Vero E6细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

To seek out proteins which interact with structural proteins of porcine epidemic diarrhea virus （PEDV） in Vero E6 cells and study the mechanisms of viral infection.We created a Vero E6 cDNA yeast hybrid library. The total RNA of Vero E6 was extracted using Trizol method, and double strands cDNA was synthesized by SMART technique. We created a Vero E6 cDNA library by using homologous recombination in yeast. The results showed that the titer of cDNA library was 9.7×10⁸ CFU with the average of inserted fragments about 1.6 kb, and the recombination rate was 87%. These data indicated that the yeast two-hybrid cDNA library of Vero E6 was successfully constructed and might be useful for screening the host proteins interacting with structure protein of PEDV.     

NaCl胁迫下黑麦草种子萌发过程中DNA甲基化与基因表达分析

为了解黑麦草（Lolium perenne）种子在正常条件与NaCl胁迫下萌发过程中DNA甲基化动态变化以及重要盐胁迫相关基因的表达。运用甲基化敏感扩增多态性技术分析对照和150 mmol·L^-1 NaCl处理下黑麦草种子萌发过程（0,1,2,4,7 d）的DNA甲基化水平及动态变化,并通过实时荧光定量 PCR（QRT-PCR）检测8个重要的盐胁迫相关基因的表达情况。结果表明：黑麦草种子萌发过程中甲基化水平呈下降趋势,以双链甲基化方式为主,甲基化变化同时发生在编码序列和非编码序列中。NaCl处理下DNA甲基化程度高于CK,而去甲基化程度低于CK,最终导致NaCl处理下基因组净的甲基化位点数目增加。黑麦草种子耐盐萌发过程中代谢增强,8个盐胁迫相关基因表达量呈上升趋势,而NaCl胁迫延缓了种子萌发进程,在大多数时间点的基因表达低于对照。     

9个高羊茅品种苗期耐盐性研究

采用盆栽法,观测高羊茅9个品种（系）在不同的盐分浓度梯度（0%、0.4%、0.6%、0.8%）胁迫下的存活率、株高、生物量3个形态指标和游离脯氨酸含量、质膜透性2个生理指标,对9个高羊茅品种的苗期耐盐性进行了综合评价。结果表明：存活苗数、相对株高、生物量随盐浓度的升高而降低;脯氨酸含量、质膜相对透性随盐浓度的升高而升高;综合评价9个高羊茅品种,幼苗的耐盐能力强弱顺序为：92-93〉92-81〉92-107〉92-114〉89-92〉92-72〉92-87〉92-105〉92-106。     

禾草对禾顶囊壳玉米变种的抗病性研究

利用人工接菌方法测定了10种草坪禾草,包括多年生黑麦草、高羊茅、紫羊茅、中华结缕草、硬羊茅、草地早熟禾、加拿大早熟禾、匍匐剪股颖、细弱剪股颖、狗牙根;13种禾本科牧草,包括一年生黑麦草、鸭茅、碱茅、扁穗冰草、沙生冰草、披碱草、老芒麦、杂交小米草、猫尾草、弯叶画眉草、无芒雀麦、百喜草、苏丹草;以及4种禾本科作物,包括燕麦、甜高粱、小麦、玉米对禾顶囊壳玉米变种的抗病性。结果表明,多数供试禾草对其具有免疫能力,多年生黑麦草、一年生黑麦草、草地早熟禾、小麦高度抗侵染;无芒雀麦和玉米具有中等程度的抗侵染能力,但抗侵入能力较差;高粱属的苏丹草和甜高粱中度感病,属于中感作物。多年生黑麦草和草地早熟禾品种间存在着抗病性差异,有免疫品种和高抗品种。     

贝尼尔脂质体和贝尼尔注射剂的急性毒性比较试验

我们试制了贝尼尔脂质体 ,并对其和贝尼尔注射剂进行了小鼠的急性毒性比较试验 ,试验结果表明 ,贝尼尔脂质体的毒副作用显著低于贝尼尔注射剂 ,脂质体组的 L D50 (177.83mg/ kg· bw)显著高于原药组 L D50(74.14m g/ kg· bw) ,是原药组的 2 .40倍。说明贝尼尔制成脂质体后 ,可以显著降低药物毒副作用 ,增加用药的安全性     

