猪接种PRRSV Nsp2Δ1882-2241弱毒株后血清细胞因子的变化特征

为了解Nsp2Δ1882-2241缺失后弱化的高致病性PRRSV（TJM株）对宿主免疫学应答的刺激机理,本研究分析了免疫猪血清中的细胞因子及变化规律。将14头4周龄易感仔猪随机分为3组：第1组接种PRRSV TJM-F92株,为免疫组;第2组接种高致病性PRRSV TJ-F5毒株,为攻毒组;第3组不接种疫苗及病毒,为对照组。接种后28d,用TJ-F5毒株攻击试验猪,于不同时间点采集血样,用ELISA法测定血清中的PRRSV抗体、IL-2、IL-10、IL-12p40、TNF-α、IFN-α和IFN-β水平。结果显示：（1）与对照组和攻毒组相比,免疫组猪IL-12p40水平持续上调,于免疫后28d受PRRSV强毒攻击后,其水平开始缓慢降低,但仍高于攻毒后的对照组。（2）免疫组IL-2水平在接种疫苗后的前21d内无明显升高且低于攻毒组,在受到强毒攻击后其IL-2水平却有明显升高。（3）免疫组IL-10水平与对照组无明显差别,并在免疫14d后一直显著低于攻毒组（P〈0.01）。（4）免疫组接种疫苗后的前21d内,TNF-α水平保持稳定,28d明显上调。攻毒组TNF-α水平0～28d一直低于对照组,且在21d达到最低（P〈0.01）。免疫组在28d受强毒攻击后,其TNF-α水平下降且在攻毒7d时最为明显（P〈0.01）,此后恢复到正常水平。（5）免疫组免疫后28d时IFN-α水平升高,在受到强毒攻击后再次显著降低（P〈0.01）。免疫组IFN-β水平一直低于对照组和攻毒组,不因强毒攻击而变化。以上结果提示,IL-12上调在PRRSV免疫保护中起明显作用;另外,上调TNF-α及下调IL-10都是基因缺失疫苗发挥效力的潜在机制。     

多价伊氏锥虫灭活疫苗制备及免疫保护试验

用湖北株、广西株和江苏株伊氏锥虫经体外培养增殖，再等量混合，制备多价伊氏锥虫灭活苗。疫苗免疫接种小鼠后，再分别用强毒湖北株、广西株和江苏株伊氏锥虫攻击，结果3组小鼠均获12／12保护。免疫保护鼠于免疫后105d时，再作第二次攻虫，结果湖北、广西和江苏组分别获得1／5，3／5，4／5保护，对照组小鼠均100％发病死亡。结果表明多价伊氏锥虫灭活苗对多种虫株均产生了良好免疫保护作用，免疫期达3个月，从而为大面积推广伊氏锥虫病苗提供了有效途径。     

高寒牧区牦犊牛巴氏杆菌病的诊断与防治

牛巴氏杆菌病又称牛出血性败血症,是由巴氏杆菌在应激因素作用下引起的以高热、肺炎、急性胃肠炎和内脏的广泛出血为特征的急性传染病。2007年7月中旬至8月初,我县大河乡大岔村2户牧民的34头毛犊牛相继发病,发病率占犊牛的49．28％,就诊前死亡9头,在强化免疫和治疗当中死亡7头。死亡率为47．06％,治愈18头,治愈率为52．94％。     

两种奶牛功能性添加剂效果对比试验

选取泌乳期高产和低产奶牛各18头。高产和低产中各随机选取9头在日粮中添加纤维素复合酶,添加量为0．1kg／t精料;其余18头在日粮中添加酵母培养物,添加量为2kg／t精料。结果显示,高产组饲喂纤维素复合酶的奶牛试验期第35天时产奶量显著高于饲喂酵母培养物的奶牛（P=0．024）,低产组饲喂纤维素复合酶的奶牛试验期内产奶量呈稳步上升趋势;高产组饲喂纤维素复合酶的奶牛乳脂率在试验期28天显著高于同组中饲喂酵母培养物的奶牛（P=0．022）,乳蛋白率在试验第7天（P=0．044）和第28天（P=0．018）显著高于同组中饲喂酵母培养物的奶牛。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株的分离鉴定

