鸽毛滴虫感染Dot-ELISA检测方法的建立

为了制备兔抗鸽IgG抗体-HRP,建立斑点酶联免疫吸附试验定性检测鸽毛滴虫抗原的检测方法,将纯化的鸽IgG加入佐剂免疫兔子,获取纯化的兔抗鸽IgG抗体;采用简易过碘酸钠法标记兔抗鸽IgG,获取兔抗鸽IgG抗体-HRP;同时将鸽毛滴虫用超声波粉碎加入佐剂后多次免疫健康鸽获取鸽抗鸽毛滴虫高免血清(一抗);然后在2×106个/mL的鸽毛滴虫抗原量下,用不同浓度的一抗抗体、兔抗鸽IgG抗体-HRP进行试验;并对70个临床样品进行检测。结果显示,在2×106个/mL的鸽毛滴虫抗原量下,一抗与兔抗鸽IgG-HRP最佳工作浓度分别为1∶100和1∶500;70个样品中,48个镜检为阳性的样品用Dot-ELISA检测有44个呈阳性,阳性符合率为91.7%;22个镜检为阴性的样品用Dot-ELISA检测有12个呈阴性,阴性符合率为54.5%;Dot-ELISA检测与镜检结果的总符合率为80%。结果表明,本试验成功地建立了鸽毛滴虫感染的Dot-ELISA检测方法。     

Development and Application of a GeXP-multiplex PCR Assay for Detection of Seven Foodborne Pathogenic Bacterias

This experiment was developed to simultaneously detect the seven common foodborne pathogenic bacterias include E. coli O157:H7, Salmonella, V. cholera, L. monocytogenes, C. jejuni, V. Parahemolyticus and S. aureus. Seven pairs of specific primers were designed according to the conserved sequences of the genes from each pathogen available in the GenBank database. Single and mixed pathogen DNA templates were used to evaluate the specificity of the GeXP-multiplex assay. Control group was set up, recombinant plasmids were constructed, and samples of different DNA concentrations were randomly combined to verify the sensitivity, specificity, accuracy and anti-interference of the established GeXP method. To certify the accuracy and reliability of the GeXP assay, it was evaluated using 120 clinical specimens that were compared with the single PCR. The obtained results showed that the corresponding specific fragments of genes were amplified by the single and the multiplex GeXP PCR assay. The detection limit of GeXP was 10³ copies·μL^-1 when all of seven bacterial pathogens were detected. The results of the interference assay showed the presence of specific amplification peaks when different templates. The detection rate of the GeXP multiplex PCR method was 2.50% (3/120)-15.83% (19/120) while the conventional PCR was 2.50% (3/120)-15.00% (18/120), and GeXP multiple PCR detected 8 more positive cases, which means that, the GeXP was more sensitive and accurate in the detection of the clinical samples. In conclusion, this GeXP-based multiplex PCR is a high-throughput, specific and sensitive test to detect seven common foodborne pathogenic bacterias. This assay provides a method in rapid molecular diagnosis for mix clinical seven common foodborne pathogenic bacterias.     

兰州市黄河风情线行道树柳树穴土壤有机质及盐碱特征

采集黄河风情线沿岸行道树柳树穴土壤,研究其有机质、全盐、pH等理化性质,以摸清园林绿地土壤的基本性状。结果表明,土壤有机质在表层土壤含量较高,深层土壤有机质含量相对较低;北滨河路中山桥一龙源段有机质平均含量最高,银滩桥一南滨河路秀川桥段有机质平均含量最低;土壤全盐含量绝大多数处于较低的水平,对种植植物不会产生盐害作用,60～80cm土层有全盐含量较高的现象,即为盐渍化土壤;土壤pH全部是碱性和强碱性土壤。     

建植第1年刈割对黑麦草+白三叶草地杂草空间格局的影响

栽培草地稳定性是近年来草地建植与管理的核心问题之一,其中草地抗杂草入侵是其稳定性的重要表现形式。本研究应用地统计学分析方法,分析了刈割处理下多年生黑麦草(Lolium perenne)+白三叶（Trifolium repens）混播草地杂草生物量空间分布的异质性。结果表明,不同刈割强度下,多年生黑麦草+白三叶混播草地入侵杂草地上生物量空间格局异质化程度及其相关范围变化比较明显。变异函数的基台值(C0+C)在不同刈割强度下的变化表明,在重度刈割条件下,杂草地上生物量空间分布异质性最高(12.530),对照条件下次之(4.751),轻度刈割条件下较低(4.557),中度刈割条件下最低(3.149)。变异函数的相关范围(A0)表明,在重度刈割条件下空间相关范围最大(1 004.1 cm),中度刈割条件下最小(122.1 cm),轻度刈割 (161.9 cm)和对照(219.1 cm)条件下居中。空间变异比分析表明,由空间自相关因素引起的空间异质性占主要部分(50.3%～93.5%)。空间分布格局图(Kriging map)分析进一步显示,不同刈割强度下多年生黑麦草+白三叶混播草地杂草地上生物量格局变化显著。     

