带有GFP的小鼠Sox2基因逆转录病毒载体的构建及其检测

为了建立体细胞重编程过程中检测Sox2基因表达变化的方法,本研究利用克隆获得的小鼠Sox2基因与逆转录病毒载体pMX—IRES—GFP连接,构建带有报告基因GFP的逆转录病毒载体,将其转染293GP细胞后获得假病毒上清。将获得假病毒上清侵染小鼠成纤维细胞（NIH3T3细胞）后观察GFP的表达和检测Sox2转录量的变化。其结果,成功构建带有GFP的Sox2基因逆转录病毒载体pMX—Sox2-IRES—GFP;将构建的载体转染后293细胞后获得能侵染NIH3T3细胞的假病毒上清,且与未侵染的NIH3T3细胞相比,侵染后的NIH3T3细胞的Sox2表达量提高近10倍。本研究为开展在体细胞重编程过程中Sox2表达与重编程效率的相关性提供依据．     

藏北高寒植被地上生物量与土壤环境因子的关系

用样带法研究藏北高寒植被地上生物量与土壤环境因子之间的关系,对高寒植被地上生物量和7个土壤指标进行相关性分析和回归分析,结果表明:高寒草原到高寒荒漠植被,群落组成逐渐趋于简单化.土壤环境因子影响高寒植被地上生物量,0～10cm土层的土壤有机碳、有效氮、全磷和速效磷与高寒植被地上生物量极显著正相关(P<0.01);10～20cm土层的土壤总有机碳和全磷与高寒植被地上生物量极显著正相关(P<0.01);20～30cm土层的土壤各环境因子与高寒植被地上生物量的关系均未达到显著水平.     

母乳来源耐氧化双歧杆菌的筛选

双歧杆菌作为婴幼儿肠道的优势菌,是最常用的益生菌之一,但对氧气具有高度敏感性,因而双歧杆菌的分离、培养和应用面临较大困难.利用双歧杆菌选择培养基,从湖南采集的健康人的母乳中分离出19株乳酸菌.鉴定结果显示,其中7株双歧杆菌分别为1株长双歧杆菌(Bifidobacterium loungum)、2株两歧双歧杆菌(B.bi...     

同时检测美洲型及欧洲型PRRSV的多重RT-PCR检测方法的建立及应用

为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的快速鉴别检测方法,本研究针对PRRSV基因序列设计3对特异性引物,即第1对通用引物扩增美洲型和欧洲型病毒株ORF7基因(433 bp/398 bp)、第2对引物扩增美洲型经典病毒株和高致病性变异株(HP-PRRSV)Nsp2基因(338 bp/248 bp)、第3对引物扩增欧洲型病毒株ORF5基因(614 bp)。经过反应条件的优化,建立了能够同时检测并区分美洲型经典病毒株、HP-PRRSV株以及欧洲型病毒株的多重RT-PCR检测方法。该方法可以特异扩增3种病毒的基因,其重组质粒标准品的检出下限均为1.67×103拷贝;而与猪的其它重要病原均无交叉反应。应用该方法检测176份临床疑似病料样品,结果 PRRSV阳性45份,其中美洲型变异病毒株41份、经典病毒株4份,未检测到欧洲型病毒株。表明本研究建立的多重RT-PCR检测方法可以用于PRRSV的快速鉴别诊断和流行病学调查。     

抗菌肽Thanatin转基因小鼠建立的初步研究

人工合成抗菌肽Thanatin基因的3条片段,利用重叠延伸PCR扩增技术得到完整的Thanatin基因,通过分子克隆方法构建出pIRES2-EGFP-Thanatin重组表达载体。然后与脂质体混合,采用睾丸打点注射将新构建的抗菌肽基因注入小鼠睾丸内,共注射公鼠5只。6周后与雌鼠交配,对新生仔鼠进行断尾,提取尾尖基因组DNA,利用PCR和Southern印迹方法对其进行检测。结果显示,得到的52只新生仔鼠中PCR检测阳性率为38.46%,Southern印迹检测阳性率为30.77%;在活体荧光成像系统下转基因小鼠呈现绿色荧光表达。通过睾丸注射法使Thanatin基因在小鼠的基因组中得到整合,为进一步研究抗菌肽的作用机理、培育抗病动物品种以及通过建立转基因动物生物反应器进行抗菌肽的大量生产奠定了基础。     

