miR-200a对奶山羊乳腺上皮细胞乳脂合成相关基因mRNA表达的影响

旨在构建pAd-pri-miR-200a重组腺病毒,使其在奶山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,研究miR-200a对乳脂合成相关基因mRNA表达的影响。以西农萨能羊DNA为模板扩增pri-miR-200a。采用Ad-Easy系统构建重组腺病毒载体pAd-pri-miR-200a,并于HEK 293细胞株中进行病毒的包装、扩繁。TCI50法测定病毒滴度。qRT-PCR检测miR-200a及16个乳脂合成相关基因mRNA表达水平。序列分析结果显示,pri-miR-200a包括pre-miR-200a86bp和侧翼序列共297bp。酶切结果证实pAd-pri-miR-200a构建成功。Ad-pri-miR-200a滴度达8×109 PFU.mL-1。实时定量结果表明,Ad-pri-miR-200a(MOI为200)感染奶山羊乳腺上皮细胞72h,miR-200a的表达量较对照高出2.4倍。同时miR-200a的过表达引起10个基因mRNA表达量下调,6个基因mRNA表达量上调。其中脂肪酸从头合成相关基因FASN、脂滴生成相关基因TIP47及脂肪酸运输相关基因FABP4降幅较大,分别下降了0.47、0.89及0.65倍。而TAG生成相关基因DGAT1和脂解相关基因HSL较对照分别增加了0.52和1.49倍。本研究获得的重组腺病毒Ad-pri-miR-200a能在山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,同时miR-200a过表达影响乳脂合成相关基因mRNA表达水平。     

瘤胃微生物的传统定量方法在反刍动物中的应用

瘤胃微生物作为一个完整的生态系统,受日粮成分、饲养方式、季节等诸多因素的影响,认识瘤胃微生物的功能及其活动规律复杂而困难。瘤胃微生物的传统定量方法有亨氏滚管法和最大或然数计数法,二者有着各自的优缺点。本文综述了瘤胃微生物的传统定量方法的应用状况及各自的优缺点。     

中国3种旧大陆猴TRIMCyp嵌合基因的存在状况及基因特性研究

本研究应用PCR方法检测了中国3种旧大陆猴(恒河猴、食蟹猴及藏酋猴)的TRIMCyp嵌合基因型个体的存在状况,并首次发现携带TRIMCyp嵌合基因中国品系恒河猴。同时本实验应用建立RT-PCR方法在mRNA水平上进一步检测了恒河猴和食蟹猴的TRIMCyp嵌合基因序列和特性。其编码的融合蛋白TRIMCyp丧失了对HIV-1复制的限制功能,推测具有该基因型旧大陆猴对HIV-1更易感,可用于建立新型的艾滋病非人灵长类动物模型。本研究结果将促进逆转录病毒跨种间传播的研究和建立HIV-1易感非人灵长类动物模型。     

产前热应激对仔鼠脑垂体GABAB受体发育的影响

为探讨产前热应激对哺乳动物后代脑垂体GABAB受体发育的影响,选用12只13 d孕龄的母鼠,并随机分组.试验组(热应激组)孕鼠置于42℃±0.31℃、相对湿度36.7%±1.42%的热应激箱中进行热攻击,直至肛温达到41℃,对照组孕鼠置于常温对照箱.所有孕鼠放回笼中分笼饲养,出生后1、3、5、7 d仔鼠的脑各部进行Za...     

肉桂醛、柠檬醛对犬白色念珠菌黏附力及超微结构的影响

根据先前的研究,肉桂醛和柠檬醛都有较好的抗真菌活性。本研究对肉桂醛、柠檬醛在真菌黏附口腔黏膜上皮以及对犬白色念珠菌超微结构的影响进行探索。结果表明,药物处理组白色念珠菌黏附率显著下降。扫描电镜显示,经过药物处理的犬白色念珠菌细胞表面粗糙、皱缩、萎陷、外膜空洞、胞浆内容物流出。透射电镜下,细胞普遍发生细胞壁增厚,质壁分离,萎陷,胞浆内容物外流等损伤。     

鸡骨型白血病免疫琼扩与放射摄片诊断的比较

为了探索特异性免疫学诊断方法对鸡骨型白血病(OP)的检测效果。用双盲法分批采样同时进行羽髓琼脂扩散试验和胫骨X线摄片检查对比,共检834只鸡(433羽属天然自发OP鸡群,401羽属人工诱发实验鸡群)。结果羽髓琼扩试验的OP阳性检出率为3．48％(29／834：)。阳性病理符合率为75．86％(22／29)。阳性误诊(假阳性)率24．13％(7／29),阴性误诊(假阴性)率36．15％(291／805)。而X线摄片检查的OP阳性检出率为38．37％(320／834)。X线阳性完全可获病理组织学证实,不存在假阳性或假阴性。把禽白血病羽髓琼扩试验试用于检测鸡骨型白血病尚属初次报道,其阳性检出率低而误诊率高,尚不宜作OP检测手段。放射摄片诊断的阳性检出率高而误诊率低,可快速诊断,故适用于OP检疫。     