锰在鸡肠道中吸收的特点、影响因素及分子机制

锰是动物必需的微量元素之一,但鸡等家禽对锰的吸收率极低,为1%～3%。本文综述了锰在鸡肠道中的吸收特点、影响锰吸收的因素及其分子机制,旨在为寻找有效提高家禽锰吸收利用的途径提供参考依据。     

数控机床运行状态的混沌特性识别

为了研究数控机床运行状态是否具有混沌特性,以数控机床主轴为研究对象,以机床主轴振动时间序列为采集数据,通过选取合适的延迟时间τ和嵌入维数m,对数据进行向空间重构,从而用单一的系统输出时间序列来构造一组表征原系统动力学特性的坐标分量。通过求其最大Lyapunov指数是否大于0来判断机床运行状态是否具有混沌特性。     

国外牛肉产量级发展及我国产量级制度建立问题探讨

完善的牛肉分级体系一般都包括质量等级标准和产量等级标准。产量等级主要描述胴体的产肉性能,如产肉量、产肉率等,与胴体重、背膘厚、眼肌面积等指标密切相关。详细介绍各国产量等级标准,提出我国产量等级标准的制订必须遵循通用性、可操作性和前瞻性原则。     

鸡AMPD1基因PCR-SSCP分析与相关性状的研究

5′-磷酸腺苷脱氨酶1(AMPD1)是嘌呤代谢中的一种重要酶类,它的功能是催化AMP(一磷酸腺苷)脱氨,生成肌苷酸(IMP),从而影响肉质风味。试验采用单链构象多态性(PCR-SSCP)技术,以隐性白羽肉鸡、白来航蛋鸡和两个地方品种(北京油鸡、三黄胡须鸡)纯系鸡为试验材料,对AMPD1基因进行SNPs检测和基因类型判别。卡方检验结果表明: 除三黄胡须鸡和隐性白羽肉鸡、北京油鸡和白来航鸡间差异不显著(P>0.05)外,其他各品种间差异极显著(P<0.01)。AMPD1基因多态性与北京油鸡生产和屠体性状(活重、胸肌率、肌苷酸含量等)相关分析结果表明:肌苷酸含量在三种基因型间差异显著(P<0.05)。初步推断AMPD1可能为影响鸡肉中肌苷酸生成的主效基因或与主效基因相连锁。     

兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其免疫原性检测

2004年,山东省某一大型养兔场的20~30日龄幼兔突然大批发病死亡。病兔早期精神不振,多数病兔鼻腔流出脓性鼻液,随着病程的延长逐渐表现为呼吸困难,并出现鼻鼾声,以体况瘦弱,腹泻为主要症状。从中主要分离到4株细菌,根据其形态学特性、培养特性、生化特性、血清学反应特性等将分离菌鉴定为兔支气管败血波氏杆菌。然后对所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株进行(G+C)mol%含量的测定以及16SrRNA的扩增,结果(G+C)mol%含量为61.7%~62.4%,与Kersters K结果相符(61.6%~62.6%);而该菌16SrRNA核苷酸序列与GenBank中收录的AF177666株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为82.7%,与本实验室保存的禽波氏杆菌及兔败血波氏杆菌参考菌株S80103株同源性高,分别为99.7%和99.9%。利用所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株制备免疫原,通过免疫孕前母兔,使仔兔获得母源抗体,而使幼仔兔获得早期保护,效果较好。     

利用血液维生素A的相对剂量反应评价肉仔鸡维生素A营养状况的研究

试验1采用完全随机试验设计 ,将360只1日龄健康艾维茵肉仔鸡称重后随机分为12组 ,每组30只。其中 ,锌设0、5、40和80mg/kg4个添加水平 ;VA设0、3000和6000IU/kg3个添加水平 ,共构成12组。试验2也采用完全随机试验设计 ,将450只1日龄健康艾维茵肉仔鸡称重后随机分为15组 ,每组30只。其中 ,锌设25、65、145、305和625mg/kg5个添加水平 ,VA设3000、6000和12000IU/kg3个添加水平 ,共组成15组。通过研究日粮锌与VA水平对肉仔鸡生产性能、VA代谢和血清VA浓度的相对剂量反应(RDR)的影响 ,初探利用RDR评价肉仔鸡VA营养状况的可能性。结果表明 :在本试验条件下 ,应用血清VA的RDR值可监测肉仔鸡的VA营养状况 ,结合血清VA浓度可以判断引起血清VA浓度低下的原因 ,是由于日粮VA本身供给不足所致 ,还是由于其它原因引起的。但当日粮VA增加至一定水平时 ,RDR对机体的VA营养状况反映不敏感