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采用高效热不对称交互式PCR(hiTAIL-PCR)的方法,取转基因克隆猪血液,提取基因组作为模板,扩增目的片段,将扩增获得的特异性产物,连接到PGEM-T载体上,送测序公司测序.测序结果与载体序列经比对后,获得侧翼序列.将获得的侧翼序列提交GenBank与猪的基因组数据库比对确定了在基因组上的位置.结果表明目标序列整合到猪的15号染色体的基因组克隆(nw_00188566P4)中.该方法可以有效、快捷的鉴定外源基因在基因组中的整合的具体位置,具有良好的应用前景. 相似文献
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为研究碱蓬根际和内生细菌菌株对盐碱胁迫下苜蓿幼苗生长的影响,试验以龙牧801紫花苜蓿为供试品种,将前期从碱蓬根内(JG1)、根际土壤(JT4)和茎内(JJ5)筛选出的具有较强耐盐碱胁迫能力的根际及内生细菌菌株接种于苜蓿幼苗根部。接菌1周后将中性盐(NaCl、Na2SO4)和碱性盐(NaHCO3、Na2CO3)按NaCl∶Na2SO4∶NaHCO3∶Na2CO3=9∶1∶1∶9混合,并设置0、100、150、200 mmol·L-1盐碱浓度溶液浇灌苜蓿幼苗根部,进行盐碱胁迫处理。分析盐碱胁迫下碱蓬根际及内生细菌菌株对苜蓿生长及生理的影响,并通过隶属函数和主成分分析综合评价碱蓬根际和内生细菌菌株对盐碱胁迫下苜蓿生长的影响。结果表明:3株促生细菌均能缓解盐碱胁迫对紫花苜蓿生长的抑制作用,促进紫花苜蓿生长,不同促生细菌对盐碱胁迫下苜蓿促生效果为JT4>... 相似文献
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生长激素释放因子在CHO细胞的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
在对生长激素释放因子 (GRF)基因改造和化学合成 ,并构建了其真核表达载体 pc DNA3- GRF(1- 32 )的基础上 ,用 L ipofectin将上述载体转染 CHO细胞进行瞬时表达。提取转染细胞总 RNA,用 RT- PCR和 Dot blotting检测 GRF基因的表达情况 ,用 Western blotting检测转染细胞上清液的表达产物 ,均得到了阳性结果。制备大鼠垂体单层细胞 ,测定表达产物的生物学活性 ,结果表达产物可刺激生长激素释放 ,并且比对照组提高 3.8倍。试验结果表明 ,已构建的真核表达载体 pc DNA3- GRF(1- 32 )能表达出有生物学活性的 GRF。 相似文献
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对产后母猪和断奶仔猪饲喂有效微生物菌群(EM),研究其对仔猪生产性能的影响。从产前7d开始给母猪基础饲料中添加5mL/kg的EM菌液,选产仔数不少于8头的3头母猪及其仔猪连续饲喂EM菌28d,仔猪进行断奶,统计母猪的增重、仔猪初生重、断奶重,仔猪成活率等,分析添加EM菌后对母猪生产性能的影响。在这24头断奶仔猪饲料中添加EM菌的饲料,饲喂至60日龄,统计仔猪的增重、采食量、料重比、发病数等,分析EM菌断奶仔猪生产性能的影响。另外选取3头同品种、同批次生产、产仔数相同的母猪及其仔猪饲料中不添加EM菌作为对照。结果表明,母猪产后日均采食量较对照组提高12.07%,仔猪的初生重较对照组提高15.90%,产活仔数提高了12.09%,断奶重增加9.09%,断奶头数增多20.99%,断奶成活率提高8.81%。断奶后仔猪试验组的平均采食量较对照组提高10.26%,料重比降低了7.14%,发病率下降了50.03%。说明EM菌对母猪和仔猪的生产性能均有提高作用,研究结果为EM菌在生猪养殖中的应用提供了基础资料。 相似文献
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应用PCR诊断隐孢子虫病 总被引:10,自引:4,他引:10
应用聚合酶链反应( P C R)建立了一种诊断人及牛等哺乳动物隐孢子虫病的方法。试验采用甘油漂浮 G3 耐酸漏斗过滤法纯化隐孢子虫卵囊,以液氮冻融法制备模板 D N A,根据隐孢子虫 18 Sr R N A 序列设计 P C R 引物建立其诊断方法。该方法特异性强,可检出鼠隐孢子虫( Cryptosp oridium m uris)和小球隐孢子虫( C.parvum )卵囊;敏感性高,每克粪便可检出 400 个卵囊。初步应用结果表明,所建立的 P C R 方法适合于人、牛等哺乳动物隐孢子虫病的临床诊断和流行病学调查。 相似文献
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羊源链球菌的分群鉴定及多价灭活苗的研制 总被引:1,自引:0,他引:1
2000~2003年,从安阳、邯郸等6个地区采取280份羊的病料,从中分离到150株链球菌,对其中20株典型分离株进行了生化分群鉴定及兰氏分群A~G诊断试剂鉴定.结果表明,6个地区发生的羊的链球菌病主要由C群兽疫链球菌(7/20),D群(8/20),E群(2/20)引起.其分布无明显地域性.选择C、D、E群中各1株为菌种,制备多价链球菌灭活苗,通过免疫试验,保护率达92%以上,免疫期半年以上,疫苗4℃保存期1年以上,证明该灭活苗安全性好,免疫效果明显. 相似文献
40.
由于膳食纤维和蛋白质对肠道健康和环境都有潜在的有益或有害影响,因此,膳食纤维和蛋白质在猪肠道中的发酵是一个值得关注的问题.本文综述了近年来有关膳食纤维和蛋白质发酵对猪肠道环境的影响及其对猪粪和猪舍含氮气体和异味排放的影响,同时探讨了蛋白质发酵和相关代谢化合物的生产,与膳食纤维发酵、对肠道健康、细菌蛋白质合成和氮排泄的影... 相似文献