苏姜猪MC4R基因多态性及其与生产性状的关联分析

本研究旨在探讨MC4R基因多态性对苏姜猪生产性状的影响,以期能够筛选出可用于提高苏姜猪生产性状的分子标记.利用DNA混合池和Sanger测序法对MC4R基因外显子进行单核苷酸多态性(SNP)检测,分析SNP的遗传多态性及其与生产性状的关联性.结果显示,苏姜猪MC4R基因外显子中共检测到6个SNP位点,其中1个错义突变[rs81219178 G>A(Asp298Asn)],5个3'UTR突变(rs325999553 G>A、rs344775772 T>A、rs334536177 A>C、rs335628164 C>T和rs81221063 A>T),均包含3种基因型,且符合Hardy-Weinberg平衡,2个SNP位点为低度多态,4个SNP位点为中度多态.关联分析结果显示,rs81219178 G>A(Asp298Asn)位点对胸围和胸宽有显著影响,5个3'UTR突变位点对体质量、体高和胸围有显著影响.rs325999553 G>A和rs344775772 T>A呈现高度连锁,rs334536177 A>C、rs335628164 C>T和rs81221063 A>T呈现高度连锁.结果提示,MC4R基因对苏姜猪的部分生产性状有显著影响,可作为苏姜猪早期选育的分子标记.     

枫泾猪、梅山猪和沙乌头猪全基因组ROH检测及候选基因鉴定

通过检测枫泾猪、梅山猪和沙乌头猪的长纯合片段(Runs of homozygosity,ROH),鉴定其与3个猪种经济性状相关的候选基因.利用全基因组单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNP)芯片数据对这3个猪群体进行全基因组ROH检测,统计ROH数量、长度及分布,计算基于ROH的近交系数(FROH),并在高频ROH区域鉴定候选功能基因.结果显示,从枫泾猪、梅山猪和沙乌头猪群体中分别检测到1588个、3314个和4419个ROH.枫泾猪的ROH平均长度为12.84 Mb,平均FROH为0.084;梅山猪的ROH平均长度为10.55 Mb,平均FROH为0.164;沙乌头猪的ROH平均长度为10.52 Mb,平均FROH为0.141.在高频ROH区域共鉴定到9个枫泾猪候选功能基因和8个梅山猪候选功能基因.研究结果为枫泾猪、梅山猪和沙乌头猪的资源保护和分子标记辅助选择奠定了基础.     

重组小鼠14-3-3蛋白theta亚型的构建

目的克隆编码14—3—3蛋白质θ亚型的cDNA，制备该蛋白质的基因重组蛋白质．方法参照小鼠14—3-3蛋白质θ亚型mRNA结构设计引物，以小鼠脑总RNA为模板，RT—PCR法克隆编码14—3—3蛋白质θ亚型的cDNA，插入原核表达质粒pGEX-4T-1，转化大肠杆菌BL21（DE3）使其表达谷胱甘肽S转移酶（GST）为标签的融合蛋白质，以凝血酶定点分解融合蛋白并采用GlutathioneSepharose4B亲和层析纯化目的蛋白．结果RT—PCR扩增产物经1％琼脂糖凝胶电泳分离可见约800bp条带，序列分析表明重组质粒pGEX-1433theta中的插入子为738bp，编码245个氨基酸，其核苷酸及氨基酸序列与PubmedNM-011739展示的结果一致．重组质粒pGEX-1433theta在BL21（DE3）中的表达量随IPTG诱导时间递增，融合蛋白质为可溶性组分．亲和层析纯化的14—3—3theta在SDS．PAGE上表现为单一条带，表观相对分子质量为30ku．每L培养菌液可收获4mg基因重组型小鼠14—3—3theta．结论克隆了编码小鼠14—3-3蛋白质θ亚型的cDNA，制备了高纯度基因重组型小鼠14—3—3theta，为进行单克隆抗体的制备奠定了坚实的基础．     

上虞丘陵山区杜英-蚯蚓-家禽立体生态功能的研究

根据上虞丘陵山地土地利用的特点，研究畜禽粪有机废弃物的无害化、资源化良性循环利用，建立杜英—蚯蚓—家禽立体生态模式。通过分析系统的经济效益和生态功能，表明各环节是互利互补、相互促进的良性循环。     

不同发情阶段的绵羊血清对绵羊精子获能和体外受精的影响

为比较不同发情阶段和不同浓度的绵羊血清在绵羊体外受精过程中对绵羊精子体外获能及存活时间、受精效果的影响,试验以绵羊输卵管合成液(SOF)为基础获能液,在其中分别添加发情当天、发情结束和发情间期的绵羊血清,血清浓度分别为0%、2%、5%、10%和20%.利用金霉素荧光染色(CTC,chlortetracycline)法及体外受精2种方法检测不同血清及其浓度对绵羊精子获能的影响.结果表明:1)当在获能液中添加发情当天绵羊血清时,在10%和20%血清浓度下作用45 min的获能效果最好,其获能而且未完成顶体反应的精子率(45.28%和44.52%)显著高于0%、2%和5%血清浓度组(30.14%、28.71%和35.49%,P<0.05);2)当在获能液中添加发情结束时或发情间期的绵羊血清时,在含不同浓度的这2种血清的获能液中作用45 min后,各浓度组引起的获能精子百分率变化均不显著(P>0.05);3)在含20%发情当天绵羊血清的获能液中,精子的存活时间(18 h)显著高于含20%发情结束和发情间期的绵羊血清的获能液(11 h;11 h);4)在不同血清诱导获能后进行的体外受精的试验中,添加发情当天绵羊血清组的卵裂率和囊胚率(62.5%和26.25%)均显著高于发情结束时血清组(42.22%和11.11%,P<0.05)和发情间期血清组(37.36%和15.38%,P<005).以上结果表明:在进行绵羊体外受精试验中,采用20%发情当天绵羊血清作用45 min比采用发情结束和发情间期的绵羊血清能更好地诱导精子获能.     

