动物溶菌酶基因的研究进展

溶菌酶[Lysozyme(EC3.2.1.17),LYZ]是机体先天免疫系统中一个重要的效应分子,参与机体多种免疫反应,在溶菌过程中形成一个水解体系,破坏和消除侵入动物体内的病原,从而实现机体的免疫防御。它可以有效抑制葡萄球菌、大肠杆菌等一系列病原菌,是重要的奶牛乳房炎抗性因子之一。本文综述了溶菌酶基因的研究进展,包括其结构与进化、变异及应用前景等。     

狂犬病病毒强弱毒株感染鼠脑的mRNA差异表达基因的初步筛选

为阐明狂犬病病毒（RV）不同毒力株感染鼠脑后基因表达的差异,进一步揭示RV感染和机体抗感染应答的分子机制。本试验应用差异显示技术分析了正常鼠脑悬液、狂犬病病毒SRV9弱毒株及BD06街毒株感染鼠脑48h的基因水平变化。结果显示,与对照组相比,SRV9与BD06组有4对共同上调表达差异片段;与其它两组比较,SRV9组有2个基因上调表达,BD06组存在1个上调表达基因。这些差异基因体现了宿主细胞对RV感染的应答模式以及不同毒株感染间的差异,为深入研究RV致病机理奠定了基础。     

安徽省青阳县栎类阔叶林树木生长规律研究

本文以46年生栎类解析木为基础,运用DPS统计软件进行回归分析,分别采用Logistic、Richards、Compertz、Mitscherlich、Gauss、Log-modified、Density7种理论方程与二次曲线对栎类进行拟合,建立栎类树高、胸径、材积的最优数学模型,对其生长规律进行分析。结果表明：建立的生长模型中Richards方程拟合效果最好、精度最高。故选择Richards方程为栎类树高、胸径、带皮材积、去皮材积生长模型。栎类树高的平均生长量在20年时达到最大值,而树高的连年生长量最大值出现在14年,在20年时平均生长量与连年生长量相等。栎类胸径的连年生长曲线与平均生长曲线在24年时相交。栎类材积生长量在14年前生长较缓慢,在46年内还未出现材积平均生长量的最大值。材积的连年生长量曲线与平均生长量曲线在46年内还未相交,说明其未达到成熟龄。探讨了安徽省青阳县天然次生栎类阔叶林的生长规律,为栎类阔叶林合理利用和培育提供参考。     

6种木本植物叶浸液对钉螺驱杀作用及其生殖器官解剖结构的影响

通过应用乌桕、夹竹桃、大叶冬青、珊瑚朴、薄壳山核桃、苦楝6种木本植物叶浸液对钉螺驱杀实验及其解剖结构的影响研究,结果表明：（1）薄壳山核桃、珊瑚朴叶浸提液较短时间对钉螺几乎没有毒杀作用,苦楝叶浸液对钉螺毒杀作用最明显,其依次是夹竹桃、乌桕、大叶冬青;随着时间的推移,6种叶浸液对钉螺毒杀作用均达100％。（2）不同树种叶浸提混合液对钉螺的毒害作用明显大于单种植物浸提液。钉螺分别在大叶冬青×薄壳山核桃、夹竹桃×苦楝、冬青×乌桕、珊瑚朴×乌桕4种叶浸提混合液处理下,从5-30min,冬青X薄壳山核桃处理组的钉螺逃逸率10％～12％。假死率88％。99％;夹竹桃×苦楝处理组的钉螺逃逸率始终是0％,假死率始终是100％;冬青×乌桕处理组的钉螺逃逸率0。2％,假死率98％。100％;珊瑚朴×乌桕处理组的钉螺逃逸率8％-24％,假死率76％-97％。（3）钉螺分别在珊瑚朴、薄壳山核桃、乌桕、夹竹桃、大叶冬青、苦楝6种叶浸提液处理24h后,6种处理的雄性螺的阴茎、雌性螺的卵巢解剖结构分别与对照相比,均无明显变化。因此,在建设血防林时,可以考虑利用像大叶冬青、乌桕、夹竹桃、苦楝等树种营造混交林,对钉螺的分布与驱散有一定的作用。     

