夏南牛肉用性能的屠宰试验报告

[目的]为了系统掌握夏南牛屠宰试验标准。[方法]经过对6头6月龄断奶的夏南牛公牛、6头12月龄架子公牛、10头18月龄育肥公牛的屠宰试验,[结果]屠宰率、净肉率、眼肌面积、肉骨比、优质肉块比率、高档牛肉率,6月龄分别为:60.19%、48.04%、58.47cm2、4.34∶1、39.84%和17.40%;12月龄分别为:60.38%、49.71%、83.45cm2、5.18∶1、36.03%和18.94%;18月龄分别为:62.58%、52.36%、102.39cm2、5.60∶1、35.14%和17.62%。据对6头18月龄育肥公牛西冷和霖肉两个部位牛肉品质测定,蛋白质含量分别为:23.28%、22.71%;脂肪储量分别为2.61%、2.25%;蒸煮损失分别为:30.96%、31.74%;肌肉剪切力值分别为:3.95kg/cm2、4.32kg/cm2。[结论]说明夏南牛早熟性强,可用于小牛肉生产,18月龄达到特级牛肉质量标准,也可生产高档牛肉。     

不同收获期玉米青贮营养成分在奶牛瘤胃内降解率的研究

本文旨在研究不同收获期玉米青贮对奶牛的营养价值。用3头装有永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛,采用3×3拉丁方设计对蜡熟期、乳熟期和乳熟前期的玉米青贮的主要营养成分进行了瘤胃降解率的研究。结果表明:(1)蜡熟期玉米青贮DM有效降解率(60.07%)分别比乳熟期(52.91%)和乳熟前期(45.13%)高7.16%(P<0.05)和14.94%(P<0.05);乳熟期比乳熟前期高7.78%(P<0.05)。(2)乳熟期玉米青贮NDF的有效降解率(30.77%)分别高于蜡熟期(28.59%)和乳熟前期(26.71%,P<0.05),蜡熟期和乳熟前期之间差异不显著。(3)蜡熟期ADF(25.73%)和乳熟前期玉米青贮(25.23%)没有明显差异,但都高于乳熟期(23.39%,P<0.05)。(4)蜡熟期玉米青贮CP有效降解率(81.93%)分别比乳熟期(76.43%)和乳熟前期(73.36%)高5.50%(P<0.05)和8.57%(P<0.05);乳熟期比乳熟前期高3.07%(P<0.05)。通过试验综合评价不同收获期玉米青贮对奶牛的营养价值是蜡熟期玉米青贮优于乳熟期,乳熟期玉米青贮优于乳熟前期。     

抗菌肽Thanatin转基因小鼠建立的初步研究

人工合成抗菌肽Thanatin基因的3条片段,利用重叠延伸PCR扩增技术得到完整的Thanatin基因,通过分子克隆方法构建出pIRES2-EGFP-Thanatin重组表达载体。然后与脂质体混合,采用睾丸打点注射将新构建的抗菌肽基因注入小鼠睾丸内,共注射公鼠5只。6周后与雌鼠交配,对新生仔鼠进行断尾,提取尾尖基因组DNA,利用PCR和Southern印迹方法对其进行检测。结果显示,得到的52只新生仔鼠中PCR检测阳性率为38.46%,Southern印迹检测阳性率为30.77%;在活体荧光成像系统下转基因小鼠呈现绿色荧光表达。通过睾丸注射法使Thanatin基因在小鼠的基因组中得到整合,为进一步研究抗菌肽的作用机理、培育抗病动物品种以及通过建立转基因动物生物反应器进行抗菌肽的大量生产奠定了基础。     

厚朴酚对断奶仔猪生长性能、肝脏抗氧化功能及脂代谢的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平的厚朴酚对断奶仔猪生长性能、肝脏抗氧化功能及脂代谢的影响。试验选取体重[（7.91±0.00） kg]相近且健康的21日龄“杜×长×大”三元杂交阉公猪144头,随机分为3组,每组8个重复,每个重复6头猪。3组仔猪分别饲喂基础饲粮（对照组）、基础饲粮+0.02%厚朴酚（0.02%厚朴酚组）、基础饲粮+0.04%厚朴酚（0.04%厚朴酚组）。饲养试验预试期7 d,正试期35 d。结果显示：1）与对照组相比,饲粮添加0.04%厚朴酚显著提高断奶仔猪第1～19天和第20～35天的平均日增重（ADG）(P<0.05),显著降低第1～19天和第20～35天的料重比（F/G）(P<0.05),而0.02%厚朴酚组和0.04%厚朴酚组的腹泻率和腹泻指数均显著降低（P<0.05）。2）与对照组相比,饲粮添加0.04%厚朴酚显著提高断奶仔猪肝脏中谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和过氧化氢酶（CAT）的活性（P<0.05）。3）与对照组相比,饲粮添加0.04%厚朴酚显著或极显著提高断奶仔猪肝脏中核因子E2相关因子2 (N...     

弓形虫半巢式PCR检测方法的建立

根据GenBank上公布的弓形虫RH株的P30基因(X14080)设计了3条特异性引物P1、P2和P3,建立了半巢式PCR检测体系,并将P1和P3的扩增产物克隆到pUCm-T载体上进行测序.结果表明,该体系能够扩增出约250 bp的片段,P1和P3能扩增出约500 bp的片段,克隆到pUCm-T载体上的504 bp片段与P30基因(X14080)的序列同源性为99.8%.该PCR检测体系特异性强,在健康猪血液、猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和猪圆环病毒DNA上未扩增出条带;敏感性高,最低检测为18 fg.该检测体系的成功构建为猪弓形虫的检测和流行病学调查提供了有力的技术支持.     

