/kg时,平均回收率为70.4%～91.4%和73.3%～92.5%,相对标准偏差(RSD)小于10%。结果表明,该方法快速、灵敏、高效,适用于水产品中多种磺胺类抗生素的同时测定。