鸭疫里默氏杆菌贵州流行株蜂胶灭活疫苗制备

【目的】制备鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)贵州流行株蜂胶灭活疫苗。【方法】选取RA血清2型贵州流行株(RA-SS-8株)为基础菌株,依次利用分光光度法和平板计数法测定细菌生长曲线,再进行灭活条件筛选,以蜂胶为佐剂制备RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,并进行无菌检验、安全性检验及免疫鸭攻毒保护性试验。【结果】分光光度法测定RA-SS-8株菌液D_{600 nm}值随培养时间变化显示,细菌在0~3 h时增殖缓慢,在3~10 h时增殖趋势明显加快,在10 h以后增殖逐渐趋于平缓,随着培养时间的延长,细菌最终进入衰亡期;平板计数法结果显示,RA-SS-8株D_{600 nm}值为0.1~0.8时,该菌处于对数生长期,且D_{600 nm}值与活菌数呈现良好的线性关系;RA-SS-8株最佳灭活条件为0.2%甲醛溶液、37 ℃灭活12 h;蜂胶灭活疫苗含菌量为3.8×10⁹ CFU/mL,蜂胶干物质含量为10 mg/mL;无菌检验巧克力琼脂培养基上未见菌落生长;安全性检验以2倍免疫剂量接种雏鸭在观察期内未表现出不良反应,大体病变观察未见明显病变;免疫鸭攻毒保护性试验显示,蜂胶灭活疫苗免疫组鸭对RA-SS-8株的攻击后保护率为70%,蜂胶灭活疫苗对试验鸭心脏、肝脏组织均具有良好的保护效果。【结论】本研究成功制备了RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,为蜂胶灭活疫苗制备和动物免疫试验奠定基础。     

草甘膦对蚯蚓体内抗氧化酶和AChE酶活性的影响

蚯蚓是土壤健康的关键指示生物,为了更好地评价草甘膦对土壤无脊椎动物的影响,本研究采用土壤法测定草甘膦对蚯蚓的急性毒性;用不同浓度的草甘膦分别测定不同暴露时间下对蚯蚓超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、谷胱甘肽S转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响。结果显示,土壤法测定草甘膦对蚯蚓的LC₅₀>1000 mg/kg;在草甘膦的影响下,随着暴露时间的延长,蚯蚓SOD酶活力有着先增高后下降的趋势,CAT酶活力呈现着先下降后升高的趋势,随着时间和浓度的增长POD酶活力在草甘膦的影响下有逐渐下降的趋势;相对于空白对照,处理组AChE酶活力在草甘膦暴露14 d时显著降低。研究结果将为合理评价和监测草甘膦造成的土壤污染水平提供科学依据。     

在不同提取方法下蜜蜂基因组DNA浓度的比较

本研究采用了国内外常见的5种蜜蜂基因组DNA抽提的方法,对意大利蜂工蜂基因组DNA进行提取,并进行了浓度检测.其中方法1,方法2采用的是5日龄的工蜂蛹体,而其他3种方法采用的是成年工蜂的头胸部进行提取.试验结果表明这5种方法之间差异极显著,其中方法2的浓度最高,为84.7850±24.5974,说明在相同实验条件下,方法2(蜜蜂蛹体一次抽提法)在浓度层次上效果最好.     

慢性盐度胁迫下金钱鱼卵巢转录组分析

为了阐明盐度胁迫对金钱鱼(Scatophagus argus)代谢和生殖的影响,采用RNA-seq技术对低盐组(5)、对照组(25)和高盐组(35)处理40 d后的2龄性成熟金钱鱼卵巢进行转录组分析。结果发现,金钱鱼卵巢转录组测序获得raw reads共398681318,clean reads共396910398。从低盐胁迫相对对照组(5 vs 25)和高盐胁迫相对对照组(35 vs 25)中分别筛选到373个和874个差异表达基因(DEGs)。与对照组相比,低盐胁迫后氨基酸代谢相关基因(sds、bhmt)和脂肪酸代谢相关基因(pnpla2)显著下调;高盐胁迫后pgr、cyp17a1和ers1等生殖相关基因显著下调。KEGG通路富集分析发现,低盐胁迫组相对对照组显著富集与代谢相关的通路为半胱氨酸和甲硫氨酸代谢,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成代谢,脂肪酸生物合成,脂肪酸代谢,皮质醇的合成和分泌,醛固酮的合成和分泌,脂肪细胞脂解的调节等;高盐胁迫组相对对照组中显著富集的与生殖相关的通路为雌激素信号传导通路。这些结果表明,氨基酸和脂肪酸的代谢调控可能在金钱鱼卵巢的低渗透压调节中起重要作用...     

吡蚜酮在马铃薯中的残留与膳食风险评估

为评价马铃薯中吡蚜酮残留引发的膳食风险。2016年-2018年开展了3年12地规范残留试验,构建吡蚜酮在马铃薯中的残留检测方法,并对我国一般人群进行了膳食风险评估。马铃薯样品使用2%乙酸乙腈提取,C18净化,外标法定量,UPLC-MS/MS检测。在0.01～1 mg/kg添加水平下,吡蚜酮在马铃薯中的平均回收率为75%～85%,相对标准偏差为3%～8%。12地最终残留试验表明,50%吡蚜酮水分散粒剂按有效成分225 g/hm²施药2次,最后1次施药后14、21 d马铃薯中吡蚜酮残留量分别≤0.018 mg/kg和≤0.012 mg/kg。膳食风险评估表明,吡蚜酮的国家估算每日摄入量(NEDI)为1.633 9 mg/kg,风险商(RQ)为86.4%。马铃薯中吡蚜酮残留不会对一般人群健康造成不可接受的风险。     

