共表达NDV F、IBDV VP0基因重组鸡痘病毒中和抗体消长规律

将海兰褐蛋雏鸡随机分为对照组、肌肉注射组、刺种Ⅰ组和刺种Ⅱ组,用共表达NDV F和IBDV VP0基因重组鸡痘病毒进行免疫,对照组刺种生理盐水,在免疫后的第7,14,21,28,35,42,49 d和56 d采血,分离血清,用固定病毒稀释血清法测血清中抗FPV,NDV,IBDV的中和抗体效价.经分析,抗FPV中和抗体效价及抗NDV中和抗体效价免疫后14 d达到高峰,28 d后下降幅度不明显,42 d时仍保持一定水平;抗IBDV中和抗体效价免疫后21 d达到高峰, 28 d后下降幅度不明显,42 d时仍保持一定水平.     

马腺疫链球菌 FNE 基因的克隆及原核表达

采用 PCR 方法从马腺疫链球菌新疆分离株中扩增 FNE 基因片段,克隆至 pMD19-T 载体。利用分子生物学软件分析测序结果,将 FNE 截短基因亚克隆至原核表达载体 pET-30a 中,转化到大肠埃希菌（E．coli）BL21（DE3）感受态细胞,以 IPTG 诱导 FNE 重组蛋白的表达,用 SDS-PAGE 和 Western blot 法分析蛋白表达及其反应原性。序列分析显示,其与 GenBank 收录的马腺疫链球菌4047（登录号YP002747216）核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为99％。采用 PCR 法扩增到675 bp 的 FNE 截短基因片段构建重组表达载体获得重组蛋白,经 SDS-PAGE 分析在46 ku 处出现明显条带,Western blot 分析显示具有反应原性。成功克隆和表达了马腺疫链球菌的 FNE 截短基因,为重组 FNE 蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。     

福美双和铜对肉鸡胫骨软骨发育不良的影响

本试验旨在研究福美双和铜对肉鸡胫骨软骨发育不良、血清相关酶活性和组织铜含量的影响。100羽1日龄AA肉鸡随机分为4组,从8日龄起分别给予基础日粮(对照组),福美双日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg),福美双低铜日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg+CuSO4.5H2O 50 mg/kg),福美双高铜日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg+CuSO4.5H2O 100 mg/kg),试验期至21日龄。结果表明:(1)日粮中添加福美双(100 mg/kg)能显著增加肉鸡TD的发生率;添加铜能降低福美双的这种作用,两者之间存在明显的互作关系;(2)与对照组相比,福美双组和福美双高铜日粮组肉鸡血清钙、磷水平明显升高(P<0.05);血清ALT水平在各组之间无显著差异;血清ALP、AST水平,福美双高铜日粮组与其余各组相比明显升高,差异显著(P<0.05);(3)与对照组相比,其余各组肉鸡胫骨长度均显著下降(P<0.05);(4)日粮中铜添加可提高各组织中铜的沉积;添加福美双能提高肝脏、肾脏、胰腺中铜的沉积,同时降低铜在肾脏中的沉积,而铜的添加能够降低福美双所引起的肾脏铜的增加。提示福美双可能通过损伤肝、肾功能,影响机体组织对铜的生物利用从而诱导肉鸡胫骨软骨发育不良的发生。     

猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析

为获得针对猪源EMCV结构蛋白VP2的特异性单克隆抗体,本试验以EMCV结构蛋白VP2为对象,将EMCVBJC3株VP2基因定向插入穿梭质粒中,构建重组腺病毒AdV—VP2,免疫BALB／c小鼠制备单克隆抗体,利用Pepscan技术对单抗识别的抗原位点进行分析。结果显示,间接ELISA及间接免疫荧光法筛选获得了2个阳性细胞克隆株,命名为C11和G8。经检测杂交瘤细胞培养上清抗体效价为1：1600,腹水效价分别为1：2．56×106和1：1.28×106,中和试验鉴定均无中和活性。Western—blot鉴定表明获得的2株单抗均能识别原核表达的重组VP2蛋白。亚类鉴定结果显示2株单抗均为IgG2b亚类,轻链均为κ型。Pepscan分析结果显示,这2株单抗可分别识别EMCVVP2蛋白上的2个B细胞线性表位。本研究获得的蛋白十分接近于其天然构象,很大程度上保证了病毒表面抗原位点的结构和功能。     

聚乙二醇胁迫下不同苜蓿品种愈伤组织生理指标的变化

以聚乙二醇(PEG)作为渗透胁迫剂,对5个苜蓿Medicago sativa品种愈伤组织进行干旱胁迫.用生理生化方法对各品种愈伤组织的过氧化物酶(POD)活性、脯氨酸积累量、质膜相对透性3项抗旱性鉴定指标进行测定,各项结果趋于一致,其抗旱性强弱的顺序为:龙牧803、草原2号、中牧1号、龙牧80l、准格尔.同时,证明了POD活性、游离脯氨酸含量和质膜透性均可作为苜蓿抗旱性鉴定的生理指标.     