姬松茸菌丝体深层培养条件的研究(续)

2 2 2　装瓶量对菌丝生物量的影响 :选择 5 0 0mL三角瓶 ,装量分别为 :6 0mL ,80mL ,10 0mL ,12 0mL ,14 0mL ,16 0mL ,180mL ,2 0 0mL进行试验。图 2 ,14 0mL装液量菌丝产量最高 ,选择 14 0mL装液量进行发酵。2 2 3　培养基起始pH对菌丝产量的影响 :图 3显示 ,在pH3～ 10的范围内菌丝均能生长 ,当pH为3～ 6时 ,菌丝生长量一直呈上升趋势 ,当pH为5 0时 ,菌丝生长量最大 ,继续提高pH值 ,菌丝生长量逐渐减少 ,因此确定姬松茸的最适起始pH在 5～ 6左右。2 2 4　接种量对菌丝产量的影响 :接种量分别为3% ,5 % ,10 % ,15 %和 2 0 % …     

禽类Mx蛋白的研究进展

Mx蛋白在许多生物体内发现,具有广泛的抗病毒作用和GTP酶水解活性,是Ⅰ型干扰素诱导的蛋白,属于大分子GTP酶动态蛋白家族,其特征在N端有一个三联体GTP结构域和发动蛋白家族的结构特征序列,以及C端高度保守的亮氨酸拉链结构域。本文对Mx蛋白的发现、结构、表达调控、抗病毒活性等作一简要综述,着重介绍了禽类Mx蛋白的研究进展,并对禽类Mx蛋白研究的应用进行了展望。     

CTC法结合体外受精比较不同方法对绵羊精子体外获能的影响

为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果，新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA，A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精，并利用金霉素荧光染色（chlortetracycline，CTC）法结合各自相应的体外受精结果对其获能效果进行检验。结果显示上游法处理后精子的获能比例和受精后的卵裂率均高于其它组, 说明肝素上游法可以较好的诱导绵羊精子获能。     

七彩山鸡球虫种类调查

目的对安徽省及上海市郊4个七彩山鸡养殖场的七彩山鸡球虫进行种类调查,为诊断和防治七彩山鸡球虫病提供依据。方法采集新鲜的七彩山鸡粪便,常规方法淘洗,过滤,加重铬酸钾溶液培育。饱和蔗糖溶液收集卵囊,镜检,鉴定虫种。结果共发现9种球虫,其种类和所占百分比分别如下:山鸡艾美耳球虫(10.90%)、疏散艾美耳球虫(7.46%)、十二指肠艾美耳球虫(25.05%)、雉艾美耳球虫(11.66%)、兰格雷尼艾美耳球虫(2.87%)、大孔艾美耳球虫(13.96%)、温和艾美耳球虫(11.85%)、锦雉艾美耳球虫(7.26%)和E.sp(8.99%)。结论安徽省及上海市郊七彩山鸡感染的球虫种类中,十二指肠艾美耳球虫为优势种。     

大豆黄酮对母鸡蛋品质及后代仔鸡肉品质的影响

本文旨在研究添喂大豆黄酮对母鸡蛋品质及后代仔鸡肉品质的影响.试验选取产蛋后期肉种鸡480只,随机分为2组,每组设8个重复.试验组在基础日粮中添喂10 mg/kg的大豆黄酮,第5周后收集种蛋,每组随机取30枚做蛋品质分析,剩余种蛋按正常程序孵化,出雏后饲养至63日龄,宰杀取肌肉做肉品质分析.结果表明母鸡饲喂大豆黄酮后,蛋壳厚度和蛋壳比重分别增加了0.03 mm(P ＜ 0.01)和0.45%(P ＜ 0.05);蛋白的Haugh单位增加了4(P ＜ 0.05);入孵蛋出雏率和受精蛋出雏率分别降低了11.5%和8.3%(P ＜ 0.05).添喂大豆黄酮对后代仔鸡生长无显著影响,但显著降低了雌仔鸡肌肉比重和肌肉的蒸煮损失率(P ＜ 0.05),显著降低雄仔鸡肌肉的滴水损失率(P ＜ 0.05);显著增加胸肌黄度(P ＜ 0.05);但对腿肌的快慢肌纤维比例、纤维密度以及快慢肌纤维的横截面积均无显著影响(P ＞ 0.05).以上结果提示10 mg/kg剂量的大豆黄酮应慎用于种蛋禽上,而在商品蛋禽上则具有良好的应用前景.