新城疫疫苗株与分离毒株的蚀斑克隆与毒力鉴定

2株NDV贵州分离株(GN、ND99)与2株疫苗毒株(Ⅰ系和Ⅱ系)经检测为生物异质性毒株.利用蚀斑克隆技术对以上4株毒株进行蚀斑纯化,结果得到11株克隆毒株.其中,10株克隆毒株在鸡胚成纤维细胞上形成圆形、透明无色蚀斑,1株形成圆形、透明、红色蚀斑.经RT-PCR检测,11株克隆毒株中6株为弱毒,形成蚀斑的大小在0.4～8mm之间;5株为强毒,形成蚀斑的大小在1.0～2.0mm之间.结果表明:所形成蚀斑的大小与病毒毒力具有一定的相关性.     

猪圆环病毒重组Cap蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

利用重组杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达PCV2-ORF2基因,并以构建的重组杆状病毒为免疫原,通过杂交瘤技术,研制针对PCV2的单克隆抗体,为建立准确快速的PCV2诊断方法奠定基础。首先将PCV2-ORF2基因克隆到杆状病毒的转移载体pFastBacTM1中,然后将其转化入大肠杆菌感受态细胞DH10Bac中,与DH10Bac中的穿梭载体Bacmid发生转座,通过抗性和蓝白斑筛选,得到重组杆状病毒质粒reBacmid-ORF2,通过脂质体介导reBacmid-ORF2转染Sf9细胞,成功获得了表达PCV2-ORF2基因的P1代重组杆状病毒。将所获得的重组杆状病毒经Vivaflow200浓缩后,免疫6~8周龄BALB/c小鼠,取其脾脏与Sp2/0细胞融合,以IFA进行筛选,经多次亚克隆后得到3株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞,分别命名为5H6、4E2和5F7。通过IFA、IPMA及Western-blot试验对3株单抗特异性进行分析鉴定。结果显示,3株单抗均能与PCV2-Cap蛋白产生特异性的反应,并利用流式细胞术初步建立了对PCV2毒株感染PK15细胞的检测方法,从而为快速检测PCV2病毒奠定了基础。     

鸡组织滴虫病PCR病原学诊断方法的建立

为建立鸡组织滴虫(H.meleagridis)的PCR检测方法,本研究以确诊的感染火鸡组织滴虫的阳性鸡的肝组织DNA为模板,设计针对18S rRNA基因高度保守的特异性引物,建立组织滴虫病的PCR诊断方法。敏感性试验显示阳性样品组织DNA的最低检出限为4 ng/μL。特异性试验表明与其他常见鸡寄生虫的DNA样品均无交叉反应。该PCR方法对临床样品的检出率为100%,与组织病理学诊断结果符合率为100%。该诊断方法敏感、特异,可以用于组织滴虫病的临床诊断。     

昆明市奶牛隐性乳房炎流行状况调查

奶牛隐性乳房炎发病率高、流行广,是导致奶业经济损失最大的疾病。为了解昆明市奶牛场隐性乳房炎的流行状况,采用加州乳房炎检测法(CMT)对昆明市周边3个标准化奶牛场和3个奶牛合作社奶牛按照30%比例进行随机抽样检查。在抽检的2 297份乳样中,隐性乳房炎阳性数为897份,阳性率为39.05%,规模化奶牛场的隐性乳房炎阳性率(28.79%)显著低于奶牛合作社(56.21%)(P<0.01);奶牛后乳区发病率(69.34%)明显高于前乳区(57.64%);随着产犊胎次的增加,奶牛乳房炎患病率随之显著增高。本调查对掌握昆明地区奶牛隐性乳房炎的发病情况,以及早发现和控制该病发生、提高牛奶质量具有重要的指导意义。     

猪接种PRRSV Nsp2Δ1882-2241弱毒株后血清细胞因子的变化特征

为了解Nsp2Δ1882-2241缺失后弱化的高致病性PRRSV（TJM株）对宿主免疫学应答的刺激机理,本研究分析了免疫猪血清中的细胞因子及变化规律。将14头4周龄易感仔猪随机分为3组：第1组接种PRRSV TJM-F92株,为免疫组;第2组接种高致病性PRRSV TJ-F5毒株,为攻毒组;第3组不接种疫苗及病毒,为对照组。接种后28d,用TJ-F5毒株攻击试验猪,于不同时间点采集血样,用ELISA法测定血清中的PRRSV抗体、IL-2、IL-10、IL-12p40、TNF-α、IFN-α和IFN-β水平。结果显示：（1）与对照组和攻毒组相比,免疫组猪IL-12p40水平持续上调,于免疫后28d受PRRSV强毒攻击后,其水平开始缓慢降低,但仍高于攻毒后的对照组。（2）免疫组IL-2水平在接种疫苗后的前21d内无明显升高且低于攻毒组,在受到强毒攻击后其IL-2水平却有明显升高。（3）免疫组IL-10水平与对照组无明显差别,并在免疫14d后一直显著低于攻毒组（P〈0.01）。（4）免疫组接种疫苗后的前21d内,TNF-α水平保持稳定,28d明显上调。攻毒组TNF-α水平0～28d一直低于对照组,且在21d达到最低（P〈0.01）。免疫组在28d受强毒攻击后,其TNF-α水平下降且在攻毒7d时最为明显（P〈0.01）,此后恢复到正常水平。（5）免疫组免疫后28d时IFN-α水平升高,在受到强毒攻击后再次显著降低（P〈0.01）。免疫组IFN-β水平一直低于对照组和攻毒组,不因强毒攻击而变化。以上结果提示,IL-12上调在PRRSV免疫保护中起明显作用;另外,上调TNF-α及下调IL-10都是基因缺失疫苗发挥效力的潜在机制。