中草药饲料添加剂饲喂泌乳牛的效果

试验选用20头体重、胎次、产犊天数、产奶量基本一致的荷斯坦泌乳母牛，按随机分为两组，即对照和试验。经过60天的饲养试验。结果表明：与对照相比，试验组奶牛日产奶量平均提高了4．3千克，乳脂率提高0．171个百分点，经济效益2．57元／头日。     

青稞秸秆替代苇状羊茅对全混合日粮青贮早期发酵品质及有氧稳定性的影响

本试验旨在研究不同比例青稞秸秆替代苇状羊茅对全混合日粮青贮早期发酵品质及有氧稳定性的影响。试验设对照组(TH₀)和3个青稞秸秆不同比例替代组TH₅、TH₁₀和TH₁₅。青贮14 d开窖取样,分析其发酵品质、化学成分及微生物数量,将剩余的发酵TMR暴露于空气,用多通道温度记录仪记录温度变化;并分别在有氧暴露的第2,5和8天取样评定其有氧稳定性。结果表明,与对照组(TH₀)相比,TH₅的pH、乳酸、乙酸、总挥发性脂肪酸和乙醇含量无显著(P>0.05)差异;TH₁₀和对照相比pH差异不显著(P>0.05),但乳酸、乙酸、总挥发性脂肪酸和乙醇含量显著(P<0.05)低于对照组;TH₁₅ pH显著(P<0.05)高于对照组,乳酸、乙酸、总挥发性脂肪酸和乙醇含量显著(P<0.05)低于对照组;各组氨态氮/总氮和乳酸/乙酸无显著(P>0.05)差异,均以乳酸发酵为主,发酵品质良好。有氧暴露第2天后各组pH和氨态氮/总氮持续上升;乳酸、乙酸和水溶性碳水化合物含量持续下降;酵母菌和好氧细菌数量显著(P<0.05)升高。除TH₁₅外,其他各组温度在第35 h开始上升,TH₁₅温度上升延迟,并且温度上升峰值最小。和其他组相比,TH₁₅有氧稳定性最好。综合考虑发酵品质、有氧稳定性及对青稞秸秆资源的最大化利用,建议采用TH₁₅设计配方最为适宜。     

益生菌互作对肉鸡生长性能、肠道消化吸收及糖转运蛋白GLUT2影响的研究

旨在研究益生菌互作对肉鸡生长性能、肠道养分消化吸收及相关糖转运蛋白的影响。本研究中,200只1日龄雄性爱拔益加肉雏鸡被随机分为4组,每组5个重复,每个重复10只。将干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌分别按比例混合后于牛乳中发酵。对照组正常饮水（control组）,益生菌Ⅰ组（混合比例为2：1：1）、Ⅱ组（混合比例为1：2：1）、Ⅲ组（混合比例为1：1：2）补充1%复合菌乳制品于饮用水中,各组皆饲喂基础日粮。整个试验饲养周期为42 d,每21 d为一个阶段。结果表明：1）与对照组相比,益生菌互作组均可显著提高肉鸡平均日增重（P<0.05）,改善饲料利用率（P>0.05）,在所有益生菌互作组中,益生菌Ⅰ组的肉鸡生长性能最好;2）益生菌互作显著刺激了空肠淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶的特异性活性（P<0.05）;3）益生菌互作组均显著提高了小肠绒毛高度（P<0.05）,降低了隐窝深度（P<0.05）,上调了GLUT2 mRNA的表达（P<0.05）,其中,以益生菌Ⅰ、Ⅲ组作用最佳。综上所述,益生菌互作能够增强消化酶活性、改善消化道结构、上调营养转运蛋白表达,提高养分的消化率及能量吸收有效性,从而提高肉鸡的生产性能;且当干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌的混合配比为2：1：1时,复合益生菌制剂对肉鸡的作用效果较佳。     

猪附红细胞体感染对仔猪猪瘟免疫效果的影响

为探讨猪附红细胞体对仔猪猪瘟免疫效果的影响,本试验利用猪瘟抗体检测ELISA试剂盒,对已注射猪瘟疫苗的69头感染猪附红细胞体的仔猪和31头无猪附红细胞体感染的健康仔猪进行了猪瘟抗体检测。结果表明,感染猪附红细胞体仔猪的猪瘟抗体水平低下,其猪瘟疫苗整体免疫合格率(49·2%)明显低于健康仔猪(93·5%),且显性感染仔猪的免疫合格率(41·6%)明显低于隐性感染仔猪(53·5%)。说明猪附红细胞体严重干扰了猪瘟疫苗的免疫效果,且干扰程度与猪附红细胞体的感染程度呈正相关。