虎纹捕鸟蛛毒素提取的研究

为探索提取广西产虎纹捕鸟蛛(Selenocosmia huwena)毒素的新方法,选取雌性虎纹捕鸟蛛225只,根据提取方法(直接咬软管法、直接咬瓶法、激怒咬渐法激怒咬瓶冲洗法)分为4组,结果表明,采用直接咬软管法提取虎纹捕鸟蛛毒素,平均每只蜘蛛可以获得冻干毒素2.28 mg,与采用直接咬瓶法所获得的2.19 mg没有显著差异(P>0.05)。采用激怒咬瓶冲洗法提取虎纹捕鸟蛛毒素,平均每只蜘蛛可以获得冻干毒素重量明显高于激怒咬瓶法[(3.41±0.40)mg,(2.99±0.35)mg,P<0.05],亦明显高于直接咬软管法和直接咬瓶法。该试验结果表明,激怒咬瓶冲洗法是一种提取虎纹捕鸟蛛毒素的有效方法。     

百色市狂犬病流行病学调查分析及对策

我市是狂犬病的多发区,根据疫情上报和调查显示,该病在我市已造成了严重的公共卫生安全问题。1流行特征1.1发病情况2001～2005年共有11个县(区)80个疫点发生狂犬病疫情,发病犬126只,猫6只。人间狂犬病疫点83个,112人发病死亡(见表1)。表12001～2005年百色市狂犬病发病统计年份畜间疫点数(个)发病动物数(只)犬猫其他人间疫点数(个)发病人数2001161911017200227291192620031556291720041919324312005332121合计8012661831121.2疫情分布情况2001年～2005年按疫情发生年度统计,畜间狂犬病疫情有乐业县连续四年发生疫情,田阳、靖西、那坡、凌云、隆林五个县有三年发生,田东和德保县有两年发生,右江区、平果和田林三个县有一年发生。人间狂犬病疫情有田阳、德保、靖西三个县连续五年发生,那坡和乐业县有四年发生,右江区、田东和凌云有三年发生,平果和隆林有两年发生。1.3发病季节根据各县(区)每月上报的动物疫情报表数据统计,畜间狂犬病疫情一年四季均可发生,以夏、秋两季为高发季节,见表2。2发病原因与分析2.1养犬数量增加且以放养为主近年来,...     

氨苄青霉素单抗鉴定与酶联免疫检测方法的初步研究

利用碳化二亚胺(EDC)法将氨苄青霉素(AMP)与匙孔嘁血蓝蛋白(m cKLH)偶联制备免疫原免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,建立分泌氨苄青霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞染色体数目为97~104条,3D12株亚型为IgG2 a,用其制备的腹水ELISA效价达到2×106。亲和常数为3×10-10mol/L,抗体相对分子质量为1.54×105,与其他抗生素的交叉反应率小于0.01%。采用间接竞争ELISA方法建立检测AMP的标准曲线,在0.5~100 ng/mL范围内呈线形相关,回归方程为Y=0.056 9X+0.130 8,相关指数R2=0.994 8,以10%抑制率对应的浓度计算,该方法对AMP的检测限为0.3 ng/mL,对市售消毒纯牛奶模拟样品最低检测限为0.4 ng/mL。     

BRCA1基因多态性及其与奶牛乳房炎抗性的相关性研究

为了研究BRCA1基因突变与荷斯坦奶牛体细胞数和体细胞评分的关系,试验通过对BRCA1基因外显子13、14进行克隆、序列比对和挖掘已有突变的方法确定该基因的多态位点,采用SNaPshot技术检测了BRCA1基因25025 T>A和46126 G>T突变位点在北京郊区荷斯坦奶牛群体中的分布,并对突变位点与体细胞数和体细胞评分进行了关联分析。结果表明,荷斯坦奶牛BRCA1基因2个位点均检测到3种基因型,其中25025 bp位点TT基因型为优势基因型,46126 bp位点GT基因型为优势基因型。25025 bp位点AA基因型个体体细胞数(P<0.05)和体细胞评分(P<0.01)都显著低于TT和TA基因型;46126 bp位点TT基因型个体体细胞数显著低于GG和GT基因型个体(P<0.05),但3种基因型个体体细胞评分无显著差异(P>0.05)。本研究结果初步表明,BRCA1基因25025和46126 bp位点可作为中国荷斯坦牛乳房炎抗性的标记辅助选择。     