儿茶素在家兔体内的药物动力学及生物利用度研究

对家兔单剂量静注和灌服儿茶素 (Catechin) 2 5mg/kg体重各 5只。用高效液相色谱法测定其血药浓度。房室模型分析表明静注给药后的药时数据符合无吸收二室开放模型 ,主要动力学参数为 :t1 / 2α=( 0 .1 5± 0 .0 1 )h ,t1 / 2 β=( 0 .5 8± 0 .0 2 )h ,Vc=( 1 .41± 0 .0 8)L ,Vβ=( 2 .97±0 .1 1 )L ,ClB=( 3.5 3± 0 .1 0 )L/h ,AUC =( 1 6.95± 1 .5 2 )mg/(L·h)。灌服儿茶素的药时数据符合一级吸收一室开放模型 ,主要药物动力学参数为 :t1 / 2Ka=( 0 .39± 0 .0 6)h ,t1 / 2Ke=( 0 .79±0 .1 1 )h ,tmax=( 0 .78± 0 .1 1 )h ,Cmax=( 3.35± 0 .1 6)mg/L ,AUC =( 7.45± 0 .94)mg/(L·h) ,F =( 4 4.1 8± 3.5 9) %。儿茶素在健康家兔体内的药动学特征是 :吸收迅速 ,达峰时间短 ,消除快 ,半衰期短 ,表观分布容积较大 ,口服摄入吸收不完全     

Study on Biological Characteristics and Drug Sensitivity of Haemophilus parasuis Isolated in Sichuan Province

The study was aimed to investigate the biological characsteristics and drug sensitive tests of Haemophilus parasuis isolated in Sichuan province.This paper reported the biological characteristics,16S rRNA gene PCR and drug sensitive test of the isolates by technique of microbiological and molecular biology.The results showed that the isolates had micro anaerobic and could produce satellite phenomenon,the isolates were just same in biochemical characteristics with field isolates in other area.All the isolates amplified 821 bp 16S rRNA gene.And drug sensitive tests showed that the isolates were highly sensitive to cefradine,ampicillin,cefradine,amoxicillin,cefaclor,ofloxacin,cefotaxime and furadantin,the sensitive rate was 75.61% to 87.80%,but the isolates were high resistance to lincomycin,carbenicillin,enrofloxacin,amikacin and sulfamethoxazole,and multiple-drug resistance was found among the isolates,the number of bacterial strains resistant to antibiotics were more between five and eight,the resisitance strains were 21.95% to 30.49%,7 isolates were even resistant to 13 antibiotics.The results showed the phenomenon of drug resistance of the isolates was very serious.     

高产母猪窝内体重变异的营养调控

随着现代育种技术的发展,母猪的产仔数不断提高,然而,初生仔猪窝内体重变异也随之增大,导致断奶前死亡率增加,断奶后体重差异大,成为现代养猪生产中影响营养精准供给、管理效率提高和生产效益增加的主要限制因素。本文综述了初生仔猪窝内体重变异的影响因素,探讨了能量来源、蛋白质与氨基酸水平以及功能性添加物对降低初生仔猪窝内体重变异的调控作用及可能机制,为通过营养途径提高窝内整齐度提供参考依据。     

夏、冬两季猪源葡萄球菌耐药情况比较

本研究旨在比较夏、冬两季某规模化养猪场猪源葡萄球菌的耐药情况。分别在夏、冬两季对猪场同一猪采集其直肠肛拭子样和鼻腔鼻拭子样,采用微量肉汤稀释法对分离出的葡萄球菌进行临床9种常用抗菌药物的药敏试验。结果显示,夏季鼻腔分离的葡萄球菌对阿米卡星、氟苯尼考、氧氟沙星、苯唑西林和克林霉素5种抗菌药物的耐药率均高于冬季分离的鼻腔菌。夏季直肠分离的葡萄球菌对阿莫西林/克拉维酸、苯唑西林、庆大霉素、氧氟沙星、四环素、克林霉素和利福平7种抗菌药物的耐药率低于冬季分离的直肠菌。且夏、冬两季鼻腔分离的葡萄球菌多药耐药种数在0~9耐均有分布,夏、冬两季直肠分离的葡萄球菌多药耐药种数在1~9均耐有分布。冬季鼻腔分离的葡萄球菌6耐的多药百分率显著高于夏季分离菌的多药百分率（P＜0.05）,冬季直肠分离的葡萄球菌8耐的多药百分率显著高于夏季分离菌的多药百分率（P＜0.05）。结果表明,夏、冬两季猪不同部位分离的葡萄球菌对大多数被检抗菌药物的耐药率情况不同,其耐药率与养殖场季节性用药呈现相关性。