多杀性巴氏杆菌中recN基因的克隆、原核表达及生物信息学分析

试验旨在对多杀性巴氏杆菌recN基因进行克隆和原核表达,并对其表达蛋白进行生物信息学分析。参照GenBank中recN基因序列(登录号:CP003313.1)设计1对引物,通过PCR扩增获得目的基因片段,构建pET-28a(+)-recN重组质粒并转化E.coli DH5α感受态细胞,提取质粒进行酶切鉴定,将鉴定正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,对融合蛋白进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果表明,试验成功克隆了大小约为1 677 bp的recN基因序列,通过诱导表达的His-Tag融合蛋白大小约为66.94 ku,主要以包涵体形式存在。经生物信息学分析,recN蛋白的分子式为C₂₇₃₅H₄₄₂₈N₇₈₆O₈₅₅S₁₆,消光系数为24 785,不稳定系数为43.99,属于不稳定蛋白;理论等电点(pI)为5.62,为酸性蛋白;总平均亲水性为-0.316,与试验表达的包涵体蛋白性质相同,即同为疏水性蛋白;recN蛋白在哺乳动物网织红细胞的半衰期为30 h,在酵母(体内)中的半衰期>20 h,在大肠杆菌(体内)中的半衰期>10 h;二级结构主要以α-螺旋(64.87%)及无规则卷曲(21.00%)为主;经疏水性分析,预测该蛋白有3个高疏水性区域和9个高亲水性区域。本试验结果为进一步探究多杀性巴氏杆菌recN基因的功能提供了参考依据。     

5-ALA浸种对干旱胁迫下紫花苜蓿种子萌发特性的影响

为了探究干旱胁迫下5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)溶液浸种对紫花苜蓿的调控作用,以紫花苜蓿品种中苜1号(Medicago sativa cv.Zhongmu No.1,ZM)和阿尔冈金(Medicago sativa cv.Algonguin,AG)为供试材料,了解不同浓度(0,5,10,25,50,75,100 mg/...     

盐碱胁迫对红车轴草种子萌发的影响

以红车轴草种子为试材,利用不同浓度的NaCl溶液、NaHCO_3溶液、NaCl和NaHCO_3(1∶1)混合溶液在培养皿中模拟3种盐碱环境,观察红车轴草种子的萌发状况,以期明确红车轴草的耐盐碱能力。结果表明:红车轴草种子发芽率、发芽势、相对发芽率、发芽指数、活力指数、苗鲜重和胚根长等指标,表现出随NaCl、NaHCO_3、NaCl和NaHCO_3混合溶液(1∶1)浓度的增加,总体呈下降趋势。苗鲜重和胚根长,呈现显著的负相关关系,相对盐害率与溶液浓度呈现正相关关系。NaCl胁迫下红车轴草种子萌发的耐盐浓度8.091‰,半数抑制浓度10.146‰,极限浓度12.200‰;NaHCO_3胁迫下红车轴草萌发的耐盐浓度5.483‰,半数抑制浓度7.434‰,极限浓度9.386‰;NaCl与NaHCO_3(1∶1)混合溶液胁迫下红车轴草萌发的耐盐浓度6.081‰,半数抑制浓度7.253‰,极限浓度8.425‰。蒸馏水复萌试验表明,经3种盐碱胁迫后红车轴草种子均有不同程度的复萌。综上所述,红车轴草种子具有一定的抗耐盐碱能力。     

ABC转运蛋白与巴西橡胶树产胶代谢

ABC转运蛋白（ATPBindingCassettetransporter）是目前已知最大、功能最广泛的蛋白家族之一。大多数ABC转运蛋白都能利用水解ATP释放的能量直接转运底物。许多研究结果显示,植物ABC转运蛋白在各种代谢产物的跨膜转运中起着重要作用。橡胶的产胶代谢是一种典型的植物类异戊二烯次生代谢．是影响橡胶产量的首要因素。相关实验结果显示,ABC转运蛋白可能参与橡胶树产胶代谢。本文介绍了模式植物拟南芥中的ABC转运蛋白研究进展,并对ABC转运蛋白与橡胶树产胶代谢的关系进行讨论。     

动物践踏干扰对生物结皮中微生物生态分布的影响

古尔班通古特沙漠作为北疆冬季牧场,普遍承受牲畜的践踏干扰,研究表明:动物践踏干扰导致各种类型生物结皮的覆盖度有不同程度的降低,干扰主要集中于结皮层(0～2 cm).微生物各类群对践踏干扰的反应具差异性,真菌与干扰的相关性最高,细菌和放线菌对干扰不敏感.践踏干扰改变了微生物各类群在垄间低地的数量垂直分布格局,但并未改变微生物区系组成.有机质对干扰不敏感,仍随土层加深而递减,在结皮层(0～2 cm)中与干扰率的相关性相对较高.     

