Response of CREG1 promoter to serum starvation in human vascular cells

AIM: In order to explore the regulatory mechanisms of the human cellular repressor of E1A-stimulated genes (hCREG1) in vascular smooth muscle cells (VSMCs)-HITASY and in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), we clone and construct hCREG1 promoter vector to detect its expression in different vascular cells. METHODS: With the results of biological information, the fragments including -3 677 bp, -2 310 bp and -945 bp upstream sequences of hCREG1 were amplified respectively using human genomic DNA template by PCR. The products were inserted into pMD18-T vector, and then were subcloned into pEGFP-1 report vector to obtain the pEGFP-hCREG1-promoter vectors. The pEGFP-hCREG1-P3677, pEGFP-hCREG1-P2310 and pEGFP-hCREG1-P945 vectors were transfected into HITASY cells and HUVECs transiently and the expression of green fluorescent protein (GFP) was detected respectively by Western blotting and fluorescent microscope. RESULTS: It was confirmed that all three PCR fragments inserted into vectors were corrected by sequencing analysis. However, the expression of GFP was different significantly in both types of vascular cells. The expression of GFP in HUVECs was higher than that in HITASY cells. Meanwhile, the expression of GFP in HITASY cells with 0.5% FBS was increased obviously compared to that in HITASY cells with 10% FBS. CONCLUSION: The reporter vectors of hCREG1 promoter are constructed successfully in which the core promoter region might be located in -945 bp-0 bp of 5′ upstream sequences. This study will provide an experimental basis for exploring the regulation of hCREG1 expression.     

土地征用农民利益谁来负责?

山东省青岛胶南市滨海街道办事处（原大珠山镇）王家村，外交部部长李肇星的家乡，在经济发展和土地出让征用中，农民利益受到严重侵害。     

轮纹异痂蝗触角感器的扫描电镜观察

利用扫描电镜观察了轮纹异痂蝗[Bryodemella tuberculatum dilutum(Stoll)]成虫触角感器的类型和分布。结果表明:轮纹异痂蝗触角为丝状,由柄节、梗节和鞭节组成,雄性个体鞭节包括24个亚节,雌性个体鞭节包括23个亚节。雌雄个体均具有12种感受器,即毛形感受器、刺形感受器(Ⅰ型和Ⅱ型)、锥形感受器(Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅴ型)、腔锥形感受器、腔形感受器及Bhm氏鬃毛。根据各类感器的形态、分布和显微结构探讨了其可能承担的功能。     

不同温度下番石榴实蝇在芒果上的生长发育及存活率

本试验在室内17~35℃的固定温度下对番石榴实蝇的生长发育、成虫羽化时间及存活率等生物学习性进行了初步研究。结果表明,在17~32℃,随着温度逐渐升高,番石榴实蝇卵、幼虫和蛹的历期逐渐缩短,但35℃时的历期比32℃时有所延长;在23~32℃,随着温度升高,成虫产卵前期逐渐缩短。卵、幼虫、蛹和成虫产卵前期的发育起点温度分别为12.18、7.13、11.75和12.85℃;有效积温分别为20.16、124.11、155.50和339.09日·度。成虫羽化时间从黎明持续至黄昏,在较低和较高的温度下,成虫大多集中在上午羽化,而在23~26℃下,成虫全天羽化时间比较均衡,在正午前后羽化更多。在20~32℃,从卵发育至成虫的总存活率均为70%以上,17℃时为56.15%,35℃时仅为28.56%。     