鸭源鸡杆菌对HeLa细胞的黏附和侵袭特性

为研究鸭源鸡杆菌(G.anatis)体外黏附和侵袭细胞的能力,选择HeLa细胞为感染模型,分别以细菌黏附和侵袭HeLa细胞数量为指标,借助革兰和姬姆萨染色及电镜观察来研究2株不同来源的鸭源鸡杆菌对HeLa细胞的黏附和侵袭特性。结果显示:黏附计数表明鸭源鸡杆菌Yu-PDS-RZ-1-SLG能高水平黏附HeLa细胞,菌株感染30、60、90、120、150min后每细胞黏附的细菌数分别为0.84、4.68、8.52、9.27、8.2个,而菌株F149T对HeLa细胞有较低的黏附作用。侵袭试验表明Yu-PDS-RZ-1-SLG有低度侵袭力,侵袭的细菌数在150min时达到最大,约8.27·1 000细胞-1,随后细胞破碎,细胞逐渐脱落,而菌株F149T未检测到侵袭力。染色及电镜试验进一步证实鸭源鸡杆菌Yu-PDS-RZ-1-SLG可黏附于HeLa细胞表面并侵入细胞内部。菌株经胰蛋白酶处理后,细菌的黏附率显著降低,表明细菌的表面蛋白参与黏附。黏附和入侵特性是鸭源鸡杆菌定殖在组织表面重要的能力,该细胞模型的建立为进一步研究其致病机制提供了条件。     

不同家畜品种毛绒角蛋白组分与相对含量分析

为了解不同家畜品种毛绒角蛋白的组成与差异,选择细毛羊、绒山羊、粗毛羊、羊驼、骆驼和牦牛的毛绒,利用还原法提取毛绒角蛋白,电泳分析其角蛋白的组分和相对百分含量。结果显示:细毛羊、绒山羊和粗毛羊都检出7种角蛋白组分,不同品种细毛羊角蛋白组分含量比较一致,低硫蛋白与高硫蛋白比例最大为3. 22,最小为2. 31;不同品种绒山羊角蛋白组分的相对百分含量差异较大,低硫蛋白与高硫蛋白比例最大为4. 18,最小为1. 52;不同品种粗毛羊角蛋白组分的相对百分含量差异也较大,低硫蛋白与高硫蛋白比例最大为6. 46,最小为3. 44;安哥拉山羊和羊驼分别检出5种和3种角蛋白组分;牦牛、骆驼都检出4种角蛋白组分,但是角蛋白组分的分子量大小不同。结果表明:毛发角蛋白组分和相对含量具有品种特异性,可为衣物中纤维的来源鉴别提供依据。     

玉米、小麦和高粱型日粮对肉仔鸡矿物元素沉积的影响

文章旨在研究不同日粮类型(玉米、小麦和高粱)对1～14 d肉仔鸡常量和微量元素沉积的影响。试验选择健康、体重一致的1日龄AA肉鸡540只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复30只鸡。试验设计3种日粮,分别以玉米、小麦或高粱原料为主,3组日粮的代谢能、粗蛋白质和必需氨基酸水平维持一致,试验共进行14 d。结果表明:除了钙的含量例外,玉米、小麦或高粱型日粮其他矿物质元素的含量表现一致(P> 0.05)。14 d肉鸡各元素沉积系数的变化由0.24(镁)到0.64(钠),其中钠沉积系数在第3天最高(P <0.05);肉鸡日粮对各常量元素的影响表现为显著差异(P <0.05);3～7 d常量元素沉积系数显著降低(P <0.05);日粮类型显著影响3 d肉鸡钙的沉积系数,显著影响5 d肉鸡镁的沉积系数及磷的沉积系数(除了14 d)和钠的沉积系数(除了3 d)(P <0.05);小麦型日粮较玉米和高粱型日粮显著降低了钠的沉积系数(P <0.05);日粮类型和日粮对常量元素沉积系数的影响无显著交互作用(P> 0.05)。;肉鸡日粮对所有微量元素具有显著影响,其中在第3天表现为最高(P <0.05);日粮类型显著影响第7天铁、锌和锰的沉积系数(P <0.05),显著影响第9天铜的沉积系数(P <0.05);日粮类型和肉鸡日粮对微量元素的影响无显著交互作用(P> 0.05)。结论 :肉仔鸡对日粮无机矿物质的利用率较低,日龄对矿物元素的沉积量具有显著影响,但玉米、小麦或高粱型日粮对肉仔鸡常量和微量元素沉积量无显著影响。     

