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52.
AIM: To investigate the effects of β-mercaptoethanol (β-ME) and all-trans rentinal acid (RA) on glial fibrillary acidic protein (GFAP) expression in mesenchymal cells derived from mouse fetal liver in vitro. METHODS: Cells suspension from 14.5-days-old mouse fetal liver were cultured in DMEM/HEPES/F12 supplemented with 20% FCS and mesenchymal cells were acquired after discarding nonadherent cells. The 5th passage cells were induced by β-ME and RA. The characteristics of treated cells were assayed by immunocytochemistry staining at 5 hours and 5 days after induction. β-actin as an internal control, GFAP gene expression of mesenchyal cells was detected with semi-quantitative RT-PCR. RESULTS: After being inducted by β-ME and RA, 80% approximately of the cells exhibited typical neural morphology and about 85% expressed GFAP phenotype. Semi-quantitative RT-PCR showed that mRNA expression of GFAP increased in treated cells versus untreated cells (P<0.01). CONCLUSION: GFAP expression in mesenchymal cells derived from mouse fetal liver in vitro increases after being treated with β-ME and RA. 相似文献
53.
The present study examines the contribution of the nucleus to meiotic competence in mouse oocytes that were reconstructed using nuclear transfer. Three types of reconstructed oocytes were produced: MP‐GV, by transplanting the male pronucleus (MP) into germinal vesicle (GV) stage oocytes; 3T3‐GV, by transplanting the nucleus of a National Institute of Health (NIH) 3T3 cell into a GV stage oocyte; and 3T3‐MII, by transplanting the nucleus of an NIH 3T3 cell into a metaphase II (MII) stage oocyte. The fusion rates differed, but not significantly, in the MP‐GV, 3T3‐GV, and 3T3‐MII groups (77, 63, 56%, respectively). Then, meiotic competence was compared in MP‐GV, 3T3‐GV and non‐manipulated GV stage oocytes as a control. Nuclear envelope breakdown occurred in all the reconstructed oocytes, as well as the control ones. The percentage of first polar body extrusion differed between the MP‐GV (100%), 3T3‐GV (72%), and control (67%) groups. DNA staining with Hoechst 33342 revealed that in the MP‐GV‐group oocytes that had reached MII stage, the chromosomes were condensed and aligned in a regular array similar to the normal metaphase plate. By contrast, in 3T3‐GV group oocytes, the condensed chromosomes were irregularly scattered in the cytoplasm. These results suggest that the donor nucleus affects meiotic competence in reconstructed oocytes. 相似文献
54.
以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应.OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础. 相似文献
55.
Acetolactate synthase (ALS) is the target enzyme for four distinct families of compounds: sulfonylureas (SUs), imidazolinones, triazolopyrimidine sulfonanilides, and pyrimidinyl oxybenzoates. We cloned and sequenced the fragments encoding ALS genes from biotypes of Monochoria vaginalis susceptible (S) and resistant (R) to SU-herbicides. The nucleotide sequences of the 39 bp Domain A region for R M. vaginalis biotype differed from that of the S biotype by a single nucleotide substitution at variable Pro codon of Domain A (CCT to TCT), predicting a Pro in the S but a Ser in the R biotype. No nucleotide differences between S and R M. vaginalis were observed in Domain D. We suggest that the amino acid substitution at Domain A region is responsible for resistance to SU-herbicides in M. vaginalis collected from Ushiku City, Ibaraki Prefecture, Japan. 相似文献
56.
57.