翅形态特征在重阳木斑蛾成虫性别鉴定中的应用

为了明确重阳木斑蛾的翅形态特征在其性别鉴定中的作用,探索雌雄难于区分的成虫的数值鉴定方法。采用图像处理与分析技术,通过爱普生扫描仪获取重阳木斑蛾前翅图,利用BugShape v1.0软件提取雌雄成虫翅的轮廓特征,利用tpsDig2软件获取翅脉交叉点位置特征,并利用独立样本t检验和标志点空间普氏叠加和扭曲分析,以明确此类特征在该成虫雌雄鉴定中的作用。结果表明,重阳木斑蛾成虫左右前翅轮廓特征在同一性别中差异不显著。仅利用左前翅数据进行分析时,翅面积、短轴长度、等效圆半径、偏心率、球状性和圆形度在两个性别中存在极显著差异,周长和长轴长度的差异达到显著水平,而紧凑度和叶状性差异不显著。使用左右前翅作为数据集进行分析时,除紧凑度和叶状性差异仍不显著外,其余参数均达到极显著水平。雌雄前翅轮廓特征作为指标来判别性别时正确率为100%,但存在左右翅相互错判现象。翅膀内部翅脉交叉点的空间位置在个体间存在较大差异,主要表现在相对于翅的横向方向变异大。雌雄间的差异主要存在于外缘附近的翅脉交叉点。结论:通过前翅的轮廓特征可以区分重阳木斑蛾雌雄成虫的差异。翅脉交叉点空间位置在雌雄间和个体间存在一定的变异。     

广西喀斯特地区耕作对土壤水分及降雨响应机制的影响

为揭示耕作方式对土壤特性及土壤水分的降雨响应过程的影响,以广西喀斯特地区粉垄耕作和免耕甘蔗种植地为研究对象,利用田间定位监测系统对0～10、10～30、30～50 cm土壤含水量及降雨量进行连续观测,并对土壤的基本理化性质进行测定.结果表明:①粉垄耕作的土壤总孔隙度增加,容重降低.在0～10、10～30、30～50 c...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的诊断及其分子特点

采用流行病学调查、临床症状观察、病理学检查、病毒分离、分离毒株测序以及遗传演化分析的方法,对北京及其周边地区4个猪场剖检的4头猪进行分析。结果:流行病学和临床症状表现为急性高热性传染病;病理学观察为非化脓性脑炎和间质性肺炎等多器官严重的病理变化;RT-PCR和病毒分离确定该疫情的主要病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。与典型PRRSV感染不同的是:成年猪感染率达50%以上,病死率达80%以上;PRRSV分离株全基因序列分析表明属于PRRSV北美洲型,特别是PRRSV NSP2不连续缺失30个氨基酸,说明此次流行的PRRSV毒株可能为高致病性毒株。     

马动脉炎病毒N蛋白基因GST融合表达载体的构建及表达

采用RT-PCR方法扩增出马动脉炎病毒核衣壳蛋白基因0RF7,并将其克隆到pMDl8-T载体,构建成重组质粒pMDl8-N,在上海生物工程公司测序。结果表明,所克隆的核衣壳蛋白基因序列与EAVNC-002532株的同源性为99％。表明0RF7是EAV基因组内的保守序列,将0RF7亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建成重组质粒pGEX-6P-N,用pGEX-6P-N转化表达菌株BL21（DE3）,诱导表达后SDS-PAGE和Westernblotting分析表明,克隆在谷胱苷肽硫转移酶（GST）下游的核衣壳蛋白基因与GST获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-N分子质量约为40ku,为马动脉炎病毒病血清学诊断方法的建立奠定了基础。     

一株疑似外来鸡致病性大肠杆菌的分离与鉴定

通过细菌分离培养、形态学观察、生化试验和O血清型鉴定证实从某批国外进口发病雏鸡体内分离出一株大肠杆菌(F株),并利用动物试验成功复制了疾病.药敏试验和动物试验的结果表明,该大肠杆菌分离株耐药谱与国内分离菌株明显不同,对国内分离菌普遍耐药的喹诺酮类药物十分敏感;该茵对雏鸡具有明显的致病性,通过注射途径感染后的临床症状和病理变化都与自然病例类似;结合进鸡后34 h就发病并且仅发生于4个系别雏鸡中1个系别这一临床发病的特殊性,表明该大肠杆菌很可能是从国外携带而来.