厚朴酚对断奶仔猪生长性能、肝脏抗氧化功能及脂代谢的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平的厚朴酚对断奶仔猪生长性能、肝脏抗氧化功能及脂代谢的影响。试验选取体重[（7.91±0.00） kg]相近且健康的21日龄“杜×长×大”三元杂交阉公猪144头,随机分为3组,每组8个重复,每个重复6头猪。3组仔猪分别饲喂基础饲粮（对照组）、基础饲粮+0.02%厚朴酚（0.02%厚朴酚组）、基础饲粮+0.04%厚朴酚（0.04%厚朴酚组）。饲养试验预试期7 d,正试期35 d。结果显示：1）与对照组相比,饲粮添加0.04%厚朴酚显著提高断奶仔猪第1～19天和第20～35天的平均日增重（ADG）(P<0.05),显著降低第1～19天和第20～35天的料重比（F/G）(P<0.05),而0.02%厚朴酚组和0.04%厚朴酚组的腹泻率和腹泻指数均显著降低（P<0.05）。2）与对照组相比,饲粮添加0.04%厚朴酚显著提高断奶仔猪肝脏中谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和过氧化氢酶（CAT）的活性（P<0.05）。3）与对照组相比,饲粮添加0.04%厚朴酚显著或极显著提高断奶仔猪肝脏中核因子E2相关因子2 (N...     

夏南牛肉用性能的屠宰试验报告

[目的]为了系统掌握夏南牛屠宰试验标准。[方法]经过对6头6月龄断奶的夏南牛公牛、6头12月龄架子公牛、10头18月龄育肥公牛的屠宰试验,[结果]屠宰率、净肉率、眼肌面积、肉骨比、优质肉块比率、高档牛肉率,6月龄分别为:60.19%、48.04%、58.47cm2、4.34∶1、39.84%和17.40%;12月龄分别为:60.38%、49.71%、83.45cm2、5.18∶1、36.03%和18.94%;18月龄分别为:62.58%、52.36%、102.39cm2、5.60∶1、35.14%和17.62%。据对6头18月龄育肥公牛西冷和霖肉两个部位牛肉品质测定,蛋白质含量分别为:23.28%、22.71%;脂肪储量分别为2.61%、2.25%;蒸煮损失分别为:30.96%、31.74%;肌肉剪切力值分别为:3.95kg/cm2、4.32kg/cm2。[结论]说明夏南牛早熟性强,可用于小牛肉生产,18月龄达到特级牛肉质量标准,也可生产高档牛肉。     

不同收获期玉米青贮营养成分在奶牛瘤胃内降解率的研究

本文旨在研究不同收获期玉米青贮对奶牛的营养价值。用3头装有永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛,采用3×3拉丁方设计对蜡熟期、乳熟期和乳熟前期的玉米青贮的主要营养成分进行了瘤胃降解率的研究。结果表明:(1)蜡熟期玉米青贮DM有效降解率(60.07%)分别比乳熟期(52.91%)和乳熟前期(45.13%)高7.16%(P<0.05)和14.94%(P<0.05);乳熟期比乳熟前期高7.78%(P<0.05)。(2)乳熟期玉米青贮NDF的有效降解率(30.77%)分别高于蜡熟期(28.59%)和乳熟前期(26.71%,P<0.05),蜡熟期和乳熟前期之间差异不显著。(3)蜡熟期ADF(25.73%)和乳熟前期玉米青贮(25.23%)没有明显差异,但都高于乳熟期(23.39%,P<0.05)。(4)蜡熟期玉米青贮CP有效降解率(81.93%)分别比乳熟期(76.43%)和乳熟前期(73.36%)高5.50%(P<0.05)和8.57%(P<0.05);乳熟期比乳熟前期高3.07%(P<0.05)。通过试验综合评价不同收获期玉米青贮对奶牛的营养价值是蜡熟期玉米青贮优于乳熟期,乳熟期玉米青贮优于乳熟前期。     

HaNPV病毒对寄主昆虫的持续作用研究

用不同浓度的HaNPV病毒感染3龄棉铃虫幼虫并分别收集不同处理的存活试虫进行室内传代饲养.结果表明,病毒对寄主昆虫不仅具有直接致死作用,而且对蛹质量和化蛹均有明显的影响,尤其是对亲代和子一代的寄主昆虫.同时,通过PCR技术,从子一代的幼虫和蛹中成功检测到该病毒,从而在分子水平上证明了病毒能够经过亲代传递到子代的种群中.这对病毒的高效利用和害虫的持续控制具有重要的理论和实践意义.     

湟中县草地退化现状及治理措施

湟中县由于自然因素和人为因素的相互制约,天然草地退化严重,影响了本县畜牧业经济发展,本文就草地退化现状和对策提出了一些看法。