对河南漯河地区某养殖场检出的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性病料进行处理,接种到原代猪肺泡巨噬细胞中,经细胞盲传成功分离出1株PRRSV毒株,命名为HeNLH2017株,并测定了该分离株在原代猪肺泡巨噬细胞上的生长曲线。为进一步分析该分离株的遗传进化特点,扩增测定了ORF5基因和部分Nsp2基因的核酸序列。核酸同源性分析显示,该分离毒株ORF5基因和Nsp2序列与NADC30毒株同源性最高,分别为93.4%和93.8%。遗传进化树分析显示,该分离株与我国2013年以来流行的NADC30-like(Lineage1)毒株处于同一进化分支。氨基酸序列比对分析显示,ORF5基因和Nsp2序列与NADC30-like毒株具有相似的遗传变异特点,且Nsp2序列存在特征性的131个不连续的氨基酸缺失。成功分离到1株NADC30-like毒株,有助于进一步认识NADC30-like毒株在河南地区的流行情况和临床致病特点。     

气相色谱法检测牛奶及奶粉中共轭亚油酸

采用气相色谱对牛奶及奶粉中的共轭亚油酸的含量进行检测.样品通过脂肪提取、甲基化和上机测定,可以完全定性和定量分析CLA.结果表明:采用该方法可以使牛奶和奶粉中的c9,t11-CLA得到很好的分离,且方法简单、安全,结果准确可靠,检验数据重现性好.     

山羊痘病毒ORF8～ORF18缺失重组毒株的构建和鉴定

本研究旨在通过敲除山羊痘病毒(GTPV)大段基因组片段尝试构建安全性更好的基因工程减毒株和病毒表达载体.采用PCR方法,克隆了GTPV AV41株基因组ORF7～ORF8间1 242 bp的基因片段,以及ORF18～ORF19间1 355 bp的片段.接着分别以上述2片段作为左、右侧同源重组臂,构建了包含报道基因EGFP和抗性基因gpt的GTPV重组转移载体pCF-Eg.然后采用脂质体介导法,将重组转移载体pCF-Eg与GTPV AV41株共转染原代羊睾丸细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,并鉴定重组病毒的遗传稳定性和生长特性.结果成功获得1株敲除掉ORF8～ORF18间9个ORF、长达7 kb基因组片段的重组病毒vCF-Eg.该重组病毒能稳定表达绿色荧光蛋白至少10代,并且其增殖滴度与亲本毒株基本相同.表明上述区域是GTPV的复制非必需区.     

高致病性蓝耳病与猪瘟混合感染的诊断

2007年6月,湖北某猪场发生以妊娠母猪流产、死胎,仔猪及育肥猪体温升高,发病快,死亡率高为主要临床表现的疾病.根据流行病学调查、临床症状、剖检病变和实验室诊断,确诊为高致病性蓝耳病与猪瘟的混合感染.     

臭氧对空气消毒效果试验观察

臭氧是一种高效环保的空气消毒剂,为了探讨臭氧消毒应用于畜牧业空气消毒的可行性,进行臭氧对空气消毒效果试验。结果表明,在相对湿度60%～70%,消毒60 min,臭氧消毒的杀菌率可达到99.84%,说明臭氧是畜舍空气消毒较为理想的新型空气消毒剂,值得推广应用。     

出口兔肉备案养殖场追溯体系的建立

从保证动物源性食品安全的角度论述了建立养殖场追溯体系的必要性,以出口兔肉备案养殖场为例,对建立追溯体系的步骤进行了四个方面的探讨。养殖场在设施合理、制度健全的前提下,确定追溯信息的深度、广度和精确度,并作好信息衔接和代码标识,才可使追溯体系有效实施。同时对追溯体系的应用和发展趋势做了基本论述。