高频饮用牛奶和葡萄糖对雌性大鼠生殖机能的影响

选用22d断奶SD大鼠高频饮用牛奶或葡萄糖40d,分别记录各组动物的阴道开张时间和阴道黏液、每周日增重、卵巢及子宫所占体重百分比、血糖水平,收集卵巢进行组织学处理以观察卵泡发育情况,探讨高频饮用牛奶和葡萄糖对雌性大鼠初情期的影响.结果显示,奶组和糖组大鼠较对照组阴道开张时间来得早,预示初情期可能提前,而且,奶组和糖组大鼠的卵巢占体重百分比较对照组高(P＜0.05).牛奶组血糖水平比对照组高,但糖组与对照组血糖水平差异不显著.通过对卵巢进行石蜡切片、HE染色及卵泡计数,结果显示:奶组的闭锁卵泡、每张切片卵泡总平均数都比对照组多(P＜0.05),而葡萄糖组的黄体数比对照组少(P＜0.05).试验表明高频饮用牛奶和葡萄糖可对性成熟前雌性大鼠的生殖机能产生一定影响.     

增补UV-B辐射对高山植物美丽风毛菊光合作用和光合色素的影响

强太阳紫外线-B(UV-B)辐射是青藏高原的主要环境胁迫因子,以高山植物美丽风毛菊(Saussurea superba)为材料,在2008和2009年植物生长盛期的7,8月份,采用选择性过滤膜和UV-B荧光灯管组合的方法研究了净光合速率(P_n)、稳态PSⅡ光化学效率、光合色素和紫外线吸收物质对强UV-B辐射的响应,探讨了典型高山植物的UV-B适应特性。结果表明:增补UV-B辐射能引起P_n和气孔导度(G_s)的增加;随处理时间的延长,第11和16天PSⅡ实际量子效率(Φ_PSⅡ)呈下降趋势,说明UV-B辐射对高山植物叶片光合机构仍具有负作用,PSⅡ光化学效率的降低反映了UV-B辐射效应的积累。增补初期光合色素有增加的趋势,但随处理时间的延长最终呈降低趋势,表明UV-B辐射对光合色素的光破坏是本质的,而基于叶片厚度增加导致的光合色素含量升高是一种表象。增补UV-B处理没有引起紫外线吸收物质含量的变化,表明高山植物叶表皮层丰富的黄酮类物质能有效保护光合机构,受环境UV-B辐射波动的影响较少。综上表明:增补UV-B后叶片G_s的增加以及单位叶片面积光合色素增加有利于P_n的提高,但青藏高原强太阳UV-B辐射对高山植物美丽风毛菊的光合生理过程仍具有潜在的负效应。     

羊驼皮肤中可溶性鸟苷酸环化酶的表达差异

采用免疫组织化学、实时荧光定量PCR和Western blotting对可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)在棕色和白色羊驼皮肤中的表达差异进行了研究,以探讨sGC在羊驼皮肤中的作用。实时荧光定量PCR结果显示,sGC在棕色羊驼皮肤中的相对表达量较低,是其在白色羊驼皮肤中的表达量的0.16倍,且差异极显著(P<0.01);Western blot-ting结果显示,在羊驼皮肤总蛋白中含有与兔多克隆抗体发生免疫阳性反应的条带,在棕色皮肤中的反应阳性弱于白色皮肤,且差异极显著(P<0.01);免疫组织化学结果表明,sGC免疫阳性主要分布在白色羊驼皮肤毛囊的毛球上方细胞及细胞间质,而在棕色羊驼皮肤毛囊中,sGC免疫阳性主要分布在毛球底部和外根鞘细胞及细胞间质。结果提示sGC参与羊驼毛色形成。     

围封、浅耕翻改良对退化羊草草甸草地土壤种子库的影响

应用幼苗萌发法比较研究了浅耕翻改良、围封改良和自由放牧对退化羊草草甸草地土壤种子库的影响.结果表明,浅耕翻改良、围封改良措施均可显著提高退化羊草草地土壤种子库的密度,改善种子库的物种组成结构,其中围封改良较浅耕翻改良措施对土壤种子库的补偿和修复更为有利.     

羊毛经济性状主基因研究进展

作者综述了目前已经发现并证明的与羊毛经济性状相关的多个重要基因,包括着色基因（pigmentation）、角蛋白基因（keratin genes）和无毛基因（hairless gene）及其他影响因子等,旨在为绵羊品种改良和分子标记辅助育种提供理论基础。