Cu胁迫对柑桔叶片膜透性及酶活性的影响

以脐橙52（C.sinensis（L.）Osbeck.cv.Navelorange No.52）为试材,采用水培的方法,研究了Cu胁迫对柑桔叶片膜透性及酶活性的影响。结果表明,5、20、40μmol·L^-1Cu处理下,K^＋渗漏值分别比对照增加15.8%、30.85%、60.3%;Cu^2＋渗漏值分别比对照增加117%、222.6%、298.1%;大分子渗漏值分别比对照增加了8.6%、13.47%、27.8%。当Cu的处理浓度为5μmol·L^-1时,MDA含量显著提高,且随着Cu浓度的提高而增加。超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、多酚氧化酶（PPO）活性随着Cu浓度的增加呈先增后降,而POD则一直上升,SOD和CAT活性在0.1μmol·L^-1Cu处理时达最大,而PPO活性则在5μmol·L^-1Cu处理时达最大。0.1、5μmol·L^-1Cu处理下,柑桔叶片的蛋白质与对照相比没有明显的变化,20、40μmol·L^-1Cu处理时,柑桔体内一些原来正常的蛋白质合成受阻,同时诱导一些新蛋白的产生。     

室内植物净化空气的研究概述

通过对室内空气污染的分类和室内观赏植物净化各种室内空气污染的主要机理的分析,探讨了室内观赏植物净化室内空气的优点及存在的问题,以期为今后室内植物净化空气的研究提供参考。     

甲砜霉素在鲤鱼中的药代动力学研究

本实验在(26±2)℃的养殖水温下,采用高效液相色谱–串联质谱法(HPLC-MS/MS)研究了以30 mg/(kg·bw)的剂量对鲤鱼(Cyprinus carpio)进行单次投喂药饵后甲砜霉素(Thiamphenicol,TAP)在鲤鱼体内的药物代谢动力学。通过DAS 2.0动力学软件分析TAP在鲤鱼体内的药–时数据,结果表明符合一级吸收二室模型。TAP在肌肉、肾脏、肝脏、鱼皮、鳃、脾脏和血浆各组织的药物达峰时间(T_(peak))分别为16、2、16、8、0、2和16 h,达峰浓度(C_(max))分别为15.6、35.3、12.4、9.0、33.0、11.6 mg/kg和21.0 mg/L;药–时曲线下面积(AUC)分别为1084.5、1578.1、777.3、541.1、0.1、478.1 mg/(kg·h)和485.1 mg/(L·h),消除半衰期(t_(1/2β))分别为11.4、100.2、54.2、41.1、69.5、38.0和71.9 h。TAP在鲤鱼体内各组织的分布和消除速率相差较大;在肾脏中的药物达峰时间短且达峰浓度高于其他组织,其消除半衰期也明显高于其他组织,推测肾脏是鲤鱼体内TAP蓄积和代谢的主要器官。按照农业部《动物性食品中兽药最高残留限量》文件规定,TAP在水产动物中最高残留限量(MRL)不得高于50μg/kg,本研究中,肌肉、肾脏、肝脏、鱼皮、脾脏和血浆的TAP残留量低于MRL的时间分别从第16、16、12、12、12、10和12天开始,将肌肉和肾脏作为TAP药物残留的靶组织,建议休药期不得低于16 d。     

Antioxidant defence to ammonia stress of characins (Hyphessobrycon eques Steindachner) fed diets supplemented with carotenoids

This study aimed to find out whether dietary carotenoid (CD) supplement could influence the resistance of characins (Hyphessobrycon eques Steindachner) to ammonia stress. Two types of CD and its combination [astaxanthin (AX), β‐carotene (BC), 1 : 1 combination of AX and BC (MX)] at three concentrations (10, 20 and 40 mg kg⁻¹) were used resulting in nine pigmented diets. No differences in growth and survival of the fish among treatments were found after 8‐week rearing. Experimental and control fish were then exposed to 15 mg total ammonia nitrogen L⁻¹ (stress group) and 0.15 mg total ammonia nitrogen L⁻¹ (normal group) for 72 h, and their blood was withdrawn. No mortality resulted under such TAN concentrations. Serum total antioxidant status (TAS), serum antioxidant enzymes [superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidases (GPx)] and serum transaminases [alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST)] were chosen as indices of fish antioxidant capacity or stress resistance. SOD, GPx and AST were affected by the interactions of dietary CD and ammonia stress. The activities of TAS, SOD, GPx and AST increased under the stress. Dietary CD reduced serum SOD, GPx, ALT and AST activities. In conclusion, dietary CD increased the resistance of characins to ammonia stress.     

鹅DHRS7基因克隆、序列分析及其在鹅肥肝形成过程中的表达特点

为获得鹅DHRS7基因全长cDNA,并探讨该基因是否参与鹅肥肝的形成过程。本研究应用抑制消减杂交文库获得鹅DHRS7基因部分EST序列,采用RACE技术扩增了鹅该基因全长cDNA,并对其序列进行了生物信息分析;用荧光定量PCR技术检测了DHRS7在鹅肝脏、皮脂、腹脂等10个组织中的差异表达,以及填饲对鹅肝脏中DHRS7表达变化的影响。结果发现,鹅DHRS7基因cDNA全长1 279bp,含一个完整的开放阅读框1 011bp(可编码336个氨基酸),25bp的5′UTR和243bp的3′UTR序列;生物信息学分析结果显示,鹅DHRS7含有跨膜结构域以及NADP结合位点,且在这些功能区域变异较少;荧光定量结果显示,DHRS7在鹅肝脏和脂肪组织中都有较高表达,填饲后鹅肝脏中DHRS7的表达水平显著上调(P<0.05)。以上结果表明,DHRS7在鹅肥肝形成过程中具有重要的作用。