FADS2基因在奶牛乳腺细胞中的过表达和干扰研究

为了研究脂肪酸脱氢酶2(fatty acid desaturases 2,FADS2)基因在奶牛乳腺细胞脂肪酸代谢中的作用,本研究在奶牛乳腺上皮细胞中对FADS2基因进行过表达和干扰,研究FADS2基因表达对脂肪酸合成相关基因的调控及对奶牛乳腺上皮细胞中甘油三酯含量的影响。针对FADS2基因的CDS序列设计siRNA和过表达载体pcDNA3.1-FADS2-EGFP,转染奶牛乳腺细胞检测FADS2基因过表达和干扰对脂肪酸代谢相关基因表达的影响及细胞中甘油三酯含量的变化。结果显示,试验成功获得过表达载体pcDNA3.1-FADS2-EGFP和干扰片段,转染细胞后具有良好的过表达和干扰效果。FADS2基因过表达后,1-酰基甘油磷酸酰基转移酶(AGPAT1)、固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)、3-磷酸甘油转移酶(GPAM)、脂肪酸延长链5(ELOVL5)、乙酰辅酶A酰基转移酶1(ACAA1)、脂肪酸脱氢酶1(FADS1)、二酰基甘油转酰基酶1(DGAT1)和过氧化物酶体增殖激活受体α(PPARα)基因显著下调(P<0.05),脂滴蛋白2(PLIN2)基因极显著上调(P<0.01)。FADS2基因干扰过后可引起AGPAT1、GPAM、ELOVL5、ACAA1、PLIN2和FADS1基因显著上调(P<0.05),脂肪酸合成胰岛素诱导基因1(INSIG1)极显著上调(P<0.01),DGAT1和PPARα基因显著下调(P<0.05)。甘油三酯检测结果显示,FADS2基因过表达和干扰均可降低奶牛乳腺上皮细胞中甘油三酯的含量。综上所述,在奶牛乳腺上皮细胞中,FADS2基因能调控脂质合成相关基因的表达,对乳腺脂质合成具有调控作用。     

O型口蹄疫病毒VP1嵌合基因的构建及原核表达

首先合成我国O型口蹄疫病毒2个疫苗毒株VP1基因的3个抗原袁位，与另外扩增的流行毒株VP1基因末端273bp片段相连,构建出O型VP1嵌合基因片段（VP1O）。然后，将VPIO基因连接到原核表达载体pET28a上，构建了重组表达质粒pET28a-VP1O，转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达。SDS-PAGE电泳表明。VP1O基因在大肠杆菌中获得表达。Western blotting检测证实表达的VP1O蛋白具有良好的生物学活性。对表达蛋白通过包涵体洗涤的方法进行初步纯化，获得了较高纯度的VP1O蛋白。     

白头翁根不同提取物体外抑菌试验研究

白头翁为毛莨科多年生白头翁属植物白头翁Pulsatilla chinensis Bunge Regel 的根茎.始载于<神农本草经>,列为下品,是常用中药,具有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫的功效.传统主要用于治疗细菌性痢疾、阿米巴痢疾等.现代研究认为白头翁除了抗菌和抗病原作用外,还具有提高机体免疫力、抑制巨噬细胞分泌IL-6、抗癌、抗炎、抗毒、止泻、镇静、镇痛、杀灭滴虫和球虫、抑制肠运动、抗内毒素血症等作用[1].