家蚕BmE(spl)-like基因的克隆与表达谱分析

从本实验室构建的家蚕蛹cDNA文库中筛选到一条新的cDNA序列,生物信息学分析发现其编码的蛋白质序列与果蝇Enhancer of split基因[E(spl)]编码的DNA结合转录调控因子bHLH(helix-loop-helix)有较高的同源性,将该基因命名为BmE(spl)-like(Bombyx mori Enhancer of split like)。该基因的ORF长606 bp,编码201个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量22.3 kD,等电点9.7。构建重组表达质粒pET-28a-BmE(spl)-like并在E.coli BL21(DE3)菌株中表达BmE(spl)-like蛋白,经亲和层析和FPLC反向柱纯化融合蛋白His-BmE(spl)-like并制备了抗体效价1∶25 600以上的多克隆抗体。用qRT-PCR方法检测BmE(spl)-like在家蚕成虫发育期的转录水平最高,结合果蝇同源基因的功能,推测该基因与蚕蛾的翅发育相关;该基因在家蚕5龄幼虫各组织中的转录水平以表皮最高,马氏管中最低。Western blotting检测BmE(spl)-like在家蚕5龄幼虫性腺中的表达水平最高,其次是丝腺、表皮、脂肪体、肠组织,在头部、马氏管和气管中的表达水平极低,与qRT-PCR检测的BmE(spl)-like在各组织中的转录水平有些差异。     

杉木树干材积分析

就杉木人工林立木树干材积的估测，材积按树高分布，材积的组成等有关问题进行了探讨。     

棉花新品种赣棉杂1号的选育及示范

赣棉杂1号是江西省棉花研究所采用杂种优势利用的方法选育出的江西省首个优质、高产杂交棉新品种.该品种的母本为优质、抗病、高产的自育材料YL168;父本为经航天诱变育种材料中系统选育而成、适纺60支纱以上的特优材料YM-1;通过在F1代优势测定试验、品种比较试验、省级区域试验、生产示范等试验示范,赣棉杂1号表现突出,一般子棉产量为4 500 kg/hm2、皮棉产量为1 900 kg/hm2,霜前花率85%;2.5%跨长≥30 mm,比强≥33.2 cN/tex,马克隆值3.7～4.8;抗棉枯萎病、枯萎病指7.4,抗逆性能较强,综合性状优良.根据赣棉杂1号的特征特性提出了相应的高产栽培措施.     

高温胁迫对禾谷镰孢生长和致病力的影响

为探究高温胁迫对禾谷镰孢生长和致病力的影响, 本研究测定了禾谷镰孢5株耐高温菌株和4株温度敏感型菌株在25℃和30℃下的菌丝生长速率、产孢量、孢子萌发率以及不同胁迫压力下的生长速率、致病力和DON毒素含量等。结果表明, 不论耐高温菌株还是温度敏感型菌株, 30℃高温对其菌丝生长均有抑制作用, 但对产孢量和孢子萌发有促进作用;30℃高温能减轻NaCl和CaCl2胁迫对禾谷镰孢生长的抑制, 但是不影响KCl、刚果红, SDS和H2O2对病原菌的抑制作用;在30℃下, 大部分耐高温菌株的致病力不变或降低, 而大部分温度敏感型菌株的致病力反而增加, 30℃对大部分菌株的DON毒素产量有一定促进作用。研究结果可为研究气候变化下小麦赤霉病的流行和预测提供理论基础。     

能量饲料原料在家禽日粮中的净能评定研究

准确评定饲料能量的有效能值是以最佳效率满足家禽的营养需要以及保证其良好的生产性能的关键。净能体系在代谢能体系的基础上考虑了热增耗的损失,在能量分配上更加全面,作为评定体系逐渐被推广,能量饲料原料作为家禽重要的日粮能量来源,提高其能值评定的准确性不仅有利于饲料配方的设计,还能降低生产成本、提高利润。因此,文章综述了家禽净能体系的构建及优势,及其在能量饲料原料上的应用研究进展。