ETEC K88菌毛蛋白抗体PPA-ELISA检测方法的建立

以纯化的大肠埃希菌K88菌毛蛋白为包被抗原,建立了检测大肠埃希菌K88IgG抗体的间接ELISA方法。确定了间接ELISA的最适反应条件,即最佳抗原包被浓度为1μg/mL,兔抗体稀释倍数为1∶10,猪抗体稀释倍数为1∶100,确定最佳封闭液为50g/L脱脂奶粉,最佳封闭时间为0.5h,血清反应时间0.5h,二抗反应时间1h,底物室温反应时间为15min,阴阳性临界值兔血清为0.33、猪血清为0.45。证实该间接PPA-ELISA方法特异性强、重复性好、敏感度高,可以作为疫苗效力检验和流行病学调查的参考方法。     

一株鸡源猪葡萄球菌的分离与鉴定

为进一步研究引起蛋鸡产蛋下降的病原菌的致病机理,本研究从患有输卵管炎的蛋鸡输卵管中分离到一株革兰氏阳性球菌,通过培养形态观察和生化试验进行初步鉴定,并采用PCR扩增其16S rRNA基因序列进行测序,与GenBank中登录的已知序列进行比对分析,结果显示该菌与猪葡萄球菌(Staphylococcus hyicus)在进化关系上的距离最近,同源性达到99.5％以上,表明该分离株为S.hyicus.并通过小鼠毒力试验和蛋鸡回归试验对该分离株的致病力研究,表明该菌对小鼠无致病性,但可以引起生殖系统病变,导致产蛋能力下降.     

中国林蛙抗菌肽Temporin-1 CEa基因的真核表达载体构建

为了建立大量获取中国林蛙抗菌肽的方法,根据GenBank中的中国林蛙皮肤抗菌肽Temporin-1CEa基因的mRNA序列(EU624139)设计一对特异性引物,以提取的中国林蛙皮肤总RNA反转录出的cDNA为模板,将扩增的编码序列与pEASY-T3克隆载体连接获得Tem-T3;利用酶切、连接等分子生物学手段,将GFP基因连入Tem-T3克隆载体,再经酶切获得Tem-GFP片段,并插入真核表达载体pcDNA3.1,最终得到Tem-GFP-pcD-NA3.1重组质粒;利用脂质体转染法将该质粒转入绵羊成纤维细胞,48 h后可在荧光倒置显微镜下观察到GFP的绿色荧光表达;qPCR数据分析显示,与对照组相比,转染Tem-GFP-pcDNA3.1的绵羊成纤维细胞中融合蛋白Tem-GFP的表达量可提高约300倍。本研究为构建Temporin-1CEa基因山羊乳腺特异表达载体提供依据。     

东北林蛙体表两种常驻细菌的分离鉴定

以自然状态下健康东北林蛙(Rana dybowskii)体表常驻菌群为研究对象,用无菌水漂洗掉东北林蛙体表暂住菌后,用无菌拭子收集蛙体表常驻菌并进行培养,之后对单菌落进行分离纯化。通过对菌落形态观察、生化反应管等生化方法测定及16S rDNA序列检测,两方法同时鉴定出东北林蛙体表常驻细菌2种:醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)和产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes),属于环境常见革兰氏阴性细菌。根据结果推测东北林蛙体表常驻细菌来源于环境,并对其生物体起到一定的保护作用。     

旋毛虫新生幼虫期特异性基因T668主要抗原表位短肽的筛选

为进一步从T668基因编码的蛋白中寻找到敏感性及特异性较高的抗原表位,对T668主要抗原表位区进行抗原表位作图,进一步设计了一套共16条覆盖整个抗原表位决定区的短肽,并与GST融合表达,用Western blot筛选具有高反应原性的短肽。结果显示,N5EM4、N5EM5、N5EM7、N5EM8、N5EM9、N5EM116条融合短肽与感染旋毛虫的猪血清有强阳性反应条带,但均表现出较明显的假阳性。将筛选出的6条短肽人工合成后与牛血清白蛋白偶联,利用Dot blot进一步验证,结果显示融合短肽N5EM11-BSA表现出良好的反应原性和特异性。此抗原短肽的发现对进一步确定T668蛋白虫体定位、功能及旋毛虫病诊断试剂盒的研发奠定了基础。     

蜘蛛丝的基础和应用研究概况

本文简述了蜘蛛丝的种类、化学组成及基因表达等概况,介绍了蜘蛛丝的性能、基因研究和蜘蛛丝的应用研究及前景,重点介绍了利用哺乳动物、微生物、植物及转基因家蚕生产蜘蛛丝的方法。