为探明过氧化氢(H2O2)提高燕麦耐碱性的作用,以‘定莜6号’幼苗为材料,采用珍珠岩栽培方法,在幼苗三叶一心期根部浇灌75 mmol·L-1 NaHCO3或添加二甲基硫脲(DMTU,H2O2淬灭剂)或抗坏血酸(ASA,H2O2清除剂)模拟碱胁迫,通过叶面喷施0.01 mmol·L-1 H2O2来观测H2O2对碱胁迫下幼苗生长、活性氧代谢和渗透溶质积累的影响。结果表明:喷施H2O2 能够缓解NaHCO3胁迫对燕麦幼苗生长的抑制,降低幼苗叶片O 2 · - 、H2O2和丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶、抗坏血酸过氧化物酶等抗氧化酶活性和非酶抗氧化剂抗坏血酸、谷胱甘肽含量;使过氧化氢酶、过氧化物酶活性及渗透溶质可溶性糖、游离氨基酸和脯氨酸含量显著降低,有机酸和叶绿素含量明显提高,而可溶性蛋白质含量则变化不大;添加DMTU和ASA后有效逆转了喷施H2O2对NaHCO3胁迫燕麦生长受抑和生理响应的调节。采用主成分和隶属函数分析显示,喷施H2O2显著提高了NaHCO3胁迫下燕麦幼苗的综合评价值,添加DMTU和ASA完全或部分逆转了H2O2的作用。因此,外源H2O2是通过调控活性氧代谢和渗透调节来缓解碱胁迫导致的氧化伤害和生长抑制,从而增强燕麦幼苗的耐碱性。 相似文献
58.
铅胁迫对金丝草生长及生理生化的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
采用土培方法,探究不同梯度铅胁迫(0、1000、2000和3000 mg·kg-1)对金丝草生长形态、体内抗氧化系统和渗透调节物质的影响。结果表明:低浓度(1000 mg·kg-1)处理会诱导金丝草叶片过氧化物酶(POD)活性、可溶性蛋白(SP)含量和根系抗超氧阴离子自由基活力(ASAFR)、可溶性糖(SS)及脯氨酸(Pro)含量增加,使得金丝草植株总抗氧化能力(T-AOC)处于较高水平,促进了金丝草株高、叶长和生物量的增加。随胁迫浓度增加,高浓度(2000~3000 mg·kg-1)处理下,金丝草叶片和根系丙二醛(MDA)含量迅速增加,株高、叶长、叶面积和生物量下降,生长受到抑制。但金丝草通过增强叶片和根系POD、过氧化氢酶(CAT)活性来抵御过氧化作用,提高可溶性蛋白和可溶性糖含量维持细胞正常运作,增加根系生物量占比来加强根系发育,一定程度适应了高浓度铅胁迫。综上表明,金丝草主要通过叶片和根系不同抗氧化酶差异化响应、提高渗透调节物质含量,提升金丝草植株总抗氧化能力等途径来提高Pb耐性,对Pb污染矿区植物修复有较大潜力。 相似文献
59.
在"互联网+"大潮改造着各行各业的背景下,新时期的草业企业经营管理模式正发生着深刻的变化。基于此,以草业电商的实例——草都易牧连锁超市为例,分析其经营管理模式,并运用成本效益分析法从理论上探讨其经济可行性。结果表明,草都易牧连锁超市的经营管理模式为"互联网+草业"模式。该模式能将牧区饲草料的需求和供给对接起来,增加参与其中的线上牧户与入驻企业的利润,实现二者的共赢,在理论上具有经济可行性。草都易牧连锁超市的大胆尝试是草业企业在当前经济社会环境下一种重要的"互联网+草业"创新模式。通过对"互联网+"在草业中具体应用的深入探讨,认为草业企业的"互联网+草业"模式多主体分析、实证分析以及草产业链尺度分析或将成为"互联网+草业"未来的3个重点研究方向。 相似文献
60.
以草鱼呼肠孤病毒(GCRV)873毒株为试验材料,建立了GCRV荧光定量PCR检测方法;用GCRV873株感染CIK细胞及草鱼,通过对病毒RNA复制水平、子代病毒含量以及细胞病变等情况进行监测,研究其在CIK细胞及草鱼体内的生长特性。在CIK细胞中,GCRV感染后12 h即可检测到子代病毒,36 h时,所有细胞被感染;72 h时,病毒滴度达到最高,为10~(6.75) TCID_(50)/mL。在草鱼的肝、脾、肾中,均能检测到GCRV RNA,其中肾脏中含量最高,其次是肝脏,脾脏中最少。本试验为研究GCRV致病机理及制备细胞灭活疫苗奠定了试验基础。 相似文献